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Previous issue date: 2013-02-27 / CNPq; EM / As espécies de Aspergillus pertencentes à seção Nigri são caracterizadas pela cor negra da
maioria das colônias. A identificação destas espécies é complexa devido à alta diversidade
genética. As características morfológicas, fisiológicas, bioquímicas, moleculares e
espectrais são ferramentas que podem ser utilizadas na identificação polifásica. Aspergillus
niger é a espécie da seção Nigri mais utilizada na indústria. Dentre as enzimas produzidas
por este fungo podemos citar as poligalacturonases (PG), que possuem aplicação
tecnológica no processamento de alimentos e frutas. Neste trabalho, linhagens de
Aspergillus seção Nigri foram avaliadas por uma abordagem polifásica baseada na análise
morfológica, bioquímica e espectral por Ionização/Dessorção de Matriz Assistida por
Laser Tempo-de-Vôo/Espectrômetro de Massa (MALDI-TOF MS) para sua identificação e
caracterização. Os dados obtidos a partir dessa abordagem indicaram que os resultados do
MALDI-TOF MS corroboraram os dados da taxonomia clássica e análises bioquímicas.
Cerca de 20% e 14% das linhagens de A. niger foram produtoras de ocratoxina A (OTA) e
fumonisina B2 (FB2), respectivamente. As linhagens não micotoxigênicas foram avaliadas
quanto à capacidade de produzir PG, sendo A. niger URM 5162 que apresentou maiores
valores de atividade quando imobilizada em casca de laranja e com o reator operado sem
aeração. Após a produção, as PG foram purificadas pelo sistema de duas fases aquosas
(SDFA) formado por polietilenoglicol e sais de fosfato (PEG/fosfato). A endopoligalacturonase
(endo-PG) e a exo-poligalacturonase (exo-PG) tiveram preferência pela
fase superior do sistema (rica em PEG). Para as duas enzimas, os melhores resultados para
o coeficiente de partição (K=1,23 para endo-PG e 2,40 para exo-PG), rendimento em
atividade (Y=74,04% para endo-PG e 33,33% para exo-PG) e fator de purificação
(FP=8,18 para endo-PG e 1,98 para exo-PG), foram obtidos com 12,5% (m/m) de PEG
8000 (g/mol) e concentração de fosfato de 25% (m/m) a pH 6,0, sendo esta a condição
considerada como a mais adequada para a purificação das PG produzidas
por A. niger URM 5162. A concentração de fosfato e a massa molar do PEG foram as
variáveis independentes que mais influenciaram nos valores de K, Y e FP durante a
purificação da endo- e exo-poligalacturonase, respectivamente. Diante dos resultados
obtidos, observa-se que a utilização de uma abordagem polifásica consistindo de análise
morfológica, bioquímica e proteômica, permite uma identificação mais precisa das
espécies da seção Nigri. Aspergillus niger URM 5162 é a linhagem promissora para
produção de PG, sendo o SDFA uma alternativa interessante e de baixo custo para a
purificação destas enzimas.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/12809 |
| Date | 27 February 2013 |
| Creators | MACIEL, Marília de Holanda Cavalcanti |
| Contributors | MOTTA, Cristina Maria de Souza, MOREIRA, Keila Aparecida, LIMA, Nelson |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Breton |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | An error occurred on the license name., An error occurred getting the license - uri., info:eu-repo/semantics/openAccess |
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