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Previous issue date: 2011 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / A regulação da expressão gênica nos tripanossomatídeos é predominantemente póstranscricional,
ocorrendo através de mecanismos como controle da estabilidade e
tradução dos RNAs mensageiros (mRNAs). Em eucariotos a tradução é controlada
principalmente no recrutamento dos ribossomos para os mRNAs, sendo mediada pelos
fatores eucarióticos de iniciação da tradução (eIFs). Neste contexto, o reconhecimento
dos mRNAs é realizado principalmente pelo complexo eIF4F, formado pelas
subunidades eIF4E, eIF4A e eIF4G. O eIF4G é a proteína estruturadora do complexo,
interagindo com o eIF4E e o eIF4A, além de outras proteínas, pois apresenta em sua
estrutura inúmeros domínios de ligação, entre eles, o MIF4G e o MA3, responsáveis
pela ligação ao eIF4A. A proteína eIF4G é o protótipo de uma família de polipeptídeos
que apresentam estes domínios, onde foi incluída recentemente a proteína NOM1,
proteína com localização nucleolar, identificada em pacientes que apresentavam
Leucemia Mielóide Aguda, sendo encontrados ortólogos em diferentes espécies,
incluindo os tripanossomatídeos. Em trabalhos prévios, os genes da NOM1 de T.brucei
e L.major foram clonados em vetores de expressão e a proteína recombinante
TbNOM1 foi utilizada para imunização de coelhos. No presente trabalho, iniciamos a
caracterização funcional da TbNOM1, demonstrando que a proteína é capaz tanto de
interagir com os homólogos do eIF4A de T.brucei, como de formar dímeros ou
estruturas mais complexas de ligação TbNOM1-TbNOM1. Sua expressão é constante
durante todo o ciclo celular na forma procíclica e na forma sanguínea é expressa em
maior concentração entre 0 e 6 horas, não sendo regulada por fosforilação em suas
formas nativas. A localização subcelular da proteína TbNOM1 é citoplasmática, tendo
sido confirmada em experimentos de imunofluorescência, fracionamento celular e
superexpressão de proteína fluorescente. Outro aspecto relevante avaliado foi que a
TbNOM1 é uma proteína não essencial, uma vez que sua depleção mediada por
interferência de RNA, não afeta de forma significativa a viabilidade celular. Neste
trabalho iniciou-se a caracterização funcional da TbNOM1, sendo necessário a
realização de outras abordagens metodológicas para dar prosseguimento a este
processo de investigação
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/6784 |
| Date | 31 January 2011 |
| Creators | Varginha Ramos Caiado, Bruna |
| Contributors | Pompílio de Melo Neto, Osvaldo |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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