Memoria para optar al Título
Profesional de Médico Veterinario / En el presente estudio se investigó la factibilidad de establecer una fase
sólida para realizar un ELISA con el fin de detectar anticuerpos contra
Piscirickettsia salmonis.
Se realizaron varias etapas en el protocolo de purificación, para la obtención
del antígeno. Se obtuvo un antígeno soluble de P. salmonis mediante extracción salina, se realizaron centrifugaciones y se liofilizó la muestra, obteniendo 567 g de antígeno, de los cuales se detectó una cantidad de 0,1 mg de proteína.
En las condiciones del ensayo se utilizaron dos tipos de placas, dos tampones de sensibilización y se realizaron incubaciones a diferentes temperaturas.
Para el desarrollo de la prueba de ELISA se utilizó una mezcla de anticuerpos monoclonales específicos contra P. salmonis y un antisuero
conjugado de cabra anti-ratón.
Como resultados, se obtuvieron reacciones negativas en todos los casos,
sin haber alcanzado la razón de adsorción mínima para darle significancia al
resultado; sin embargo, existió reacción colorimétrica visible en aquellas
muestras procesadas en placas NUNC 69620, incubadas a temperatura
ambiente, con tampón de sensibilización carbonato-bicarbonato con pH 9,6; por lo que se podría deducir que entre todos los procedimientos, este último protocolo podría ser el de elección.
Como conclusión se establece que, bajo los protocolos realizados y con las
concentraciones antigénicas utilizadas, no fue posible comprobar la adhesión de antígenos de Piscirickettsia salmonis a las placas, no pudiéndose establecer una
fase sólida para el diagnóstico de esta bacteria por medio de la detección de
anticuerpos..
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/130866 |
| Date | January 2007 |
| Creators | Goycolea Donoso, Claudia Andrea |
| Contributors | Abalos Pineda, Pedro, Facultad de Ciencias Veterinarias y Pecuarias, Departamento de Medicina Preventiva Animal, Larenas Herrera, Julio, Zúñiga Martí, Claudio |
| Publisher | Universidad de Chile |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | Tesis |
| Rights | Atribución-NoComercial-SinDerivadas 3.0 Chile, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ |
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