Orientadora: Profa Dra Carlos Alberto Silva / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Biotecnociência, 2016. / No Brasil a especie com maior numero de registros de acidentes ofidicos e a serpente Bothrops jararaca (Bj). Os efeitos causados pelo envenenamento amplamente caracterizados sao inflamacao no local, edema, necrose tecidual no local da picada e, acoes sistemicas, como hemorragia, coagulopatia e hipotensao arterial. Os efeitos observados ocorrem em funcao da presenca de metaloproteinases, fosfolipase, disintegrinas e peptideos biologicamente ativos presentes no veneno. Apesar disso, nao ha relatos na literatura sobre os eventuais efeitos do envenenamento no sistema reprodutor masculino de pacientes acidentados. Assim, em linhas gerais, o presente estudo visa avaliar os efeitos de componentes presentes no veneno de Bj sobre o testiculo de camundongos. Animais machos (n=6 por grupo) com 2 meses de idade, com peso entre 30 e 35 g foram separados em dois grupos. No primeiro grupo, estao os animais tratados com fracao peptidica (FP), solucao contendo componentes presentes no veneno de Bj com peso molecular inferior a 10 KDa, via intratesticular (i.t) na dose de 5¿Êg diluida em 20 ¿ÊL de solucao salina em dose unica, enquanto que o outro grupo recebeu FP com concentracao de 5¿Êg diluida em 20 ¿ÊL de solucao salina durante 15 dias via intraperitoneal (i.p). Apos o periodo de tratamento, os animais foram eutanasiados e tiveram os testiculos fixados e submetidos a analises morfologica e morfotmetrica. Posteriormente, um outro grupo de animais (n=6) foi tratado via intramuscular, e fragmentos de musculo e testiculo foram submetidos a analise por FT-Raman. Os resultados mostraram que a FP, quando injetada via i.p ou via i.t, provocam intensas alteracoes no epitelio seminifero. Ainda, a FP promoveu o aumento na quantidade de alguns tipos celulares (Espermatocito paquiteno; Espermatide circular; e Figuras meioticas) com papel importante na espermatogenese quando tratados via i.p, e diminuicao no numero de celulas germinativas (Esermatocito paquiteno; Espermatide circular; Espermatogonia tipo B; e Espermatocito zigoteno) durante os estadios de espermiogenese quando tratados via i.t., sendo que os valores de celulas obtidas apresentam diferencas estatisticas com valor de p<0,05. Para avaliar os efeitos toxicologicos do veneno sobre o testiculo, foi empregada a tecnica FT-Raman, que se mostrou efetiva na caracterizacao do envenenamento analisando fragmentos de musculo estriado esqueletico, assim como, pelas analises morfologica do musculo e niveis sericos de creatino quinase. Entretanto, quando aplicada a tecnica FT-Raman na analise de testiculo, nao foi possivel identificar alteracoes que evidenciaram a acao toxicologica do veneno sobre este orgao. Apesar disso, analise dos espectros pelo estudo dos componentes principais, verificou-se diferencas no grupo tratado com veneno botropico em relacao ao controle. Assim, os dados obervados abrem possibilidades de estudo utilizando outras tecnicas para avaliar niveis de expressao de proteinas importantes que indicam eventuais comprometimentos da espermatogenese. / The Bothrops jararaca snake shows the highest number of accidents recorded by the health ministry in Brazil. The effects caused by envenomation can be characterized by edema, tissue necrosis in the local bite and, systemic actions, such as bleeding, coagulopathy and hypotension. These effects are caused by metalloproteinases, phospholipase, disintegrins andbiologically active peptides present in the venom. However, there are no reports in the literature. In the present study, we evaluated if the envenomation effects induced via i.m cause changes on the testis functionality. Male animals at 2 months of age and weighing between 30g and 35g, were divided into 2 groups. The first one received peptide fraction (FP), solution containing components present in Bj venom with a molecular weight below 10 kDa, with dose about 5ìg diluted in 20ìL of saline solution, via intratestis (i.t) in single dose, while the second group received FP 5ìg diluted in 20ìL of saline solution via intraperitoneal (i.p) once a day, during 15 days. Subsequently another