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Capacidade de adesão, formação de biofilme e resistência a sanitizantes de cepas de staphylococcus aureus isoladas de serviços de alimentação

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Previous issue date: 2011-03-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This study aimed to evaluate the ability of adhesion, the kinetics of separation, the
pattern of biofilm formation of strains of S. aureus isolated from different Food and
Nutrition Services from João Pessoa - PB, when cultured in meat-based broth and
vegetable-based broth, and incubated at temperatures of 28ºC and 7°C for an
extended time (24 72 h). Still, we evaluated the effect of applying sanitizers sodium
hypochlorite (250 mg/L) and peracetic acid (30 mg/L) at inactivating bacterial cells in
the biofilm matrix formed previously. These experiments were used as coupons (2 x
2 cm) of polypropylene and stainless steel AISI 304, whereas these materials are
widely used in the composition of surfaces, equipment and / or utensils used in
various types of food services. The results showed a high adhesion capacity of the
strains tested in meat-based broth and vegetable-based broth with counts above 5
log CFU/cm2, regardless of surface type and incubation temperature. The
detachment of cells on the surface was at least 103 during the first 6 CFU/cm2
contact with agar for both types of substrate used, featuring a high persistence over a
prolonged incubation time (24 to 72h). There was not a clear influence from the
surface and the temperature used to evaluate the adhesion. In general, for both
types of substrate was shown a similar pattern of biofilm formation when strains
were subjected to different combinations of surface types and growth temperatures.
The number of cells (105-107 CFU/cm2) required for biofilm formation was observed
in all experimental systems already after 3 days of incubation followed by a linear
decrease after the 6th day, with the exception of strain S28 grown in vegetablebased
broth, which showed values around 104 CFU/cm2 the first 24 hours of
incubation. A range from 2.6 to 3.7 log CFU/cm2 for strains incubated meat-based
broth and 2.0 to 3.3 log CFU/cm2 for strains incubated in vegetable-based broth was
observed in reducing cells in the matrix of the biofilm caused by peracetic acid while
the sodium hypochlorite reduction was about 2.1 to 2.7 log CFU/cm2 and 1.5 to 2.1
CFU/cm2 for strains grown in meat-based broth and vegetables, respectively. From
the results obtained, it can be concluded that the strains tested showed a high
capacity for adhesion and biofilm formation on food contact surfaces when exposed
to different culture media and environmental characteristics. Furthermore, the
sanitizers used, although reducing the number of adhered cells, demonstrate a
certain ineffectiveness in removing cells from the biofilm matrix considering the
number of remaining cells found after the process of applying sanitizers. / O presente estudo teve como objetivo avaliar a capacidade de adesão, a cinética de
separação, a formação de biofilmes de cepas de S. aureus isoladas de diferentes
Serviços de Alimentação e Nutrição da cidade de João Pessoa PB, quando
cultivadas em caldo substrato base carne e caldo substrato base vegetais, e
incubadas em temperaturas de 28ºC e 7ºC por um tempo prolongado (24 72 h) além
de avaliar o efeito da aplicação dos sanitizantes hipoclorito de sódio (250 mg/L) e
ácido peracético (30 mg/L) em inativar células bacterianas na matriz do biofilme
previamente formado. Nestes experimentos foram utilizadas como superfícies-testes
minisuperfícies (3 x 3 cm) de polipropileno e de aço inoxidável AISI 304, visto que
tais materiais são amplamente utilizados na composição de superfícies,
equipamentos e/ou utensílios utilizados nos variados tipos de serviços de
alimentação. Os resultados mostraram uma alta capacidade de adesão das cepas
avaliadas em caldo substrato base carne e em caldo substrato base vegetal com
contagens superiores a 5 log UFC/cm2, independente do tipo de superfície e a
temperatura de incubação. O descolamento das células nas superfícies foi de pelo
menos 103 UFC/cm2 durante os 6 primeiros contatos com o ágar para os dois tipos
de substrato utilizados, caracterizando uma alta persistência durante um tempo
prolongado de incubação (24 a 72h). Não foi encontrada uma clara influência em
relação à superfície e a temperatura utilizada na avaliação da capacidade de
adesão. Em geral, para os dois tipos de substratos utilizados foi demonstrado um
padrão de formação de biofilme semelhante, ao final de 15 dias de incubação,
quando as cepas foram submetidas às diferentes combinações de tipos de
superfícies e temperaturas de crescimento. O número de células (105 107
UFC/cm2) necessários para a formação do biofilme foi observado em todos os
sistemas experimentais já após 3 dias de incubação seguidos de uma redução linear
após o 6º dia, com exceção da cepa S28 cultivada em caldo substrato base
vegetais, que apresentou valores em torno de 104 UFC/cm2 nas primeiras 24h de
incubação. Um intervalo de 2,6 3,7 log UFC/cm2 para as cepas incubadas em
caldo substrato base carne e de 2,0 3,3 log UFC/cm2 para as cepas incubadas em
caldo substrato base vegetal foi observado na redução das células na matriz do
biofilme causado pelo ácido peracético enquanto que pelo hipoclorito de sódio a
redução foi da ordem de 2,1 2,7 log UFC/cm2 e de 1,5 2,1 UFC/cm2 para cepas
cultivadas em caldos substrato base carne e vegetais, respectivamente. A partir dos
resultados obtidos, pode-se concluir que as cepas testadas evidenciam uma elevada
capacidade de adesão e formação de biofilme em superfícies de contato de
alimentos quando expostas a diferentes meios de cultura e características
ambientais. Alem disso, os sanitizantes utilizados, apesar de reduzirem o número de
células aderidas às superfícies, demonstraram ineficácia na remoção de células da
matriz do biofilme tendo em vista o número de células viáveis encontradas após o
processo de aplicação dos sanitizantes.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede.biblioteca.ufpb.br:tede/4317
Date31 March 2011
CreatorsMeira, Quênia Gramile Silva
ContributorsSouza, Evandro Leite de, Siqueira Júnior, José Pinto de
PublisherUniversidade Federal da Paraí­ba, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Nutrição, UFPB, Brasil, Ciências da Nutrição
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFPB, instname:Universidade Federal da Paraíba, instacron:UFPB
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
Relation-6891037571817465133, 600, 600, 600, 600, 1378961654043753908, -1073001350029933100, 2075167498588264571

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