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Aspectos da resposta imune humoral e celular de bovinos naturalmente infectados com mycobacterium bovis e avaliação de vacina de subunidade protéica para tuberculose em camundongos / Cellular and humoral immune response aspects of tuberculosis cattle naturally infected with Mycobacterium bovis and evaluation of a proteic subunit tuberculosis vaccine in mice

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Previous issue date: 2008-08-05 / Several aspects of the bovine tuberculosis were analyzed in this study. The immunogenicity of recombinant MPT-51 (rMPT-51), Ag-85 and M. bovis-BCG were characterized in an immunosorbent assay, where 208 serum samples from positive intradermal tuberculin test (ITT) animals and 54 serum samples
from ITT negative animals where analyzed. M. bovis-BCG and Ag-85 were strongly recognized by antibodies from naturally infected cattle. Additionally, the clinical status of the animals were correlated with the ITT positivity, with the specific production of IL-4 by TCD4 and TCD8 positive lymphocytes, and with nitric oxide (NO) production by macrophages from naturally tuberculosis infected bovine peripheral blood. ITT positive animals showed TCD4+IL4+ cells specific to M. bovis-BCG extract. High background levels of TCD8+IL-4+ lymphocytes were observed in ITT positive animals independent of the stimuli. When cell cultures where stimulated with M. bovis-BCG protein extract, there
was no observed difference in NO production between the groups. Naturally tuberculosis infected bovine presented TCD4+IL4+ cells specific for M. bovis- BCG and a preserved NO production. Finnally, the immunogenicity of rMPT-51 use as a proteic sub-unit vaccine was evaluated in BALB/c mice, with two different adjuvants, incomplete Freund and CpG DNA. For this, mice were immunized and challenged with M. tuberculosis. Immunization with rMPT-51 antigen and either adjuvant induced, in the lungs, a migration increase of
TCD5+IFN + cells specific for rMPT-51, when compared to controls (P<0.05). rMPT-51 plus CpG DNA presented a better performance among the different vaccination schemes tested, in part due to the ability of stiulate TCD5+IFN + cells and hampering the bacterial load, thus preserving the functional integrity of challenged mice lungs / Nesta tese foram avaliados vários aspectos da tuberculose bovina e do Mycobacterium bovis. Primeiro caracterizou-se a imunogenicidade do MPT-51, Ag 85 e BCG em ensaio imunoenzimático, onde foram utilizadas 208 amostras
de soro de animais TTI positivo e 54 amostras de bovinos negativos. O BCG-M. bovis e o Ag 85 foram fortemente reconhecidos pelos anticorpos dos bovinos naturalmente infectados. Segundo correlaciounou-se o estado clínico do animal à positividade ao teste intradérmico, com a produção específica de IL-4 por linfócitos TCD4+ e TCD8+ e a produção de óxido nítrico por macrófagos do sangue periférico de bovinos naturalmente infectados com tuberculose. Foi
observado que os bovinos TTI positivos apresentaram células CD4+IL-4+ específicas para extrato protéico de M. bovis-BCG. Observaram-se altos níveis basais de linfócitos TCD8+IL-4+ independente de estímulos nos animais reatores. Quando as culturas foram estimuladas com extrato protéico de BCG,
não houve diferença quanto à produção de NO. Os bovinos tuberculosos, naturalmente infectados, apresentaram células TCD4+IL4+ específicas para M. bovis-BCG, preservando a produção de NO pelos macrófagos. Finalmente, a imunogenicidade do MPT-51 como vacina de sub-unidade protéica foi avaliada em camundongos BALB/c, testando o MPT-51 com dois adjuvantes, o incompleto de Freund e o CpG DNA. Os camundongos foram imunizados e posteriormente desafiados com M. tuberculosis. No pulmão, a imunização com
antígeno rMPT-51 a 20&#956;g/ml + adjuvantes de Freund Incompleto e CpG DNA induziu aumento da migração de células TCD5+IFN- + específicas para o MPT-51 para o local da infecção, quando comparados com o controle (p<0,05). O
MPT-51+CpG DNA, apresentou melhor desempenho dentre os esquemas de vacinação adotados, devido a capacidade de estimular a produção de células TCD5+IFN- + e a diminuição da carga bacteriana, preservando assim a integridade funcional do pulmão dos camundongos, quando desafiados

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tde/1199
Date05 August 2008
CreatorsSILVA, Ediane Batista da
ContributorsKIPNIS, Ana Paula Junqueira, KIPNIS, André
PublisherUniversidade Federal de Goiás, Doutorado em Ciência Animal, UFG, BR, Ciências Agrárias
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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