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Abordagem polifásica para identificação de linhagens de ASPERGILLUS Seção NIGRI preservadas na micoteca URM e caracterização quanto a produção e purificação de POLIGALACTURONASES.

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Previous issue date: 2013-02-27 / CNPq; EM / As espécies de Aspergillus pertencentes à seção Nigri são caracterizadas pela cor negra da
maioria das colônias. A identificação destas espécies é complexa devido à alta diversidade
genética. As características morfológicas, fisiológicas, bioquímicas, moleculares e
espectrais são ferramentas que podem ser utilizadas na identificação polifásica. Aspergillus
niger é a espécie da seção Nigri mais utilizada na indústria. Dentre as enzimas produzidas
por este fungo podemos citar as poligalacturonases (PG), que possuem aplicação
tecnológica no processamento de alimentos e frutas. Neste trabalho, linhagens de
Aspergillus seção Nigri foram avaliadas por uma abordagem polifásica baseada na análise
morfológica, bioquímica e espectral por Ionização/Dessorção de Matriz Assistida por
Laser Tempo-de-Vôo/Espectrômetro de Massa (MALDI-TOF MS) para sua identificação e
caracterização. Os dados obtidos a partir dessa abordagem indicaram que os resultados do
MALDI-TOF MS corroboraram os dados da taxonomia clássica e análises bioquímicas.
Cerca de 20% e 14% das linhagens de A. niger foram produtoras de ocratoxina A (OTA) e
fumonisina B2 (FB2), respectivamente. As linhagens não micotoxigênicas foram avaliadas
quanto à capacidade de produzir PG, sendo A. niger URM 5162 que apresentou maiores
valores de atividade quando imobilizada em casca de laranja e com o reator operado sem
aeração. Após a produção, as PG foram purificadas pelo sistema de duas fases aquosas
(SDFA) formado por polietilenoglicol e sais de fosfato (PEG/fosfato). A endopoligalacturonase
(endo-PG) e a exo-poligalacturonase (exo-PG) tiveram preferência pela
fase superior do sistema (rica em PEG). Para as duas enzimas, os melhores resultados para
o coeficiente de partição (K=1,23 para endo-PG e 2,40 para exo-PG), rendimento em
atividade (Y=74,04% para endo-PG e 33,33% para exo-PG) e fator de purificação
(FP=8,18 para endo-PG e 1,98 para exo-PG), foram obtidos com 12,5% (m/m) de PEG
8000 (g/mol) e concentração de fosfato de 25% (m/m) a pH 6,0, sendo esta a condição
considerada como a mais adequada para a purificação das PG produzidas
por A. niger URM 5162. A concentração de fosfato e a massa molar do PEG foram as
variáveis independentes que mais influenciaram nos valores de K, Y e FP durante a
purificação da endo- e exo-poligalacturonase, respectivamente. Diante dos resultados
obtidos, observa-se que a utilização de uma abordagem polifásica consistindo de análise
morfológica, bioquímica e proteômica, permite uma identificação mais precisa das
espécies da seção Nigri. Aspergillus niger URM 5162 é a linhagem promissora para
produção de PG, sendo o SDFA uma alternativa interessante e de baixo custo para a
purificação destas enzimas.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/12809
Date27 February 2013
CreatorsMACIEL, Marília de Holanda Cavalcanti
ContributorsMOTTA, Cristina Maria de Souza, MOREIRA, Keila Aparecida, LIMA, Nelson
PublisherUniversidade Federal de Pernambuco
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguageBreton
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE
RightsAn error occurred on the license name., An error occurred getting the license - uri., info:eu-repo/semantics/openAccess

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