Estas células, cultivadas em meio de cultura MEMα suplementado com soro fetal bovino (SFB) 10%, entre a 10ª e 15ª passagem, foram submetidas a déficit nutricional com SFB 1% a 1 hora ou 24 horas antes da irradiação (protocolos A ou B, respectivamente). O meio foi mantido com suplementação de SFB 1% durante a irradiação e ao longo do tempo experimental nos grupos de I a IV, enquanto que para os grupos de V a VIII, o meio foi trocado para MEMα suplementado com SFB 10%. As células foram irradiadas com laser vermelho (660 nm) nas seguintes dosimetrias: 2,5 J/cm2 (grupos I e V), 5,0 J/cm2 (grupos II e VI) e 7,5 J/cm2 (grupos III e VII). As células não irradiadas constituíram os controles negativo (grupo IV) e positivo (grupo VIII). A avaliação da citotoxicidade/integridada da membrana celular foi realizada pela quantificação da desidrogenase lática (LDH) no meio de cultura após a irradiação. A viabilidade celular foi avaliada pelo método MTT 24, 48 e 72 horas após a irradiação. Os dados foram submetidos ao teste ANOVA a 2 critérios seguido pelo teste de Tukey (P<0,05). Os níveis de LDH no meio de cultura em que as SHED eram mantidas foram semelhantes quando comparados os protocolos A e B para a mesma densidade de energia e mesma concentração de SFB no momento da irradiação. No protocolo A, as células estavam mais viáveis 24 horas após a irradiação independente da densidade de energia, já no protocolo B, não houve alteração na viabilidade celular nos grupos IV (controle negativo), V, VI, VII e VIII (controle positivo) ao longo do tempo. Portanto, a indução de estresse celular por meio da suplementação do meio de cultura com SFB 1%, uma hora antes da irradiação, foi mais favorável para a manutenção da viabilidade de SHED após a irradiação, sem alterar os níveis de LDH extracelular, em comparação com os resultados após déficit nutricional por 24 horas. / The purpose of the present study was to analyze in vitro the effects of different
nutritional deficit conditions to induce the state of cellular stress, prior to irradiation with
different dosimetries of Low Level Laser Therapy (LLLT), on the biomodulation of stem
cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED). These cells, cultured in MEMα
culture medium supplemented with 10% FBS, between the 10th and 15th passage, were
subjected to nutritional deficit with 1% FBS one hour or 24 hours prior to irradiation
(protocols A or B, respectively). In both protocols, cells were irradiated with red laser
(660 nm) in the following dosimetries: 2.5 J/cm2 (groups I and V), 5.0 J/cm2 (groups II
and VI) and 7.5 J/cm2 (groups III and VII). Non-irradiated cells constituted the negative
(group IV) and positive (group VIII) controls. Evaluation of citotoxicity/integrity of
cellular membrane was performed by the quantification of lactate dehydrogenase
(LDH) in the culture medium after irradiation. Cell viability was assessed by MTT
method 24, 48 and 72 hours after irradiation. Data were submitted to two-way ANOVA
followed by Tukey test (P<0.05). The levels of LDH at the culture medium where SHED
were grown were similar when compared protocols A and B for the same energy
density and same concentration of FBS during irradiation. In protocol A, cells were
more viable 24 hours after irradiation, irrespective of the energy density, while in
protocol B, there was no alteration in cell viability in groups IV (negative control), V, VI,
VII and VIII (positive control) over time.
Therefore, the induction of cellular stress by culture medium supplementation with 1%
FBS, one hour prior to irradiation, was more favorable for maintaining SHED viability
after irradiation, with no alteration in the levels of extracellular LDH, in comparison with
the results after 24-hour nutritional deficit.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:10.254.254.39:tede/1143 |
| Date | 18 December 2017 |
| Creators | SILVA, Paula Corrêa Silveira da |
| Contributors | SAKAI, Vivien Thiemy, http://lattes.cnpq.br/7146420151581867, MARQUES, Nádia Carolina Teixeira, SANTOS, Gérsika Bittencourt, DIAS, Marina Lara Carli |
| Publisher | Universidade Federal de Alfenas, Faculdade de Odontologia, Brasil, UNIFAL-MG, Programa de Pós-Graduação em Ciências Odontológicas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UNIFAL, instname:Universidade Federal de Alfenas, instacron:UNIFAL |
| Rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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