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Tese Doutorado Silvana Vieira Floresta Gomes.pdf: 9388245 bytes, checksum: 467de36ea93f9b00126ef9eea6d68d65 (MD5) / CNPq / O presente trabalho descreve a aplicação de planejamento Box-Behnken para
otimização de método de extração de flavonoides, usando extração acelerada com
solventes (ASE), e o desenvolvimento e validação de um método analítico por CLAE
com detecção por arranjo de diodos (DAD), para a quantificação dos principais
marcadores químicos nas folhas de Passiflora alata, P. capsularis, P. cincinnata, P.
edulis f. flavicarpa, P. edulis f. edulis, P. galbana, P. gibertii, P. maliformis, P.
malacophylla, P. morifolia, P. mucronata, P. quadrangularis, P. racemosa, P.
setacea, P. suberosa, P. tenuifila e P. vitifolia, cultivadas na Embrapa Mandioca e
Fruticultura, Cruz das Almas-BA. A otimização do método de extração no extrator
acelerado com solventes (ASE) foi realizada através de um planejamento Box-
Behnken de três fatores, proporção da solução hidroetanólica (%), temperatura e nº
de ciclos e três níveis experimentais (+1, 0, -1), com o objetivo de se obter as
melhores condições para a determinação do teor de fenólicos totais, flavonoides
totais e rendimento (%), avaliando simultaneamente as respostas processadas. As
condições otimizadas foram a proporção hidroetanólica 64% (v/v), 80 ºC e 5 ciclos
de extração. Um método analítico de perfil cromatográfico foi desenvolvido e
validado, utilizando CLAE-DAD, para a análise dos extratos hidroetanólico 64% (v/v)
das folhas de espécies de Passiflora estudadas. Os perfis cromatográficos das
espécies de Passiflora demonstraram ser bastante diferentes entre si, o que
possibilitará a sua aplicação no controle de qualidade químico, na identificação e
determinação da autenticidade de fitoterápicos produzidos a partir de diferentes
espécies de Passiflora de nossa flora. O método cromatográfico validado foi aplicado
na quantificação dos flavonoides C-glicosilados, orientina, isoorientina, vitexina,
isovitexina e rutina nas diferentes espécies de Passiflora. O teste de atividade
antioxidante utilizando a metodologia do radical estável DPPH demonstrou que os
extratos de P. capsularis, P. cincinnata, P. edulis f. flavicarpa, P. edulis f. edulis, P.
galbana, P. gibertii, P. malacophylla, P. suberosa, P. tenuifila e P. vitifolia possui
atividade antioxidante quando comparado ao padrão ácido gálico. No teste de
atividade anticolinesterásica, as espécies de Passiflora não apresentaram atividade
inibitória da enzima acetilcolinesterase. A atividade citotóxica in vitro utilizando o
método de MTT demonstrou que, dos extratos de Passiflora analisados, somente o
extrato de P. alata apresentou potencial citotóxico relevante, com percentual de
inibição do crescimento tumoral maior que 90%, frente as linhagens de células do
ovário – humano, carcinoma do cólon e glioblastoma. / This work describes an application of Box- Behnken experimental planning for the
optimization of a method for flavonoid extraction employing accelerated solvent
extraction (ASE), and development and validation of an analytical method by HPLC
with diode array detection (DAD) for quantification of the major chemical markers in
the leaves of Passiflora alata, P. capsularis, P. cincinnata, P. edulis f . flavicarpa, P.
edulis f. edulis, P. galbana, P. gibertii, P. maliformis, P. malacophylla, P. morifolia, P.
mucronata, P. quadrangularis, P. racemosa, P. setacea, P. suberosa, P. tenuifila and
P. vitifolia grown at Embrapa Mandioca e Fruticultura, Cruz das Almas-BA. The
optimization of the extraction method on accelerated solvent extractor (ASE) was
performed by using a Box- Behnken application of three factors, hydroethanol
solution proportion (%), temperature and number of ASE cycles and three
experimental levels (+1, 0, - 1), with the purpose to obtain the best conditions for the
determination of extract yield (%), total phenolic contentand total flavonoid, while
assessing the responses processed. The observed optimized conditions were:
proportion hydroethanol 64% (w/w), 80 °C and 5 cycles of extraction. An analytical
profile chromatographic method was developed and validated using HPLC-DAD for
the analysis of hydroethanolic extract 64% (w/w) of the Passiflora leaves species
studied. The chromatographic profiles of the Passiflora species proved to be quite
different, which enables its application in the chemical quality control, identification
and determination of the authenticity of herbal medicines produced from different
Passiflora species from brazilian flora. The validated chromatographic method was
applied in the quantification of flavonoid C- glycosides, orientin, isoorientina , vitexin,
isovitexin and rutin in different species of Passiflora. The test of antioxidant activity
using the methodology of the stable radical DPPH showed that extracts of P.
capsularis, P. cincinnata, P. edulis f. flavicarpa, P. edulis f. edulis, P. galbana, P.
gibertii, P. malacophylla, P. suberosa, P. tenuifila and P. vitifolia has antioxidant
activity when compared to standard gallic acid. In the test of anticholinesterase
activity, the Passiflora species showed no inhibitory activity of the enzyme
acetylcholinesterase. The in vitro cytotoxic activity using the MTT method showed
that extracts of Passiflora analyzed, only the extract from P. alata showed cytotoxic
relevant to the percentage of tumor growth inhibition higher than 90% against the
ovarian cell line - human colon carcinoma and glioblastoma.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:192.168.11:11:ri/16138 |
| Date | 10 1900 |
| Creators | Gomes, Silvana Vieira Floresta |
| Contributors | David, Jorge Mauricio, Di Pietro, Giuliano, Lopes, Wilson Araújo, David, Juceni Pereira de Lima, Bahia, Marcus Vinicius |
| Publisher | Instituto de Química, Química, UFBA, brasil |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFBA, instname:Universidade Federal da Bahia, instacron:UFBA |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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