L’organisation mondiale de la santé estime que le choléra entraîne 100, 000 décès par an
pour environ 4 millions de cas recensés, plaçant ainsi cette maladie comme un enjeu de santé
publique majeur. Cette infection est causée par Vibrio cholerae, une bactérie à Gram négatif
vivant en milieu aquatique. Face à cette agression, l’épithélium intestinal et les bactéries du
microbiote agissent comme une barrière, en exprimant notamment des peptides antimicrobiens
(PAM). V. cholerae, comme de nombreux pathogènes, montre une résistance accrue aux PAM.
Malgré une avancée constante sur la compréhension des mécanismes de résistances bactériens
aux PAM, de nombreuses inconnues demeurent, principalement en raison des techniques de
mutagénèse aléatoire utilisées pour leur identification.
L’objectif de cette étude est d’identifier de nouveaux mécanismes de résistance
impliqués dans la résistance de V. cholerae aux PAM. Grâce à des expériences de séquençage
par spectrométrie masse suivi d’études bio-informatiques, nous avons identifié les protéines
OmpV et Lap comme des candidates intéressantes pour être impliquées dans la résistance de V.
cholerae. Alors que la souche V. cholerae A1552 délétée du gène ompV (DompV) ne semble pas
présenter de défaut de croissance ou de perméabilité, nos résultats ont montré une diminution
des concentrations minimales inhibitrices en différents PAM tels que LL-37. Les tests
fonctionnels semblent suggérer l’implication des vésicules de sécrétion dans le mécanisme de
d’OmpV face à LL-37 chez V. cholerae. / According to the World Health Organization, cholera remains a significant health problem,
causing 100,000 death per 4 millions infections per year. V. cholerae, the etiologic agent of
cholera and a Gram-negative bacterium, is generally transmitted via contaminated food or water.
During infection, the microbiota and intestinal epithelium acts as a barrier by producing
antimicrobial peptides (AMP). Resistance to AMP has emerged as a virulence factor in
pathogens and specifically in V. cholerae. As AMP are considered as novel molecular
therapeutic agents, it is truly important to better understand strategies of resistance of V.
cholerae.
The aim of this study is to identify unknown mechanisms involved in V. cholerae
resistance to AMP. For this purpose, after protein sequencing by mass spectrometry (MS-MS)
and bioinformatics, we identified the OmpV porin, member of the outer membrane protein
family and the Lap protease as new protein candidates for strategies of resistance. We
characterized the V. cholerae A1552 strain deleted for ompV (DompV). We confirmed OmpV
implication in AMP resistance by minimum inhibitory concentration and did not observed any
differences in growth or permeability in the presence of AMP between the wild-type (wt) and
the (DompV) strains. The work presented here suggest an implication of outer membrane
vesicules in V. cholerae resistance mechanisms to some AMP as LL-37.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:umontreal.ca/oai:papyrus.bib.umontreal.ca:1866/24513 |
| Date | 04 1900 |
| Creators | Sarrias, Marion |
| Contributors | Duperthuy, Marylise, Soudeyns, Hugo |
| Source Sets | Université de Montréal |
| Language | fra |
| Detected Language | French |
| Type | thesis, thèse |
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