Orientadora: Profa Dra Carlos Alberto Silva / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Biotecnociência, 2016. / No Brasil a especie com maior numero de registros de acidentes ofidicos e a serpente
Bothrops jararaca (Bj). Os efeitos causados pelo envenenamento amplamente caracterizados
sao inflamacao no local, edema, necrose tecidual no local da picada e, acoes sistemicas, como
hemorragia, coagulopatia e hipotensao arterial. Os efeitos observados ocorrem em funcao da
presenca de metaloproteinases, fosfolipase, disintegrinas e peptideos biologicamente ativos
presentes no veneno. Apesar disso, nao ha relatos na literatura sobre os eventuais efeitos do
envenenamento no sistema reprodutor masculino de pacientes acidentados. Assim, em linhas
gerais, o presente estudo visa avaliar os efeitos de componentes presentes no veneno de Bj
sobre o testiculo de camundongos. Animais machos (n=6 por grupo) com 2 meses de idade,
com peso entre 30 e 35 g foram separados em dois grupos. No primeiro grupo, estao os
animais tratados com fracao peptidica (FP), solucao contendo componentes presentes no
veneno de Bj com peso molecular inferior a 10 KDa, via intratesticular (i.t) na dose de 5¿Êg
diluida em 20 ¿ÊL de solucao salina em dose unica, enquanto que o outro grupo recebeu FP
com concentracao de 5¿Êg diluida em 20 ¿ÊL de solucao salina durante 15 dias via
intraperitoneal (i.p). Apos o periodo de tratamento, os animais foram eutanasiados e tiveram
os testiculos fixados e submetidos a analises morfologica e morfotmetrica. Posteriormente,
um outro grupo de animais (n=6) foi tratado via intramuscular, e fragmentos de musculo e
testiculo foram submetidos a analise por FT-Raman. Os resultados mostraram que a FP,
quando injetada via i.p ou via i.t, provocam intensas alteracoes no epitelio seminifero. Ainda,
a FP promoveu o aumento na quantidade de alguns tipos celulares (Espermatocito paquiteno;
Espermatide circular; e Figuras meioticas) com papel importante na espermatogenese quando
tratados via i.p, e diminuicao no numero de celulas germinativas (Esermatocito paquiteno;
Espermatide circular; Espermatogonia tipo B; e Espermatocito zigoteno) durante os estadios
de espermiogenese quando tratados via i.t., sendo que os valores de celulas obtidas
apresentam diferencas estatisticas com valor de p<0,05. Para avaliar os efeitos toxicologicos
do veneno sobre o testiculo, foi empregada a tecnica FT-Raman, que se mostrou efetiva na
caracterizacao do envenenamento analisando fragmentos de musculo estriado esqueletico,
assim como, pelas analises morfologica do musculo e niveis sericos de creatino quinase.
Entretanto, quando aplicada a tecnica FT-Raman na analise de testiculo, nao foi possivel
identificar alteracoes que evidenciaram a acao toxicologica do veneno sobre este orgao.
Apesar disso, analise dos espectros pelo estudo dos componentes principais, verificou-se
diferencas no grupo tratado com veneno botropico em relacao ao controle. Assim, os dados
obervados abrem possibilidades de estudo utilizando outras tecnicas para avaliar niveis de
expressao de proteinas importantes que indicam eventuais comprometimentos da
espermatogenese. / The Bothrops jararaca snake shows the highest number of accidents recorded by the health
ministry in Brazil. The effects caused by envenomation can be characterized by edema, tissue
necrosis in the local bite and, systemic actions, such as bleeding, coagulopathy and
hypotension. These effects are caused by metalloproteinases, phospholipase, disintegrins andbiologically active peptides present in the venom. However, there are no reports in the
literature. In the present study, we evaluated if the envenomation effects induced via i.m cause changes on the testis functionality. Male animals at 2 months of age and weighing between 30g and 35g, were divided into 2 groups. The first one received peptide fraction (FP), solution containing components present in Bj venom with a molecular weight below 10 kDa, with dose about 5ìg diluted in 20ìL of saline solution, via intratestis (i.t) in single dose, while the second group received FP 5ìg diluted in 20ìL of saline solution via intraperitoneal (i.p) once a day, during 15 days. Subsequently another group of animals was poisoned, so induced via intramuscular, and testis and muscle were collected after 24h of treatment, and the fragments were subjected to analysis by FT-Raman. FP affected the seminiferous epithelium structure in the groups treated via i.p. and via i.t. Quantitative analysis of seminiferous epithelium showed an increase of some cell types (Spermatocyte pachytene; Spermatid circular; and Meiotic figures) with an important role in spermatogenesis when treated via i.p., and decrease in the number of germ cells (Spermatocyte pachytene; Spermatid circular; Spermatogonia type B, and Spermatocyte zygotene) during the stages of spermatogenesis when treated via i.t. The differences of number of germ cells obtained between the groups show statistical diference with p value <0.05. To evaluate the toxicological effects of the poison on the testis, we used the FT-Raman. The technique was effective in muscle fragments analyses. confirming morphology analysis and the level of creatine kinase, however, when applied the FT-Raman technique in testicular analysis was not possible to identify changes that can complete toxicological poison action on this body as to derail matured germ cells, although further analysis of the spectra, which uses key components, showed differences, opening possibilities to invest time in different analyzes that can prove or disprove this hypothesis.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:BDTD:102488 |
| Date | January 2016 |
| Creators | Santos, Rodrigo Bonfim Simão dos |
| Contributors | Silva, Carlos Alberto da, Silva, Fernanda Dias da, Araujo, Daniele Ribeiro |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf, 78 f. : il. |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFABC, instname:Universidade Federal do ABC, instacron:UFABC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=102488&midiaext=72688, http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=102488&midiaext=72687, Cover: http://biblioteca.ufabc.edu.brphp/capa.php?obra=102488 |
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