group of animals was poisoned, so induced via intramuscular, and testis and muscle were collected after 24h of treatment, and the fragments were subjected to analysis by FT-Raman. FP affected the seminiferous epithelium structure in the groups treated via i.p. and via i.t. Quantitative analysis of seminiferous epithelium showed an increase of some cell types (Spermatocyte pachytene; Spermatid circular; and Meiotic figures) with an important role in spermatogenesis when treated via i.p., and decrease in the number of germ cells (Spermatocyte pachytene; Spermatid circular; Spermatogonia type B, and Spermatocyte zygotene) during the stages of spermatogenesis when treated via i.t. The differences of number of germ cells obtained between the groups show statistical diference with p value <0.05. To evaluate the toxicological effects of the poison on the testis, we used the FT-Raman. The technique was effective in muscle fragments analyses. confirming morphology analysis and the level of creatine kinase, however, when applied the FT-Raman technique in testicular analysis was not possible to identify changes that can complete toxicological poison action on this body as to derail matured germ cells, although further analysis of the spectra, which uses key components, showed differences, opening possibilities to invest time in different analyzes that can prove or disprove this hypothesis.

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2014-01-29T20:30:35Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_PuberdadeCaititusTayassu.pdf: 2278284 bytes, checksum: a177cf6287324da20024168a41c7de35 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2014-02-05T16:58:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_PuberdadeCaititusTayassu.pdf: 2278284 bytes, checksum: a177cf6287324da20024168a41c7de35 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-05T16:58:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_PuberdadeCaititusTayassu.pdf: 2278284 bytes, checksum: a177cf6287324da20024168a41c7de35 (MD5) Previous issue date: 2009 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Esta pesquisa analisa o desenvolvimento da espermatogênese em caititus (Tayassu tajacu) e determina a idade em que atingem a puberdade, considerando-se a biometria testicular e dos túbulos seminíferos, a quantificação das células espermatogênicas, a descrição morfológica dos estádios do ciclo do epitélio seminífero (CES), a freqüência relativa com a qual aparecem no interior dos túbulos seminíferos e o rendimento geral da espermatogênese. No experimento, os animais foram divididos de acordo com a faixa etária, em cinco grupos, com três animais em cada grupo, sendo G1 (7 a 8 meses), G2 (9 a 10 meses), G3 (11 a 12 meses), G4 (13 a 14 meses) e G5 (15 a 16 meses). Os animais foram submetidos à cirurgia de orquiectomia, para obtenção das amostras testiculares, as quais foram fixadas em solução de Alfac por 24 horas e processadas histologicamente, onde cortes de 5 μm foram corados em Hematoxilina-Eosina. Tendo como base, o método da morfologia tubular, foi feita a quantificação dos tipos celulares corrigidos para seus diâmetros nucleares médios de 10 secções transversais de túbulos seminíferos no estádio 1 do CES para animais com a espermatogênese estabelecida e 20 secções transversais para os animais mais jovens, nos quais não havia atividade espermatogênica estabelecida; e também a classificação dos estádios do ciclo do epitélio seminífero, por meio da análise de 100 secções transversais de túbulos seminíferos. Os dados da biometria testicular, a saber, o peso, o comprimento e a largura, revelaram crescimento constante e gradual com diferenças estatísticas significativas (p<0,05) e alta correlação entre si. Os valores do diâmetro tubular apresentaram significância estatística do G1 ao G4, a partir deste, tiveram crescimento acelerado e contínuo, não havendo significância estatística (p >0,05). De acordo com as análises quantitativas e morfológicas das células espermatogênicas que compõem o epitélio germinativo, os grupos etários dos animais foram classificados nas fases seguintes: impúbere (G1), pré-púbere (G2), puberdade (G3), pós-puberdade 1 (G4) e pós-puberdade 2 (G5). A