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Previous issue date: 2016-10-31 / Peptídeos antimicrobianos são um grupo diverso de moléculas bioativas
produzidas naturalmente por uma variedade de organismos procariotos e
eucariotos, e que tem atividade antimicrobiana. Tendo em vista que o Brasil
representa o país de maior incidência de leishmaniose no continente americano e a
inexistência de peptídeos bacterianos com atividade neste parasito, o objetivo
desde trabalho foi a prospecção de peptídeos produzidos por bactérias com ênfase
na atividade anti-Leishmania. Foram utilizadas 466 amostras bacterianas para a
obtenção de extratos brutos extracelulares, investigados quanto a atividade
antimicrobiana total, utilizando como células-alvo culturas de bactérias (Grampositivas
e negativas), leveduras (Candida sp) e Leishmania sp. Esta avaliação da
atividade antimicrobiana total permitiu definir as amostras produtoras de
substâncias bioativas, bem como a caracterização do espectro de ação da
substância antimicrobiana. E somente os extratos que tiveram atividade anti-
Leishmania foram submetidos a precipitação protéica para avaliação da produção
de peptídeos antimicrobianos. Quanto à caracterização da amostra produtora,
foram realizados testes morfo-tintoriais, genéticos e metabólicos para garantia da
pureza da cultura e determinação do melhor momento fisiológico de produção da
substância antimicrobiana. Em relação ao espectro de ação, 222 extratos tiveram
atividade antagônica ao crescimento bacteriano; 05 extratos tiveram atividade
antagônica à Candida sp.; e 20 extratos tiveram atividade antagônica ao
crescimento de Leishmania sp., totalizando 51 % de amostras positivas para
produção de substâncias antimicrobianas. Quanto à atividade anti-Leishmania, os
valores médios de inibição de extratos a 20 mg/mL em formas promastigotas do
parasito pelo método do MTT foi de 33 % em L. braziliensis e L. chagasi, 30,7 %
em L. major e 29 % em L. amazonensis. A redução da viabilidade de formas
amastigotas também foi observada para o extrato bruto a 40 mg/mL de
Staphylococcus edpidermidis (CGP360), com valor de 60 %. E esse mesmo extrato
não apresentou toxicidade para macrófagos peritoneais, resultado importante para
novas drogas de uso sistêmico. Quanto à caracterização da amostra produtora,
observou-se que a produção da substância antagonista com maior atividade anti-
Leishmania ocorreu em extratos advindos de culturas crescidas em meios TSB e
BHI e provenientes da fase estacionária de crescimento. Estudos adicionais devem
ser realizados para uma melhor compreensão da interação dos extratos
bacterianos em espécies de Leishmania, mas os resultados descritos neste
trabalho são promissores e inéditos na literatura científica. / Antimicrobial peptides are a diverse group of bioactive molecules naturally
produced by a variety of prokaryotic and eukaryotic organisms with antimicrobial
activity. Brazil represents the highest incidence country of leishmaniasis in the
American continent, so the objective of this work was prospect bacteria peptides
with anti-Leishmania activity. A total of 466 bacterial samples were used to produce
extracellular crude extracts to evaluate antimicrobial activity against bacterial cells
(Gram-positive and negative bacteria), yeast (Candida sp) and Leishmania sp. and
characterize antimicrobial spectrum of action. Only Leishmania activity extracts
were submitted to protein precipitation and tested to peptides production. The
producing sample were characterized by genetic, morphologic and metabolic tests,
and the best physiological moment of peptides production was determinate. The
results showed that 222 extracts had bacterial activity, 05 extracts had Candida
activity, and 20 extracts had Leishmania activity, summarizing 51 % of positive
samples to antimicrobial substances production. For promastigote Leishmania
activity, 20 mg/ mL extracts showed inhibition values by MTT method of 33 % in L.
braziliensis and L. chagasi, 30.7 % in L. major and 29 % in L. amazonensis. The
amastigote forms viability was observed for 40 mg/mL crude extract of
Staphylococcus edpidermidis (CGP360), with a reduction value of 60 %. And this
same extract did not have toxicity to peritoneal macrophages, an important result for
new drugs of systemic use. Concerning the characterization of the producing
sample, it was observed that the production of the antagonistic substance with the
highest anti-Leishmania activity occurred in TSB and BHI media extracts coming
from stationary phase. Additional studies should be performed to better understand
the interaction of bacterial extracts in Leishmania species, but the results described
in this paper are promising and unpublished in the scientific literature.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:hermes.cpd.ufjf.br:ufjf/6800 |
| Date | 31 October 2016 |
| Creators | Silva, Carolina dos Santos Fernandes da |
| Contributors | Silva, Vânia Lúcia da, Diniz, Cláudio Galuppo, Coimbra, Elaine Soares, Pinto, Priscilla de Faria, Abramo, Clarice, Paiva, Aline Dias, Resende, Juliana Alves |
| Publisher | Universidade Federal de Juiz de Fora (UFJF), Programa de Pós-graduação em Ciências Biológicas: Imunologia e Doenças Infecto-Parasitárias/Genética e Biotecnologia, UFJF, Brasil, ICB – Instituto de Ciências Biológicas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFJF, instname:Universidade Federal de Juiz de Fora, instacron:UFJF |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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