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Previous issue date: 2018-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / O emprego das Boas Práticas de Fabricação na indústria de alimentos, como a
higienização de superfícies, é importante para evitar a formação de biofilmes.
Campylobacter jejuni, que é o principal agente etiológico da campilobacteriose, pode
sobreviver em condições adversas no ambiente pela capacidade de formação de
biofilme. As bactérias formadoras de biofilme podem adquirir resistência à
compostos utilizados como sanitizantes na etapa de sanitização, como o cloreto de
benzalcônio (CB). Assim, faz-se necessário a busca por novos compostos com ação
antibacteriana que possam ser utilizados em alternativa aos sanitizantes sintéticos.
Os extratos de plantas vêm sendo amplamente estudados devido às suas
características antimicrobianas e por serem compostos naturais. O extrato
metanólico de Butia odorata Barb. Rodr. (EMB) teve sua ação antibacteriana
comprovada em estudos anteriores. Portanto, os objetivos deste estudo foram
avaliar a influência da superfície, temperatura, atmosfera e co-cultura com
Pseudomonas aeruginosa sobre a formação de biofilme de Campylobacter jejuni
isolados de abatedouro de frangos da região sul do Rio Grande do Sul, bem como
identificar a presença de alguns genes relacionados à formação de biofilme nesses
isolados. Também objetivou-se avaliar a suscetibilidade desses isolados ao EMB e
ao CB, através do teste qualitativo de disco difusão em ágar para o EMB, e da
concentração inibitória mínima (CIM) e da concentração bactericida mínima (CBM)
para o EMB e para o CB. A atmosfera não afetou a formação de biofilme monoespécie
de C. jejuni tanto em poliestireno como em aço inoxidável. Houve maior
formação de biofilme em temperaturas que não são as ótimas para a multiplicação
d e C. jejuni. A forma como P. aeruginosa foi inoculada para formar biofilmes duoespécie
com C. jejuni (concomitante ou pré-formado por P . aeruginosa), não
influenciou a formação de biofilme pelos isolados. Nos biofilmes duo-espécie com P.
aeruginosa, as maiores contagens de biofilme por C. jejuni em aço inoxidável
ocorreram a 25 oC. Os sete isolados de C. jejuni avaliados possuem 10 genes
envolvidos no processo de formação de biofilme, porém o gene katA não foi
encontrado em três isolados, e o gene kpsM não foi encontrado em um isolado, o
que não afetou a formação de biofilme por esses isolados. O EMB apresentou
atividade antibacteriana contra os sete isolados no teste qualitativo de disco difusão
em ágar, com halos de inibição acima de 23 mm. A CIM do EMB ficou entre 83,3 e
166,6 μL.mL-1, e a CBM foi o mesmo valor de CIM em todos os isolados. Já para o
CB, o valor de CIM ficou entre 1 e 2 μg.mL-1, e a CBM variou entre 1 e 4 μg.mL-1
entre os isolados. Dessa forma, o EMB pode tornar-se uma boa alternativa ao CB
empregado na etapa de sanitização em indústrias de alimentos. / The employment of good manufacturing practice in the food industry, as surfaces
sanitization, is important to avoid the biofilm formation. Campylobacter jejuni, which
is the main etiological agent of campilobacteriosis, can survives in adverse
environmental conditions by capacity of biofilm formation. Biofilm forming bacteria
can acquire resistance to compounds used as sanitizers in sanitization step, such as
benzalkonium chloride (BC). Thereby, it is necessary the search for new compounds
with antibacterial activity which can be used in alternative to syntetic sanitizers. The
plants extracts have been widely studied due to it’s antimicrobial characteristics and
for being natural compounds. The Butia odorata Barb. Rodr. methanolic extract
(BME) had it’s antibacterial activity proven in studies performed previously.
Therefore, the aims of this study were evaluate the factors that influence of surface,
temperature, atmosphere and co-culture with Pseudomonas aeruginosa on biofilm
formation in Campylobacter jejuni isolated from poultry slaughterhouse of Southern
Rio Grande do Sul, Brazil, as well identify the presence of some genes related to
biofilm formation in these isolates. Moreover, was aimed to evaluate the susceptibility
of these isolates to the BME and to the BC, through the agar disc diffusion qualitative
test for BME, and minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal
concentration (MBC) for BME and BC. The atmosphere did not affected the
monospecies biofilm formation both in polystyrene and stainless steel. There was
greater biofilm formation in temperatures that are not the optimals for C. jejuni
growth. The way how P. aeruginosa was inoculated to form dual-species biofilms with
C. jejuni (concomitant or preformed by P. aeruginosa) did not influenced the biofilm
formation by the isolates. In duo-species biofilms with P. aeruginosa, the higher
biofilm counts of C. jejuni in stainless steel occurred at 25 oC. The seven isolates had
10 genes that are involved in biofilm formation process, but the katA gene was not
found in three isolates, and the kpsM gene was not observed in one isolate, which
did not affected the biofilm formation by these isolates. The BME presented
antibacterial activity against the seven C. jejuni isolates tested in the qualitative test
of agar disc diffusion, resulting in inhibition halos above of 23 mm. The MIC of BME
ranged between 83,3 and 166,6 μL.mL-1, and the MBC was the same value that MIC
in all isolates. Already for BC, the MIC value stay between 1 and 2 μg.mL-1, and the
MBC value ranged between 1 and 4 μg.mL- 1 among isolates. In this way, the BME
can become a good alternative to the BC employed in sanitization step in food
industries.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpel.edu.br:prefix/4122 |
| Date | 26 February 2018 |
| Creators | Scheik, Letícia Klein |
| Contributors | 30142725072, http://lattes.cnpq.br/5231261744494804, Silva, Wladimir Padilha da |
| Publisher | Universidade Federal de Pelotas, Programa de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia de Alimentos, UFPel, Brasil, Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPEL, instname:Universidade Federal de Pelotas, instacron:UFPEL |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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