Caenorhabditis elegans possui quatro genes de kpcs (kex2/subtilisin-like proprotein convertases): kpc-1, kpc-2/egl-3, kpc-3/aex-5, kpc-4/bli-4. Em C. elegans, dois dos quatro polipeptídeos de vitelogenina encontrados dentro dos ovócitos, YP115 e YP88, se originam a partir de um precursor polipeptídico (VIT-6) clivado pós-traducionalmente após o motivo RGKR. Nematóides transgênicos foram produzidos com construções repórteres transcricionais de GFP. Foi verificada expressão de kpc-1 tanto em neurônios quanto em células musculares e intestinais. Esses dados, aliados aos dados da literatura para os outros genes kpc de C. elegans, sugerem o envolvimento de KPC-1 no processamento de VIT-6, que é secretada por células intestinais. Ensaios de Western-blot compararam o processamento de VIT-6 em nematóides selvagens, mutantes e knock-down por RNAi para os diferentes genes kpc. A análise de nematóides mutantes e knock-down por RNAi combinado para os outros três genes de convertase de C. elegans confirmou a redundância da atividade dessas enzimas no processamento de VIT-6. / Four kpc genes are found in the Caenorhabditis elegans genome: (kex2/subtilisin-like proprotein convertases): kpc-1, kpc-2/egl-3, kpc-3/aex-5, kpc-4/bli-4. Two of the four vitellogenin polypeptides, YP115 and YP88, originate from a precursor, VIT-6. VIT-6 is cleaved post-translationally after the RGKR motif. Transgenic worms carrying GFP transcription reporter constructs were produced. Expression of kpc-1 has been localized to neurons as well as muscular and intestinal cells. These data, together with the ones available from the literature for the other kpc genes, suggest the involvement of KPC-1 in the processing of VIT-6, which is secreted from intestinal cells. Western-blot analysis compared the pattern of VIT-6 processing in wild-type, mutants and RNAi-treated worms for the other kpcs. Analysis of worms treated by combined RNAi confirmed the redundancy of KPCs in VIT-6 processing.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:teses.usp.br:tde-07042009-102906 |
| Date | 29 January 2009 |
| Creators | Juliana Andreoni Nico |
| Contributors | Carlos Eduardo Winter, Henrique Bunselmeyer Ferreira, Emer Suavinho Ferro, Paulo Lee Ho, Chao Yun Irene Yan |
| Publisher | Universidade de São Paulo, Ciências (Biologia da Relação Patógeno-Hospedeiro), USP, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP, instname:Universidade de São Paulo, instacron:USP |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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