fase em que ocorreu o início da atividade reprodutiva, ou seja, a puberdade, foi determinada nos animais a partir de 11 meses de idade, onde ocorreu o maior crescimento no número de células espermatogênicas e uma correlação positiva com o peso testicular. Nessa fase, as células de Sertoli, apresentaram um decréscimo significativo (p<0,05). Na determinação da freqüência relativa dos estádios do ciclo do epitélio seminífero, foram observadas oito tipos de associações, segundo o método da morfologia tubular, onde o estádio com maior e menor freqüências foram o 1 e o 3, respectivamente. A fase pós-meiótica, apresentou maior freqüência e a fase meiótica, a menor, sendo estatisticamente significativa em relação às demais. A eficiência reprodutiva foi demonstrada por meio dos valores traduzidos pelas razões celulares entre as espermatogônias do tipo A e espermátides arredondadas, não tendo sido observado aumento significativo das espermátides arredondadas entre os grupos G3 ao G5 (p>0,05); e o índice das células de Sertoli apresentou diferença estatística significativa entre todas as possíveis comparações dos grupos etários do G3 ao G5 (p <0,05). / This study analyzes the development of spermatogenesis in peccaries (Tayassu tajacu) and establishes the age the reach puberty, considering testicular biometry and seminiferous tubules, the amount of spermatogenic cells, the morphological description of the stages of the seminiferous epithelium cycle (SEC), the relative frequency on which they surge inside the seminiferous tubules and general spermatogenesis yield. In the experiment, the animals were divided according to age bracket, into five groups, with three animals in each group, G1 (7 to 8 months), G2 (9 to 10 months), G3 (11 to 12 months), G4 (13 to 14 months) and G5 (15 to 16 months). The animals were subjected to orchiectomy surgery, to obtain the testicle samples, which were fixed in Alfac solution for 24 hours and histologically processed, where 5 μm cuts were stained in hematoxylin eosin. Based on the tubular morphology method, it was done the quantification of the cell types corrected to its average nucleus diameters of 10 transversal sections at SEC stage 1 for animals with established spermatogenesis and 20 transversal sections for the younger animals without any established spermatogenic activity; and also the classification of the stages of the seminiferous epithelium cycle, by analyzing 100 transversal sections of seminiferous tubules. The data from the testicular biometry, such as, weight, length and width, showed gradual and constant growth with significant statistical differences (p<0,05) and high correlation among themselves. The tubular diameter values presented statistical significance from G1 to G4, and from G4 an accelerated and continuous growth, with no statistical significance (p>0,05). According to the quantitative and morphological analysis of the spermatogenic cells which form the germinative epithelium, the animal age brackets were classified in the following phases impuberal (G1), prepuberal (G2), puberty (G3), pos puberty 1(G4), and pos puberty 2 (G5). The phase the productive activity started, or, puberty, was determined in the animals when they turned 11 months, when the the greatest growth in the number of spermatogenic cells and a positive correlation with testicular weight occurred. At this stage, the Sertoli cells, presented a significant decrease (p<0,05). During determination of relative frequency of the stages of seminiferous epithelium cycle, eight types of association were observed, according to the tubular morphology method, where the stages with greater and less frequency were 1 and 3 respectively. The pos meiotic phase showed more frequency and the meiotic phase, the lower one, being statistically significant in relation to the other ones. The reproductive efficiency was demonstrated through translated values by the cell ratios between type A spermatogonic cells and round spermatids, being that no significant increase between G3, G4 and G5 was observed (p>0,05); and the rate of Sertoli cells showed a significant statistical difference between all possible comparisons of age brackets from G3 to G5 (p< 0,05).

