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Previous issue date: 2018-08-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Glutathione is classified as a linear, water-soluble tripeptide, consisting of glutamic acid, L-cysteine and glycine being obtained through the synthesis of consecutive enzymatic reactions, which has innumerable intracellular metabolic functions, its main function is to avoid the cellular oxidation. Recent studies, indicate that GSH’s (glutathione) function disorder, is involved by the etiology of some diseases such as: liver cirrhosis, pulmonary, gastrointestinal, inflammation in the pancreas, diabetes, neurodegenerative diseases, among others. In addition, GSH stands out in the environmental area as an important biological parameter, had been being one of the most important indicators of oxidative stress. Considering these factors, the aim of the present research is to evaluate the glutathione production by Saccharomyces cerevisiae using agroindustry’s residues. Supplying better conditions to determinate glutathione production. By means of a CCD (Central composite design) 22 with four central points and four-star points, begetting twelve experiments, the fermentation tests were carried out. In the twelve batch experiments, the concentration of sucrose present in beet molasses (61 – 139 g. L- 1) and ammonium sulfate (NH4)2SO4 (1 – 12 g. L- 1) had been varied as a source of nitrogen. In order to settled the cellular concentration, sucrose, ethanol, glycerol, acetic acid (g. L-1) and glutathione (g. L- 1), aliquots of each experiment were withdrawn every 12 hours until the end of the fermentation process with 48 hours, carried out the proper of analyzed each metabolites. From the results obtained, a mathematical model had been established, in which, was predicted the behavior of cell growth and the fermentation products yield, with reference the relation by the best conditions for the glutathione formation presented. In addition, the qPCR(Real-time Polymerase Chain Reaction) technique was applied, to evaluate the efficiency of GSH1 and GSH2 genes. The best result had been observed with 24 hours of fermentation 7,61 g.L-1of glutathione formation which, in the experimental concentration condition of 61 g. L-1 of sucrose present in molasses and 6.5 g.L-1 of ammonium sulfate. / A glutationa é um tripeptídeo linear, hidrossolúvel, formado por ácido glutâmico, L-cisteína e glicina sendo obtido através da síntese de consecutivas reações enzimáticas. Possui inúmeras funções metabólicas intracelulares, tendo como principal função evitar a oxidação celular. Estudos recentes indicam que o transtorno da função GSH (glutationa) está comprometido na etiologia de algumas doenças, tais como, cirrose hepática, pulmonares, gastrintestinais, inflamações no pâncreas, diabetes, doenças neurodegenerativas, entre outras. Além disso, a GSH destaca-se na área ambiental como um importante parâmetro biológico, sendo um dos mais importantes indicadores do estresse oxidativo. Tendo em vista estes fatores, o objetivo do presente trabalho é realizar a avaliação da produção de glutationa por Saccharomyces cerevisiae utilizando resíduo agroindustrial. Para melhor determinação da condição de produção de glutationa. Através de um DCCR (Delineamento Composto Central Rotacional) 22
com pontos axiais e quatro pontos centrais, totalizando doze experimentos, foram realizados ensaios fermentativos. Nos doze experimentos realizados em batelada, variaram-se a concentração de sacarose presente no melaço de beterraba (61 – 139 g.L-1) e do sulfato de amônio (NH4)2SO4 (1 – 12 g.L-1) como fonte de nitrogênio. Para a determinação da concentração celular, sacarose, etanol, glicerol, ácido acético (g.L-1) e glutationa (g.L-1) alíquotas de cada experimento foram retirados a cada 12 horas até o fim do processo fermentativo com 48 horas, com o intuito de realizar as devidas análises dos metabólitos. A partir dos resultados gerados, um modelo matemático foi estabelecido, no qual prediz o comportamento do crescimento celular e da formação de produto desta fermentação em relação às melhores condições apresentadas para formação de glutationa. Ademais, foi utilizada a técnica de qPCR (Reação em Cadeia da Polimerase em tempo real) para avaliar a eficiência dos genes GSH1 e GSH2. O melhor resultado foi obtido em 24 horas de fermentação foi a formação de 7,61g.L-1 de glutationa na condição experimental de concentração de 61 g. L-1 de sacarose presente no melaço e 6,5g.L-1 de sulfato de amônio.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tede/8949 |
| Date | 27 August 2018 |
| Creators | Paixão, Julliana Nazareth Vieira da |
| Contributors | Castiglioni, Gabriel Luis, Castiglioni, Gabriel Luis, Rodriguez, Armando Garcia, Suarez, Carlos Alberto Galeano |
| Publisher | Universidade Federal de Goiás, Programa de Pós-graduação em Engenharia Química (IQ), UFG, Brasil, Instituto de Química - IQ (RG) |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG |
| Rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 3481496501158460078, 600, 600, 600, 600, 7826066743741197278, 5695151329734718688, 2075167498588264571 |
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