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Efeito do ácido linoléico conjugado TRANS-10, CIS-12 na regulação do acúmulo de lípides e expressão gênica em embriões produzidos in vitro

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Previous issue date: 2010-02-25 / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A suplementação do ácido linoléico conjugado trans-10, cis-10 no meio de cultivo, representa uma importante alternativa para aumento da sobrevivência dos embriões após a criopreservação. No entanto este isômero de CLA no cultivo in vitro sem antioxidante pode aumentar a taxa apoptótica. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da adição CLA trans-10, cis-12 no cultivo in vitro de embriões sem antioxidante. Zigotos bovinos (n = 1.694) foram divididos em dois tratamentos: (T1) grupo controle, zigotos cultivados no meio CR2aa suplementado com soro fetal (n = 815); (T2) zigotos cultivados no meio CR2aa suplementado com soro fetal mais 100 µM CLA trans-10, cis-12. Os embriões foram avaliados quanto a desenvolvimento, quantidade de lípides e criotolerância. Transcritos dos RNA mensageiros (RNAm) dos genes selecionados foram mensurados pelo Real Time PCR. Suplementação de CLA trans-10, cis-12 não afeta significativamente a taxa de blastocisto (31,8% e 34,1% T1 e T2, respectivamente, p = 0,20) e nível dos RNAm dos genes relacionados com stress celular, apoptose e síntese de novo de ácido graxo. Quantidade de lípides e transcritos do RNAm do gene 1-acilglicerol-3-fosfato oaciltransferase 1 enzima relacionado a síntese de triglicérides foram significativamente reduzidos nos embriões cultivados na presença de CLA trans-10, cis-12 em comparação com o grupo controle. Teve aumento significativo na taxa de re-expansão dos blastocistos cultivados na presença de CLA trans-10, cis-12, após o descongelamento (34.4 e 56.3% para T1 e T2, respectivamente p = 0,002). Essa diferença não persistiu na taxa de eclosão (14,0% e 16,5% para T1 e T2, respectivamente, P = 0,62). Esses resultados mostram que o CLA trans-10, cis-12 reduz o acúmulo de lípides nos embriões pela redução nos níveis dos transcritos do gene 1-acilglicerol-3-fosfato o-aciltransferase 1 sem afetar a qualidade do embrião. Adicionalmente, este ácido graxo aumenta a taxa de re-expansão, no entanto, não melhora a taxa de eclosão. / Supplementation of conjugated linoleic acid trans-10, cis-10 in the culture medium, represents an important alternative to increasing the survival of embryos after cryopreservation. However the addition of culture media with CLA trans-10, cis-12 without antioxidant may increase the apoptotic rate. The aim of this study was to evaluate the effect of adding CLA trans-10, cis-12 in vitro culture of embryos without antioxidant. Bovine zygotes (n = 1,694) were divided into two treatments: (T1) control group, zygotes cultured in CR2aa medium supplemented with fetal calf serum (n = 815), (T2) zygotes cultured in CR2aa medium supplemented with fetal calf serum plus 100 µM CLA trans-10, cis-12. Embryos were evaluated for development, amount of lipids and cryotolerance. Transcripts of messenger RNA (mRNA) of selected genes were measured by real time PCR. Supplementation of CLA trans-10, cis-12 did not significantly affect the blastocyst rate (31.8% and 34.1% T1 and T2, respectively, p = 0,20) and the mRNA level of genes related to cell stress, apoptosis and de novo synthesis of fatty acid . Lipids and transcripts of the mRNA of the gene 1-acilglicerol-3-phosphate o-acyltransferase 1 enzyme related to the synthesis of triglycerides were significantly reduced in embryos cultured in the presence of CLA trans-10, cis-12 in comparison the control group. Had increased rate re-expansion of blastocysts cultured in the presence of CLA trans-10, cis-12, after thawing (34.4 and 56.3% for T1 and T2, respectively p = 0,002). This difference did not persist in the hatching rate (14.0 and 16.5% for T1 and T2, respectively, P = 0,62). These results show that the CLA trans-10, cis-12 reduces the accumulation of lipids in the embryos by reducing the levels of gene transcripts acilglicerol-1-3-phosphate oacyltransferase 1 without affecting the quality of the embryo. Additionally, this fatty acid increases the rate re-expansion, but does not improve the hatching rate.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:hermes.cpd.ufjf.br:ufjf/2507
Date25 February 2010
CreatorsBatista, Ribrio Ivan Tavares Pereira
ContributorsRaposo, Nádia Rezende Barbosa, Viana, João Henrique Moreira, Garcia, Raúl Marcel González
PublisherUniversidade Federal de Juiz de Fora (UFJF), Programa de Pós-graduação em Ciências Biológicas: Imunologia e Doenças Infecto-Parasitárias/Genética e Biotecnologia, UFJF, Brasil, ICB – Instituto de Ciências Biológicas
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFJF, instname:Universidade Federal de Juiz de Fora, instacron:UFJF
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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