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Previous issue date: 2014-03-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The fungi of the genus Paracoccidioides sp are etiologic agents of disease
paracoccidioidomycosis (PCM), are termodimórficos and have the ability to move the
saprobiótica form to yeast form at a temperature around 37 ° C. The uptake is essential
for the growth and adaptation of the fungus in host tissue, where nitrogen-dependent
pathways have close relationship with pathogenicity. Pathogenic organisms possess a
regulatory system called Nitrogen Catabolic Represion which is induced when nitrogen
availability is limiting in surround causing the expression of genes necessary for
nutrient uptake when preferred sources such as glutamine and ammonia are scarce. This
regulatory process comprises a complex system in the infectious process. This study
aims to identify proteins regulated by nitrogen depletion, where the pathogenic fungus
Pb01-like was analyzed as a proteomic response. Pb01-like was grown in minimal
medium control MMcM (+N) and treated MMcM (-N) for 6 hours at 37 ° C,
cytoplasmic proteins were extracted and subjected to tryptic digestion and
quantification. The proteomic profile revealed an expression of 135 proteins, 40
proteins induced or identified the treaty, 58 repressed or identified control and 44
proteins were expressed constitutively. In silico analyzes showed that the gene is
regulated by formamidase areA transcription factor that responds conditions of nitrogen
depletion in Aspergillus nidulans and the surrounding medium the enzymatic activity
for the gene of formamidase Pb01-like induced depletion of nitrogen during. The amino
acid sequence of the regulatory gene areA important in the metabolism of nitrogen was
aligned between Pb01-like, Pb18, Aspergillus nidulans and Neurospora crasssa where
this alignment showed high identity and homology of conserved zinc finger domains
and DUF 1752. Metabolic pathways such as fermentation, gluconeogenesis, protein
synthesis, nitrogen metabolism were induced for the depletion of nitrogen, showing a
possible modulation of the metabolism of the fungus in order to be able to adapt to
environments with nitrogen limitation. / Os fungos do genêro Paracoccidioides sp são agentes etiológicos da doença
paracoccidioidomicose (PCM), são termodimórficos e possuem a capacidade de
transitar da forma miceliana para a forma de levedura à temperatura em torno de 37°C.
A captação de nitrogênio é essencial para o crescimento e adaptação do fungo em tecido
hospedeiro, onde vias dependentes de nitrogênio possuem estreita relação com a
patogenicidade. Organismos patogênicos possuem um sistema regulatório conhecido
como Nitrogen Catabolic Repression que é induzido quando a disponibilidade de
nitrogênio é limitante no meio, ocasionando a expressão de genes necessários para a
captação do nutriente quando fontes preferenciais como a glutamina e amônia estão
escassas. Esse processo regulatório compõe um complexo sistema no processo
infeccioso. Este trabalho tem o objetivo de identificar proteínas reguladas pela depleção
de nitrogênio, onde o fungo patogênico Pb01-like foi analisado quanto sua resposta
proteômica. Pb01-like foi cultivado em meio mínimo controle MMcM (+N) e tratado
MMcM (-N) por 6 horas a 37°C, as proteínas citoplasmáticas foram extraídas e
submetidas a quantificação e digestão triptica. O perfil proteômico revelou uma
expressão 135 proteínas, sendo 40 proteínas induzidas ou identificadas apenas no
tratado, 58 proteínas reprimidas ou identificadas apenas no controle e 44 foram
expressas constitutivamente. Análises in silíco revelou que o gene da formamidase é
regulado pelo fator de transcrição areA, em Aspergillus nidulans que responde as
condições de depleção de nitrogênio do meio circundante sendo a atividade enzimática
para o gene da formamidase de Pb01-like induzida durante a depleção de nitrogênio. A
sequência de aminoácidos do fator de transcrição areA importante regulador do
metabolismo de nitrogênio foi alinhado entre Pb01-like, Pb18, Aspergillus nidulans e
Neurospora crasssa onde esse alinhamento demonstrou uma alta identidade e
homologia dos domínios conservados dedo de zinco e DUF 1752. Vias metabólicas
como a fermentação, gliconeogênese, síntese de proteínas, metabolismo de nitrogênio
estavam induzidas durante a depleção de nitrogênio, demonstrando uma possível
modulação do metabolismo do fungo afim de conseguir adaptar-se a ambientes com
limitação de nitrogênio.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tede/4543 |
| Date | 13 March 2014 |
| Creators | Cruz-Leite, Vanessa Rafaela Milhomem |
| Contributors | Borges, Clayton Luiz, Borges, Clayton Luiz, Bailão, Alexandre Melo, Brito, Wesley de Almeida, Casaletti, Luciana, Pereira, Maristela |
| Publisher | Universidade Federal de Goiás, Programa de Pós-graduação em Genetica e Biologia Molecular, UFG, Brasil, Instituto de Ciências Biológicas - ICB (RG) |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG |
| Rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | -7235106986317239737, 600, 600, 600, 600, -3872772117827373404, -768308251561457537, 2075167498588264571 |
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