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2013-11-14T17:53:46Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Tese_AvaliacaoAtividadeGonadal.pdf: 3734747 bytes, checksum: c8292253197827b92c34de2888dee135 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2013-11-19T16:25:51Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Tese_AvaliacaoAtividadeGonadal.pdf: 3734747 bytes, checksum: c8292253197827b92c34de2888dee135 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-11-19T16:25:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Tese_AvaliacaoAtividadeGonadal.pdf: 3734747 bytes, checksum: c8292253197827b92c34de2888dee135 (MD5) Previous issue date: 2006 / Fêmeas e machos adultos de P. squamosissimus (Pisces, Teleostei, Sciaenidae) foram coletados mensalmente no Rio Pará, que banha a ilha do Capim (PA) (S 010 34. 971`; W 0480 52.932`), durante o período de fevereiro de 2004 a fevereiro de 2005, correspondendo ao total de 234 espécimes. As gônadas foram coletadas, fixadas e processadas de acordo com os métodos usuais utilizados para processamento em parafina e análise em microscopia de luz. A espécie em estudo é uma das principais fontes de proteína animal para a população local, sendo capturada de forma intensa e ininterrupta ao longo do ano. Com base em informações dos pescadores locais, essa captura parece estar determinando uma aparente diminuição quantitativa e qualitativa em seus estoques locais. A espécie apresenta desova parcelada e o desenvolvimento gonadal foi caracterizado nos estádios de repouso, maturação, maduro e esvaziado ou semi-esvaziado. Gônadas maduras foram encontradas nos meses de dezembro, janeiro e julho. A análise de correlação entre o estádio gonadal maduro e a variação temporal da relação gonadossomática (ΔRGS) indica também a ocorrência de desova nos respectivos meses. Não obstante, as informações obtidas da correlação entre a ΔRGS e a média de oócitos maduros e percentual de espermatozóides por túbulo seminífero, respectivamente, também indicaram haver desova nos respectivos meses, sendo que aparentemente a espécie apresenta uma desova mais intensa ou desova principal entre os meses de dezembro e janeiro (inverno), e outra desova menos intensa ou secundária no mês de julho (verão). Com base no método da morfologia tubular, foram determinados oito estádios do ciclo do epitélio seminífero (CES), sendo que no estádio 1 os túbulos seminíferos são compostos por espermatogônias primárias e cistos de spermatogônias secundárias; o estádio 2 é composto por espermatogônias primárias e secundárias e cistos de espermatócitos; estádio 3 é caracterizado por espermatogônias primárias, secundárias, cistos de espermatócitos e de espermátides jovens ou recém-formadas; estádio 4 com túbulos seminíferos caracterizados pela presença de espermatogônias primárias e secundárias, espermatócitos e por cistos de espermátides jovens e tardias; estádio 5 apresenta todas as células anteriores e é marcado pelo surgimento de espermatozóides no lúmen tubular; estádio 6 tem como características a diminuição dos cistos de células germinativas e considerável aumento do número de espermatozóides no lúmen tubular; os túbulos seminíferos no estádio 7 contêm poucos cistos de células germinativas e se inicia o esvaziamento da massa de espermatozóides do lúmen tubular; estádio 8 é o último do CES e é caracterizado pela aparente desorganização dos cistos remanescentes de células germinativas no túbulo seminífero. / Male and female adults of P. squamosissimus (Pisces, Teleostei, Sciaenidae) were collected monthly in the Para River that surrounds Capim insland, state of Para (S 010 34. 971` ; W 0480 52.932`), during the month of february 2004 to february 2005, having 234 specimes. The gonads were collected, mounted and processed in accordance with the standard methods of paraffin and analysis using a light microscope. The species under analysis is one of the principal sources of animal protein for the local population, fishing being uninterrupted and intensive throughout the year based on information given by local fisherman, the collection process appears to be determined by an apparent qualiquantitative reduction in local stock. The species represents spawn divisions, the gonad development was characterized in state of repose, maturation, mature and empty or half-empty. Mature gonads were found on the months of december, january and july. Correlation analysis between the maturing state of gonads, seasonal variations in relation to gonadosomatic indexes (GSI) and also the occurrence of spawn in the respective months. Nevertheless, the information obtained in correlation to GSI and mature oocyte mediums and between spermatozoa percentages by seminiferous tubule, respectively, also indicate spawning in the respective months, and apparently that the species represents a more intensive spawning period or a primary spawning period between the months of december and january, and a second or less intensive spawning period in the months of july. Based on the tubular morphology method, eight of the seminiferous epithelium cycle stages (SEC) were determined, stage 1 being seminiferous tubule that are comprised of primary spermatogonia and cysts of the secondary spermatogonia; stage 2 is comprised of primary and seconday spermatogonia and spermatocytes cysts; stage 3 is characterized by primary and secondary spermatogonias, spermatocyte cysts and young spermatids; stage 4 with seminiferous tubule characterized by presence of spermatogonias primary and secondary, spermatocyte and by presence of young and later spermatids cysts; stage 5 represents all of the previously mentioned cells and is highlighted by presence of spermatozoa in the tubule lumen; stage 6 is characterized by reduction of cysts of germinative cells and a considerable increase in number of spermatozoa in the tubular lumen; stage 7 is characterized by seminiferous tubule that contain few cysts of germinative cells and is marked by the begining of a mass emptying of spermatozoa of the tubule lume; stage 8 is the last of the SEC and is characterized by the apparent disorganization of the remaining germinative cellular cysts in the seminiferous tubule.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1681295 bytes, checksum: 41cbc7f4bb36b7a1d7c8d9f98b41a88f (MD5) Previous issue date: 2011-02-28 / The coati (Nasua nasua) belonging the order Carnivora and the family Procyonidae, does not configure the List of species in Brazilian fauna threatened of extinction from the Ministry of the Environment. On the contrary, its unstoppable population growth near urban areas has been causing economic, environmental and sanitary problems. The detailed study about reproductive characteristics of this species proves to be an important tool in reproductive biotechnologies application concerning to conservation as well as to its population control. The objectives on this work were to describe the stages of the seminiferous epithelium combining the techniques of tubular morphology method and acrossomic system method, besides determining the total duration of seminiferous epithelium cycle (SEC) with the incorporation of bromodeoxyuridine (BrdU). In this experiment six captive adult male animals were used. All six animals were used in the description of the stages, but only two were used in the measurement of SEC duration. The total duration of the seminiferous epithelium cycle in this species was calculated in 8,13 days and, as long as it takes approximately 4,5 cycles so that the whole spermatogenic process is complete, about 36,58 days are spent in the production of spermatozoa from a spermatogonia. / O quati (Nasua nasua) pertencente a ordem Carnívora e a família Procyonidae, não configura a Lista das Espécies da Fauna Brasileira Ameaçada de Extinção do Ministério do Meio Ambiente (MMA). Pelo contrário, seu desenfreado crescimento populacional próximo à áreas urbanas, vem causando transtornos de ordem econômica, ambiental e sanitária. O estudo detalhado acerca das características reprodutivas desta espécie é uma potencial ferramenta na aplicação de biotécnicas reprodutivas voltadas a programas tanto de conservação quanto para seu controle populacional em locais onde atuam sinantropicamente. Os objetivos deste estudo foram descrever os estádios do ciclo do epitélio seminífero associando as primícias do método da morfologia tubular com o método do sistema acrossômico, além de calcular a duração total do ciclo do epitélio seminífero (CES) com incorporação da bromodeoxiuridina (BrdU). Foram utilizados seis animais machos adultos provenientes de cativeiro. Todos os animais foram utilizados na descrição dos estádios, mas somente dois destes para o cálculo da duração do CES. A duração total do ciclo do epitélio seminífero foi calculada em 8,13 dias e com aproximadamente 4,5 ciclos do epitélio seminífero são necessários para que todo o processo espermatogênico seja completado, cerca de 36,58 dias são despendidos na produção de espermatozóides a partir de uma espermatogônia.