La activación de JNK (c-Jun N-terminal Kinase) ha sido relacionada en modelos in vivo e in vitro con la neurodegeneración inducida por glutamato, ácido kaínico (KA) y privación neurotrófica. Además, la activación de la vía de JNK se ha descrito en enfermedades neurodegenerativas crónicas como la enfermedad de Alzheimer y la enfermedad de Parkinson. En mamíferos, se han identificado tres genes (Jnk1, Jnk2 y Jnk3) que codifican para distintas isoformas de JNK con diferente distribución tisular. Así, mientras que JNK1 y JNK2 están ampliamente distribuidas por los tejidos, JNK3 está básicamente localizada en el sistema nervioso central y, en menor medida, en corazón y testículo. La expresión de JNK3 específica de cerebro contribuye a que esta isoforma se presente como posible diana terapéutica en enfermedades neurodegenerativas. Además, diferentes estudios han evidenciado, que en ratones deficientes para JNK3 (Jnk3-/-), éstos demuestran neuroprotección y resistencia ante la excitotoxicidad del KA, ante la toxicidad del β-amiloide o en situaciones de hipoxia-isquemia. De acuerdo con esto, en la presente tesis se han estudiado los mecanismos moleculares y celulares responsables de la neuroprotección observada en ausencia de la isoforma JNK3, bajo la acción de diferentes estímulos neurotóxicos: i) el KA, como modelo experimental de epilepsia, y ii) el ácido 3-nitropropiónico (3NP), como modelo experimental de la enfermedad de Huntington. En primer lugar, se ha evidenciado que la falta de JNK3, además de reducir la muerte neuronal y la astrogliosis ante la acción del KA, modula la activación de otras MAPK, como ERK1/2 y p38. Sin embargo, la deleción de JNK3 no confiere neuroprotección ante la acción del 3NP, presentándose la vía de la calpaína/CDK5 como la responsable de la neuroprotección en este modelo experimental. En segundo lugar, se ha analizado la actividad transcripcional inducida por la ausencia de JNK3. Se ha observado una relación entre la falta de JNK3 y la activación de la vía de supervivencia de PI3K/AKT, mediante la regulación específica del gen Pik3cb. Además, esta relación no se ha detectado respecto a la ausencia de la isoforma JNK1. Por último, de acuerdo con los resultados obtenidos anteriormente se estudió comparativamente el efecto de la ausencia de JNK3 y JNK1 en el modelo del KA. Los análisis realizados de muerte neuronal, reactividad glial y expresión génica evidenciaron que la ausencia de JNK1, igual de lo que ocurría en ausencia de JNK3, mostraba neuroprotección frente a la muerte neuronal inducida por KA. En concordancia, se detectó una falta de inducción de los genes Fasl, Casp8 y Casp3 implicados en la vía extrínseca de la apoptosis tanto en ausencia de JNK3 como de JNK1. Por otro lado, la ausencia de JNK3 mostró una reducción de la reactividad astroglial y microglial inducida por KA, mientras que la ausencia de JNK1 manifestó una reducción de la reactividad astroglial. Sugiriendo que ambas isoformas divergen en las vías de actuación. / The JNK pathway activation has been implicated in in vitro and in vivo models of neurodegeneration induced by glutamate, kainic acid (KA) and neurotrophic deprivation. Moreover, activation of the JNK pathway has been described in chronic neurodegenerative diseases. In mammals, there are three genes (Jnk1, Jnk2 and Jnk3) that encode different isoforms of JNK. Whereas JNK1 and JNK2 are widely distributed, JNK3 is mainly located in central nervous system and to a lesser extent in heart and testis. Specifically, JNK3 plays a crucial role in neuronal death and different studies have shown that the lack of the Jnk3 gene confers neuroprotection to kainic acid (KA), amyloid-β and hypoxia-ischemia situations. However, the specific mechanism involved in such neuroprotection has not yet been elucidated. The present thesis was undertaken in order to clarify the molecular and cellular mechanisms responsible for the neuroprotection observed in mice lacking Jnk3 in different neurodegeneration models: i) kainic acid epilepsy model and ii) 3-nitropropionic acid (3-NP) model of Huntington’s disease.
Firstly, the results revealed that the lack of JNK3 protein attenuated the neuronal death induced by kainic acid and modulate the activation/inactivation of p38 and ERK1/2. Although the lack of JNK3 does not confer neuroprotection against 3-NP toxicity. Secondly, our results indicated that the activation of PI3K/AKT pathway in Jnk3 null mice was due to the increased of Pi3kcb transcription and this mechanism is specifically related to the lack of JNK3. Finally, according to the results obtained above, we comparatively analyzed the effect of the absence of JNK3 and JNK1 in KA model. Neuronal death, glial reactivity and gene expression analyses showed that the absence of JNK1, just as what detected in the absence of JNK3, showed neuroprotection against neuronal death induced by KA. Accordingly, a lack of induction of Fasl, Casp3 and Casp8 genes, involved in the extrinsic pathway of apoptosis, was detected in the absence of JNK3 and JNK1. Furthermore, the absence of JNK3 showed a reduction of microglial and astroglial reactivity, while the absence of JNK1 only showed a reduction of astroglial reactivity. Taking together, this data suggesting that both isoforms differ in the way of action.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:TDX_UB/oai:www.tdx.cat:10803/279362 |
| Date | 23 July 2014 |
| Creators | de Lemos Machado, Maria Luisa |
| Contributors | Junyent Herena, Fèlix, Auladell i Costa, M. Carme, Camins Espuny, Antoni, Universitat de Barcelona. Departament de Farmacologia i Química Terapèutica |
| Publisher | Universitat de Barcelona |
| Source Sets | Universitat de Barcelona |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis, info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
| Format | 255 p., application/pdf |
| Source | TDX (Tesis Doctorals en Xarxa) |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess, L'accés als continguts d'aquesta tesi queda condicionat a l'acceptació de les condicions d'ús establertes per la següent llicència Creative Commons: http://creativecommons.org/licenses/by/3.0/es/ |
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