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Tese_ICS_ Flábio Ribeiro de Araújo.pdf: 1589352 bytes, checksum: eef290e5cf5f5ad0b3942824ce7c94fd (MD5) / FUNDECT;CNPq / A anaplasmose é uma importante enfermidade de bovinos de áreas tropicais
e subtropicais do mundo, causada pela riquétsia intra-eritrocítica Anaplasma
marginale. A vacinação tem sido a forma mais econômica e eficiente de controlar a
anaplasmose bovina. No entanto, os métodos de imunização tradicionais, que
utilizam organismos provenientes de eritrócitos infectados, apresentam limitações
em seu uso, razão pela qual, estudos para o descobrimento de novos imunógenos
são necessários. Nos últimos anos, esses estudos têm se concentrado nas
proteínas de membrana da riquétsia, sobretudo MSP1a e MSP2, as quais
mostraram-se promissoras em ensaios de proteção com as proteínas nativas,
utilizadas isoladamente. Este trabalho teve como objetivo geral testar a
imunoproteção induzida pelas proteínas de membrana MSP1a e MSP2
recombinantes de A. marginale, associadas com adjuvante CpG ODN 2006, frente
a desafio heterólogo e avaliar a resposta imune gerada pela imunização. Para
tanto, diversas etapas experimentais foram executadas, desde a clonagem e
expressão dos genes que codificam as duas proteínas, padronização dos testes de
diagnóstico usados no estudo, imunização e desafio dos animais experimentais e
acompanhamento das respostas imunes humoral e celular. Os ELISAS indiretos
baseados em MSP1a e MSP2 recombinantes apresentaram sensibilidades de
99,0% e especificidades de 100% (para ambos os testes). A PCR para o gene
msp5 da riquétsia detectou infecções ainda no período pré-patente, antes da
conversão sorológica. Os bovinos da raça Aberdeen Angus foram imunizados três
vezes com 200 μg de MSP2 e/ou MSP1a recombinantes (produzidas a partir do
isolado Pernambuco – Zona da Mata), associadas com CpG ODN 2006 e alúmen.
Posteriormente, foram desafiados com 3 x 107 eritrócitos infectados do isolado
heterólogo de A. marginale (Mossoró - Rio Grande do Norte). Os animais
experimentais apresentaram quadro clínico de anaplasmose (redução do volume
globular, febre e riquetsemias detectáveis por distensões sangüíneas coradas).
Não foram detectadas diferenças significativas entre os grupos imunizados e os
controles (que receberam CpG ODN 2006 e alúmen ou alúmen isoladamente)
quanto ao percentual de redução do volume globular, riquetsemias máximas e
temperaturas retais máximas, indicando que as imunizações não foram protetoras.
A despeito da significativa produção de IgG total contra MSP1a e MSP2, detectada
no dia do desafio, os animais imunizados apresentaram produção significativa de
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IgG2 apenas contra MSP1a. Não foi possível detectar resposta proliferativa de
células mononucleares de sangue periférico, tanto no momento do desafio quanto
após o pico das riquetsemias. Possivelmente, a ausência de proteção deveu-se a
uma deficiente ou ausente estimulação de imunidade celular nos bovinos
imunizados.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:192.168.11:11:ri/20179 |
| Date | January 2005 |
| Creators | Araújo, Fábio Ribeiro de |
| Contributors | Madruga, Claúdio Roberto |
| Publisher | Instituto de Ciências da Saúde, em Imunologia, UFBA, brasil |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFBA, instname:Universidade Federal da Bahia, instacron:UFBA |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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