Orientadora : Profª. Drª. Silvia Cristina Osaki / Coorientadora : Profª. Drª. Sheila Rezler Wosiacki / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Palotina, Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal. Defesa: Palotina, 31/05/2017 / Inclui referências : f. 60-74 / Resumo: A mastite é causada por inúmeros agentes etiológicos. O Staphylococcus aureus é considerado um dos micro-organismos que mais provocam a enfermidade. O mesmo também causa sérias infecções purulentas tanto no homem, quanto nos animais, tornando-se um agente zoonótico de relevância para Saúde Pública. O presente trabalho teve por objetivo a identificação de Staphylococcus aureus Meticilina Resistente (MRSA), através de sua caracterização e classificação molecular e fenotípica, em diferentes amostras provenientes de propriedades da região de Cascavel - PR. Para tanto, foi realizada uma triagem com amostras colhidas de tanque de expansão de 69 propriedades. Estas amostras foram submetidas à pesquisa dos genes de resistência mecA e blaZ e do gene femA para confirmação da espécie, utilizando a Reação em Cadeia pela Polimerase. Dentre o total de positivos na PCR, quatro propriedades que apresentaram os genes de resistência, foram visitadas novamente. Todas as vacas em lactação dessas propriedades foram submetidas ao teste de CMT para verificar a presença de mastite subclínica. Em seguida foram realizadas colheitas de amostras de tanque, teteiras, amostras de leite de animais com mastite subclínica e clínica e suabe de fossas nasais e das mãos dos manipuladores, que foram analisadas fenotipicamente (Gram, oxidase, catalase, coagulase, manitol e Dnase), genotipicamente (genes femA, coag, blaZ e mecA) e testadas para a sensibilidade a antimicrobianos. As amostras positivas para S. aureus foram submetidas à técnica de Eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE) para tipificar os isolados. Foi aplicado um questionário epidemiológico com o objetivo de conhecer os fatores de risco relacionados com a presença dos genes de resistência. Como resultados, observamos a presença de 42 isolados tipificados pela técnica PFGE, com amostras positivas para os genes testados (24,21% para mecA; 84,37% para blaZ; 100% para coag e femA) e teste de sensibilidade a antimicrobianos (presença de resistência a Oxacilina) caracterizando MRSA. No PFGE observamos uma heterogeneidade quanta à presença de pulso tipos dentro das propriedades, e até mesmo a presença de um mesmo pulso tipo em propriedades diferentes e locais diferentes, demonstrando a diversidade clonal existente e a provável circulação dos micro-organismos. No presente estudo não foram encontrados fatores de risco quando analisados pelo programa software Epi infoTM 7. Palavras-chave: PFGE, fenotípico, MRSA / Abstract: Mastitis is caused by numerous etiological agents. Staphylococcus aureus is considered one of the micro-organisms that most cause the disease. The same also causes serious purulent infections in both humans and animals, becoming a zoonotic agent of relevance to Public Health. The present work aimed at the identification of Resistant Methicillin Staphylococcus aureus (MRSA), through its characterization and molecular and phenotypic classification, in different samples from properties of the Cascavel - PR region. In order to do so, a sample was collected with samples collected from the 69 properties expansion tank. These samples were submitted to the search of the mecA and blaZ resistance genes and the femA gene for confirmation of the species using Polymerase Chain Reaction. Among the total of positives in the PCR, four properties that presented resistance genes, were visited again. All lactating cows of these properties were submitted to the CMT test to verify the presence of subclinical mastitis. After that, samples of milk, milk samples from animals with clinical and subclinical mastitis and nasal fossa were collected, and phenotypically analyzed (Gram, oxidase, catalase, coagulase, mannitol and Dnase) , Genotyped (femA, coag, blaZ and mecA genes) and tested for antimicrobial susceptibility. Samples positive for S. aureus were submitted to pulsed field gel electrophoresis (PFGE) technique to typify the isolates. An epidemiological questionnaire was applied in order to know the risk factors related to the presence of resistance genes. As results, we observed the presence of 42 PFGE-typed isolates, with positive samples for the genes tested (24.21% for mecA, 84.37% for blaZ, 100% for coag and femA) and antimicrobial susceptibility test Presence of resistance to oxacillin) characterizing MRSA. In PFGE we observed a quantum heterogeneity to the presence of pulse types within the properties, and even the presence of a same pulse type at different properties and different sites, demonstrating the existing clonal diversity and the likely circulation of the microorganisms. In the present study, no risk factors were found when analyzed by the software program Epi infoTM 7. Key-words: PFGE, phenotype, MRSA.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:dspace.c3sl.ufpr.br:1884/49077 |
| Date | 28 September 2017 |
| Creators | Sinhorini, Wellington Augusto |
| Contributors | Wosiacki, Sheila Rezler, Universidade Federal do Paraná. Setor Palotina. Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal, Osaki, Silvia Cristina |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | 82 f. : il., algumas color., gráfs., tabs., application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPR, instname:Universidade Federal do Paraná, instacron:UFPR |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | Disponível em formato digital |
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