Les cellules NK sont des lymphocytes ayant un rôle majeur dans les réponses immunes innées, particulièrement contre les cellules tumorales ou infectées par un agent pathogène. L'activation des cellules NK déclenche leur cytotoxicité cellulaire et/ou sécrétion de cytokines, telle que l'IFN-gamma. L'activité des cellules NK est régulée par une variété de facteurs intrinsèques et extrinsèques qui assurent leur tolérance et efficacité. L'analyse de la signalisation NK permettrait de démontrer leur potentiel clinique. Parmi les protéines impliquées dans la signalisation NK, les protéines adaptatrices ont été très peu analysées. Dans ce projet, je décris les adaptateurs Dok-1/Dok-2 (Downstream of kinase), lesquels sont fortement exprimés dans des cellules hématopoïétiques, notamment dans le lignage myéloïde et les cellules NK. La structure de Dok-1 et Dok-2 est pourvue de différents domaines d'interaction protéine-protéine leur permettant de recruter différentes molécules de signalisation intracellulaire. Au cours de mon travail de thèse, je démontre que Dok-1 et Dok-2 sont phosphorylées sur tyrosine suite à l'activation des NK. La surexpression de Dok-1/Dok-2 dans les cellules NK induit un frein à leur activation déclenchée par des récepteurs activateurs. En revanche, l'invalidation d'expression de Dok1 et Dok2 chez la souris entraine un défaut de développement/maturation NK, mais également une augmentation de leur sécrétion d'IFN-gamma induite par l'engagement de récepteurs activateurs. Ces résultats dévoilent ainsi que Dok-l et Dok-2 sont impliquées dans une boucle de rétrocontrôle négatif en aval des récepteurs activateurs des cellules NK chez l'homme et chez la souris. / NK cells are an important component of innate immunity by virtue of their ability to recognize microbe-infected, transformed (tumors) and allogenic cells, while sparing most autologous healthy cell. NK cell activation can elicit two different effector functions: cytotoxicity of target cell and/or secretion of a large array of cytokines and chemokines. NK cell activation is regulated by intrinsic and extrinsic mechanisms that ensure NK tolerance and efficacy. Determining signaling events downstream of the NK receptors is in this line of establishing the clinical potential of NK cells. Among the proteins involved in NK signaling, the adaptor molecules are poorly understood. Here, I described two Downstream of tyrosine kinase (Dok) adaptors: Dok-1 and Dok-2; these two proteins are mainly expressed in hematopoietic cells, especially in myeloid lineage and NK cells. Dok-1 and Dok-2 adaptors contain a variety of protein-protein interaction motifs enabling them to recruit various intracellular signaling molecules. During my PhD work, I demonstrate that the cytoplasmic signaling molecules Dok1 and Dok2 are tyrosine phosphorylated upon NK cell activation. Overexpression of Dok proteins in human NK cells reduces cell activation induced by NK cell activating receptors. Dok1 and Dok2 gene ablation in mice induces an NK cell developmental/maturation defect and leads to increased IFN-gamma production induced by activating receptors. Taken together, these results reveal that Dok-1 and Dok-2 adaptors are involved in an intrinsic negative feedback loop downstream of NK cell activating receptors in mouse and human.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:theses.fr/2014AIXM4097 |
| Date | 17 December 2014 |
| Creators | Celis gutierrez, Javier |
| Contributors | Aix-Marseille, Nunès, Jacques |
| Source Sets | Dépôt national des thèses électroniques françaises |
| Language | French |
| Detected Language | French |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation, Text |
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