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Influ?ncia da radia??o gama sobre a micobiota natural de ra??o av?cola e seu efeito sobre a morfologia, fisiologia e gen?tica de cepas de refer?ncia de Aspergillus spp. / Influence of gamma irradiation on natural mycoflora of poultry feed and effect on morphology, fisiology and genetic of strains Aspergillus spp.

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Previous issue date: 2008-06-24 / Irradiation is a physical process efficiently used in the conservation of foods. The purpose of
this study was to investigate the effects of irradiation on the natural mycoflora of poultry
feeds and on strains of Aspergillus spp. Maize flour samples, soy crumb and feed were
collected directly from the production line of a poultry farm in Avelar, RJ, and exposed to
doses of 0, 3.5, 8 and 15 kGy of gamma radiation. Counting, isolation and identification of
the contaminant mycoflora were performed before and after irradiation. The radiosensitivity
of strains of reference of Aspergillus spp. was determined in CYA medium and in corn for
doses ranging from 0 to 8 kGy. Comparisons between the morphologies of control and
irradiated strains were performed by using macroscopy, optical microscopy and transmission
electron microscopy. Toxigenic profile determination and genetic evaluation by RAPD were
also carried out. Higher doses have been found to reduce the number of active colonies,
causing elimination of the mycoflora at 8 kGy. A larger radiosensitivity of yeasts was
observed in comparison with filamentous fungi. A significant reduction in fungi population
occurred at 3.5 kGy to levels below the limit that ensures the hygienic quality of ingredients
and poultry feeds. The residual mycoflora was found to decrease with post-irradiation time
and included mostly Cladosporium spp., Curvularia spp., Fusarium spp. and Aspergillus spp.
and sterility of mycelium prevented further identification of the surviving species of
Aspergillus spp. Differences in radioresistance were found among species of Aspergillus and
the highest tolerance to radiation was observed for A. parasiticus. Initial morphologic changes
were found to be more severe during the first isolation after irradiation than in later ones, with
the fungi gradually recovering their normal growth rate. Ultrastructural changes in the
irradiated strains were observed mostly in the plasmatic membrane and membranous
organelles of nuclei and mitochondria. An increase in the rate of production of toxins by the
irradiated strains has been found, however no significant alterations have been observed in
their genotypes. Such findings apparently indicate that irradiation stress affected the
metabolic response of the fungi, leading to a larger production of toxins. In addition, when
appropriate conditions of feeding and growth were restored, the physiologic damages were
gradually repaired. Therefore, under such circumstances, irradiated strains may resume
growing, thus further deteriorating the substratum. / Irradia??o ? um processo f?sico eficazmente utilizado na preserva??o de alimentos. Este
estudo teve como objetivo investigar os efeitos da exposi??o ? radia??o gama sobre a
micobiota natural de ra??es av?colas e cepas de Aspergillus spp. Amostras de fub?, farelo de
soja e ra??o foram coletadas diretamente da linha de produ??o de uma granja av?cola, no
munic?pio de Avelar, RJ e, submetidas ?s doses de 0; 3,5; 8 e 15 kGy de radia??o gama.
Foram realizados: contagem, isolamento e identifica??o da micobiota contaminante antes e
ap?s a irradia??o. A radiossensibilidade de cepas de refer?ncia do g?nero Aspergillus spp. foi
estudada em meio CYA e em milho, com doses de 0 a 8 kGy. Foi comparada a morfologia de
cepas controle e irradiadas por macroscopia, microscopia ?ptica e microscopia eletr?nica de
transmiss?o. Estudou-se o perfil tox?geno e realizou-se uma avalia??o gen?tica pela t?cnica de
polimorfismo de ADN amplificado ao acaso. Observou-se redu??o na contagem com o
aumento da dose, tendo sido verificada a elimina??o da micobiota com 8 kGy. Constatou-se
tamb?m uma maior radiossensibilidade de leveduras, em rela??o aos fungos filamentosos.
Ocorreu efeito do tempo de armazenamento, sendo que as contagens ap?s 45 dias foram
inferiores ?s encontradas aos 7 dias ap?s a irradia??o. A dose 3,5 kGy proporcionou
significativa redu??o da contagem f?ngica, a n?vel abaixo do limite estipulado para a garantia
da qualidade higi?nica de ingredientes e ra??o av?cola. No entanto, h? uma micobiota
residual, formada principalmente pelos g?neros: Cladosporium spp., Curvularia spp.,
Fusarium spp. e Aspergillus spp., esses ?ltimos ap?s serem repicados, apresentaram apenas o
desenvolvimento de mic?lio est?ril, o que n?o permitiu a identifica??o da esp?cie. Diferen?as
em radiossensibilidade foram observadas entre as cepas de refer?ncia de Aspergillus
avaliadas, sendo A. parasiticus o mais radiorresistente em ambos os substratos avaliados:
meio CYA e milho. Observou-se menor conidiog?nese e aumento de estruturas de resist?ncia,
como os escler?cios. As altera??es morfol?gicas foram mais intensas no isolamento inicial
ap?s irradia??o sendo que, gradualmente, os isolados irradiados voltaram a apresentar
crescimento semelhante ao padr?o nos repiques sucessivos. Altera??es ultraestruturais nas
cepas irradiadas foram observadas principalmente em n?vel de membrana plasm?tica e de
organelas, em especial n?cleo e mitoc?ndrias. Essas cepas tiveram aumentada sua produ??o
de toxinas. Por outro lado, n?o foram observadas altera??es significativas no gen?tipo, ao
menos com os tr?s marcadores utilizados. Esses relatos refor?am a hip?tese de que situa??es
de estresse induzem uma maior produ??o de toxina pelos fungos. A irradia??o produz um
estresse, afetando metabolicamente o fungo. Contudo, ao serem fornecidos nutrientes e
condi??es adequadas de crescimento, essa altera??o fisiol?gica ? superada. Esses achados
sugerem que cepas sobreviventes ? irradia??o podem voltar a se desenvolver, deteriorando o
substrato, desde que sejam fornecidas condi??es favor?veis ao para seu crescimento.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:localhost:tede/831
Date24 June 2008
CreatorsRibeiro, J?ssika Mara Martins
ContributorsRosa, Carlos Alberto Rocha, Direito, Gl?ria Maria
PublisherUniversidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Curso de P?s-Gradua??o em Ci?ncias Veterin?rias, UFRRJ, Brasil, Parasitologia Veterin?ria
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRRJ, instname:Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, instacron:UFRRJ
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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