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Previous issue date: 2015-12-18 / Não informada / The bovine anaplasmosis is a disease characterized by severe anemia, fever, weight
loss, decreased milk production, abortion and death in the animals. It is caused by A.
marginale and transmitted by ticks, leading severe economic losses in cattle production and hence strategies for developing vaccines are essential to minimize its impact. In this study, a chimeric protein was produced by synthetic DNA, carrying sequences of predicted epitopes from OMP7, OMP9 and MSP1a, and used as vaccine emulsified with ISA adjuvant. After three doses, Balb/c mice were challenged with 3x105cel/mL A. marginale UFMG2 to assess proctetion of compound MSP1a/OMP7/9+ISA. There were not body weight alterations neither clinical signs were observed in immunized mice. Bacteremia count showed drastic reduction and discrete alteration on erythrocyte morphology (spherocytes) in vaccined mice 56th day after challenge. No alteration was observed in hematologic data in relation to infected control mice. The evaluation obtained in this study showed the importance of the MSP1a /OMP7/9 protein in the immune response of the Balb/c and your applicability potential in the recombinant vaccine production. / A anaplasmose bovina é uma enfermidade causada por uma rickettsia denominada
Anaplasma marginale (A. marginale) transmitida por carrapatos e a doença se caracteriza por
anemias, febre, perda de peso, diminuição da produção de leite, aborto e morte nos animais. A
doença causa perdas econômicas na produção de gado e por isso estratégias para o
desenvolvimento de vacinas é imprescindível para minimizar seu impacto. Neste estudo uma
proteína recombinante de A.marginale foi produzida a partir de uma estratégia inovadora de
utilizar DNA sintetico para codificar os epítopos dos principais antígenos de A.marginale.
Após a clonagem em pGEM e subclonagem em pHT43, a proteína quimérica foi expressa em
Escherichia coli contendo epítopos dos antigenos OMP7/9 (outer membrane protein 7/9) e
MSP1a (major surface protein 1a). A antigenicidade foi comprovada pela reatividade da
proteina recombinante com soro de bezerro com anaplasmose, e a imunogenicidade e
proteção vacinal foi comprovada em camundongos Balb/c. Com uma fórmula composta com
adjuvante oleoso (MSP1a/OMP7/9+ISA), animais receberam três (3) doses vacinais e
desafiados com 3x105cel/mL de A. marginale UFMG2. Os animais imunizados não
apresentaram variação de peso corporal nem sinais clínicos da doença, porém houve redução
significativa da carga bacterêmica nos vacinados (p<0,0008) comparados com grupos
placebos. Além disso, não houve alterações hematológicas como aumento no número de
monócitos (p<0,005), neutrófilos (p<0,05) e leucocitose (p<0,05), verificadas nos controles
infectados.
As avaliações deste trabalho demonstraram a importância da proteína recombinante
MSP1a/OMP7/9 na melhoria da resposta imunológica de Balb/c e sua potencial aplicabilidade
na produção de vacinas recombinantes.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:http://localhost:tede/4982 |
| Date | 18 December 2015 |
| Creators | Cangussu, Alex Sander Rodrigues |
| Contributors | Nogueira, Paulo Afonso, Mariúba, Luis André Morais, Nogueira, Paulo Afonso, Malheiro, Adriana, Costa de Oliveira, Cintia Mara, Silva, Maria Luana Cristiny Rodrigues, Ramasawmy, Rajendranath |
| Publisher | Universidade Federal do Amazonas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, UFAM, Brasil, Instituto de Ciências Biológicas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM, instname:Universidade Federal do Amazonas, instacron:UFAM |
| Rights | info:eu-repo/semantics/embargoedAccess |
| Relation | 32215883775770440, 600, 600, 1984485651082134923 |
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