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Previous issue date: 2003 / INTRODUÇÃO: Entre suas diversas ações biológicas, o cálcio extracelular exerce um
papel fundamental na manutenção da polaridade da membrana plasmática. Procurou-se
avaliar o efeito da despolarização da membrana induzidas por baixa concentração
extracelular de cálcio ou ouabaína na apoptose e expressão da Caspase-3 em neutrófilos
(PMN).
MÉTODOS: PMN foram isolados de sangue de voluntários por gradiente de densidade e
cultivados por 18h em meios com concentração normal (1.8mM) ou baixa de cálcio
(<10nM), ou com ouabaína (1mM), um inibidor da sódio/potássio ATPase. A apoptose foi
quantificada por citometria de fluxo pela captação nuclear do iodeto de propídio. A
expressão da proteína Caspase-3 foi avaliada por eletroforese de proteínas.
RESULTADOS: Não foram observados efeitos na apoptose basal dos PMN com o uso
isolado de estímulos despolarizantes. Entretanto, os efeitos inibitórios do lipopolissacarídeo
(LPS - 1ug/ml) foram anulados quando os PMN foram cultivados em meio com baixa
[Ca++], e restaurados pela adição de cátions divalentes (cálcio, estrôncio ou manganês);
ouabaína, de forma similar, bloqueou o efeito do LPS. Tanto a depleção de cálcio
extracelular quanto a utilização de ouabaína reduziram a expressão da forma precursora da
Caspase-3.
CONCLUSÃO: A cultura de PMN em meio com baixa [Ca++] ou ouabaína, dois estímulos
distintos que induzem a despolarização de membrana, bloqueiam a inibição da apoptose
mediada por LPS em PMN e alteram a expressão de caspases. Estas observações podem
estabelecer um novo mecanismo de regulação da sobrevida dos PMN
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/3008 |
| Date | January 2003 |
| Creators | SPENCER NETTO, Fernando Antonio Campelo |
| Contributors | FERRAZ, Edmundo Machado |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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