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Previous issue date: 2016-11-30 / The actual scientific approach to bioengineering organs is based on the use of natural extracellular matrix of decellularized lung as initial departure for subsequent reconstruction of the organ for recellularization in a bioreactor. The decellularization technique can be performed by two infusion ways, one through the trachea and other by pulmonary artery. The aim of this studies was to investigate in an experimental animal model, by the occlusion at the end of inspiration (OEI) and movement equation (ME), the behavior of the elastic, viscous and viscoelastic mechanical properties, of mice lungs after the process of decellularization through the trachea and the pulmonary artery. Were used 30 male mice C57BL/6, weighing 17-18 g (7-8 weeks of age), anesthetized and euthanized by exsanguination through the abdominal aorta. The decellularization protocol comprised the following steps: collecting, cleaning, freezing and thawing, rinsing with sodium dodecyl sulfate and phosphate buffered saline. For the studies I and II, the lungs were divided into the control group (GC = 10), the decellularization group by the trachea (TDG = 10) and the pulmonary artery decellularization group (PDG = 10), 5 lungs in each group for the study I that had the analysis through the technique of OEI and 5 lungs in each group for the study II with analysis through the ME. In the study I, the values of static elastance (Eest = CG: 226.9 ± 4.1, PDG: 162.6 ± 3.9, TDG: 154.8 ± 1.7) and dynamics (Edyn = CG: 240 , 9 ± 6.7, PDG: 176 ± 5.4, TDG: 177.6 ± 1.6) were significantly lower in TDG and PDG when compared to CG. In study II, the value of lung resistance presented in TDG was significantly lower in relation to the other two groups (R = CG: 5.32 ± 0.26; PDG: 5.94 ± 0.24; TDG: 2.85 ± 0.14) and GC elastance was significantly higher in comparison with TDG and PDG, and in PDG the difference was significantly lower in relation to TDG (E = CG: 279 ± 13.81; PDG: 146 ± 19.04, TDG: 209.6 ± 12.06). We can observe in both the two-way decellularization are effective to provide a scaffold ideal for pulmonary later recellularization when evaluated by the OEI and ME. Furthermore, the decellularized lungs through the pulmonary artery may be used to create a pulmonary scaffold in less time, because the protocol can be performed in a day, which facilitates the process for obtaining functional lungs scaffolds. / A abordagem científica atual para a bioengenharia de órgãos é baseada na utilização da matriz extracelular natural do pulmão descelularizado como partida inicial para posterior reconstrução do órgão por recelularização em um biorreator. A técnica de descelularização pode ser realizada por duas vias de perfusão, uma através da traqueia e a outra pela artéria pulmonar. O objetivo deste estudo foi investigar em um modelo experimental animal, através da técnica de oclusão ao final da inspiração (OFI) e equação do movimento (EM), o comportamento das propriedades mecânicas elásticas, viscosas e viscoelásticas de pulmões descelularizados de camundongos pelos métodos de perfusão através da traqueia e da artéria pulmonar. Foram utilizados 30 camundongos machos da raça C57BL/6, com peso de 17-18 g (7-8 semanas de idade), anestesiados e eutanasiados por exsanguinação pela aorta abdominal. O protocolo de descelularização seguiu as etapas de coleta, limpeza, congelamento e descongelamento, lavagem com dodecil-sulfato de sódio e tampão fosfato-salino. Para a realização dos estudos I e II, os pulmões foram divididos em grupo controle (GC = 10), grupo descelularização pela traqueia (TDG = 10) e grupo descelularização pela artéria pulmonar (PDG = 10), sendo 5 pulmões em cada grupo para o estudo I que teve a análise através da técnica de OFI e 5 pulmões em cada grupo para o estudo II com análise através da EM. No estudo I, os valores de elastância estática (Eest = CG: 226,9 ± 4,1; PDG: 162,6 ± 3,9; TDG: 154,8 ± 1,7) e dinâmica (Edyn = CG: 240,9 ± 6,7; PDG: 176 ± 5,4; TDG: 177,6 ± 1,6) foram significativamente menores em TDG e PDG quando comparados com o CG. Já no estudo II, o valor da resistência pulmonar apresentado no TDG foi significativamente menor em relação aos outros dois grupos (R = CG: 5,32 ± 0,26; PDG: 5,94 ± 0,24; TDG: 2,85 ± 0,14) e o valor da elastância de CG apresentou-se maior de forma significativa em comparação com a TDG e PDG, e no PDG a diferença foi menor significativamente em relação à TDG (E = CG: 279 ± 13,81; PDG: 146 ± 19,04; TDG: 209,6 ± 12,06). Podemos observar que, quando avaliadas pelas técnicas de OFI e EM, as duas vias de descelularização foram eficazes na geração de um scaffold pulmonar ideal para posterior recelularização. Além disso, a técnica de descelularização através da artéria pulmonar mostrou-se eficaz para a obtenção de um scaffold pulmonar em menor período de tempo, uma vez que o protocolo pode ser realizado em um dia, o que facilita o processo de obtenção de pulmões funcionais.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:localhost:tede/1857 |
| Date | 30 November 2016 |
| Creators | Urbano, Jessica Julioti |
| Contributors | Oliveira, luis, Oliveira, Luis Vicente Franco de, Jorge, Luciana Maria Malosá Sampaio, Romanholo, Beatriz Mangueira Saraiva |
| Publisher | Universidade Nove de Julho, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Reabilitação, UNINOVE, Brasil, Saúde |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Uninove, instname:Universidade Nove de Julho, instacron:UNINOVE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 8765449414823306929, 600 |
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