O câncer tem levado a óbito milhões de pessoas em todo o mundo. Apesar dos conhecimentos a
respeito dos mecanismos moleculares desta patologia estarem aumentando rapidamente, poucos
avanços estão sendo conseguidos nas clínicas de terapia e diagnósticos de tumores, o que torna
de extrema importância o desenvolvimento de novas moléculas para fins terapêuticos e
diagnósticos. Toxinas animais possuem uma diversidade de atividades biológicas e
farmacológicas e têm se mostrado fonte rica de moléculas com potencial terapêutico. Diversos
trabalhos têm sido realizados com toxinas de animais terrestres, mas toxinas de peixes
venenosos marinhos são uma fonte potencial e ainda inexplorada de novas moléculas. Neste
trabalho a peçonha bruta do peixe-escorpião Scorpaena plumieri (SPB) e uma enzima
gelatinolítica (SPGP) purificada a partir desta peçonha, foram avaliadas quanto a sua
aplicabilidade na detecção diferencial de tumores. Os resultados in vitro demonstraram que
tanto SPB quanto SPGP possuem potente efeito antitumoral sobre células de glioblastoma p-53
selvagem (DL50= 3,90,98μg/mL e 8,00x10-122,94x10-12M, respectivamente) e células de
carcinoma ascítico de Ehrlich (DL50=14,052,95μg/mL e 1,22x10-116,56x10-12M,
respectivamente), sendo células de glioblastoma p53-mutante mais resistentes, para ambas as
substâncias (DL50 > 125μg/mL para SPB e DL50 > 1,39x10-9M para SPGP). As alterações
morfológicas observadas nestas linhagens quando tratadas com SPB e SPGP, e os dados da
coloração com DAPI, indicam que o efeito antitumoral destas substâncias ocorre via apoptose.
Sondas radioativas de SPB ([99mTc]SPB) e SPGP ([131/125I]SPGP) foram sintetizadas com alta
atividade específica e alta pureza radioquímica. Estudos de biodistribuição, realizados por
injeções via endovenosa caudal, em camundongos implantados nos coxins plantares com tumor
de Ehrlich mostraram que a SPB não é captada significativamente pelo tumor. Por outro lado, a
SPGP foi significativamente captada pela pata com tumor, em todos os tempos avaliados
(p<0,05). A administração intratumoral da [125I]SPGP elevou os níveis desta molécula no tumor
e reduziu a captação em outros órgãos. Estudos em animais com edema demonstraram que a
SPGP apresenta um tempo de residência maior na região tumoral do que em regiões
inflamatórias. Estudos hematológicos e histopatológicos realizados demonstraram que a SPB e
SPGP não apresentam toxicidade aguda, mesmo em concentrações dez vezes maiores que as
utilizadas nos experimentos de biodistribuição e detecção de tumores. Estes resultados são
inéditos e mostram o potencial da SPGP como molde para o desenvolvimento de fármacos e
radiofármacos para terapia e diagnóstico de tumores. / Cancer has killed millions of people worldwide. Despite the increasing knowledge about the
molecular basis of tumor development, few advances have been reached in clinical therapy and
diagnoses, which shows the importance of new drugs development for therapeutic and diagnosis
purpose. Venomous creatures have been studied as potential sources of pharmacological agents
and physiological tools. A lot of work has been done about biological activity of terrestrial
animals, but comparatively less research has been undertaken on venomous marine creature,
particularly fish, which means that marine toxins represent a vast and unexplored source of
novel molecules with therapeutical potential. In this work, the scorpionfish Scorpaena plumieri
crude venom (SPB) and a gelatinolytic protease purified from this venom (SPGP) were
evaluated for their applicability for in vivo tumor detection. In vitro results showed that both,
SPB and SPGP, possess a powerful antitumor effects on p53-wild-type glioblastoma cells
(LD50= 3,90,98μg/mL and 8,00x10-122,94x10-12M, respectively) and Ehrlich ascites
carcinoma cells (LD50=14,052,95μg/mL and 1,22x10-116,56x10-12M, respectively). P53-
mutant glioblastoma cells were more resistant to both, SPB and SPGP treatment (LD50 >
125μg/mL and LD50 > 1,39x10-9M, respectively). The morphological changes observed in the
cell lines treated with SPB and SPGP, and the data of DAPI staining, indicate that the antitumor
effect of these substances occurs via apoptosis. Radioactive probes of SPB ([99mTc] SPB) and
SPGP ([125I] SPGP) with high specific activity and high radiochemical purity were
synthesized. Data of biodistribution studies, performed by intravenous injections in Swiss mice
bearing Ehrlich carcinoma cells, showed that SPB has poor uptake in tumor region. On the other
hand, SPGP had a substantial uptake in tumor at all analyzed times. Intratumoral administration
of [125I]SPGP increased its uptake by the tumoral region and substantially reduced the uptake by
other organs. Biodistribution studies in animals with edema confirmed that SPGP presents
longer residence time in tumoral region than into inflammation site. Hematologic and
histopathologic studies showed that SPB and SPGP did not present acute toxicity, even at
concentrations ten times higher than those used in biodistribution studies. These results indicate
the potential of SPGP as template for the development of new drugs and radiopharmaceuticals
for tumors diagnosis and therapy.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:bdtd.cdtn.br:49 |
| Date | 18 March 2008 |
| Creators | Juliana Soprani |
| Contributors | Raquel Gouvêa dos Santos, Maria José Neves, Mário Sérgio Palma |
| Publisher | CNEN - Centro de Desenvolvimento da Tecnologia Nuclear, Belo Horizonte, CTRA - Programa de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia das Radiações, Minerais e Materiais, CDTN, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações do CDTN, instname:Centro de Desenvolvimento da Tecnologia Nuclear, instacron:CDTN |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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