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Previous issue date: 2015-02-27 / FACEPE / A imobilização de lipídios em substratos sólidos tem sido amplamente utilizada no
desenvolvimento de biossensores visando a uma alternativa simples e de baixo custo. Dessa
forma, um ambiente favorável à imobilização de proteínas pode ser criado o que viabiliza a
utilização destas moléculas como elemento de biorreconhecimento molecular. A finalidade
deste estudo consiste em imobilizar a lectina Concanavalina A, em uma plataforma
nanostruturada contendo moléculas fosfolipídicas a fim de identificar glicoproteínas
presentes no soro contaminado com dengue (DENV-1, DENV-2 e DENV-3). A resposta foi
avaliada por técnicas eletroquímica (Espectroscopia de Impedância Eletroquímica [EIE] e
Voltametria Cíclica [VC]) e piezoelétrica (Microbalança de Cristal de Quartzo [QCM]). O
biossensor eletroquímico apresentou maior resposta para DENV-3 (RCT = 180%) em
relação aos DENV-1 (RCT = 60%) e DENV-2 (RCT = 80%). Por outro lado, o biossensor
piezoelétrico identificou de forma qualitativa da presença do DENV. Com o objetivo de
aumentar a especificidade na identificação do DENV, quatro imunossensores eletroquímicos
constituídos por camada auto-organizada de cisteína, nanopartícula de ouro e anticorpo
monoclonal (Anti-DENV-1, Anti-DENV-2, Anti-DENV-3 e Anti-DENV-4) foram desenvolvidos
e avaliados após exposição ao vírus da dengue DENV-1, DENV-2, DENV-3 e DENV-4. Os
imunossensores demonstraram eficácia, linearidade e especificidade para todos os sorotipos
analisados. Além disso, técnicas de microscopia de força atômica e microscopia eletrônica de
varredura caracterizaram satisfatoriamente a imobilização na superfície de todos os
biossensores desenvolvidos. / Immobilization of lipids on solid substrates has been extensively used in the development of
biosensors, aiming a simple and low-cost alternative. Thus, a favorable environment for
immobilization of proteins can be obtained and these molecules can be used as a molecular
element for biorecognition. The purpose of this study is to conduct the immobilization of the
Concanavalin A lectin on a nanostrutured platform containing phospholipid molecules with
the aim of identify serum infected with dengue virus (DENV-1, DENV-2 and DENV- 3). The
response was evaluated by electrochemical technique (Electrochemical Impedance
Spectroscopy [EIS] and Cyclic Voltammetry [CV]) and piezoelectric technique (Quartz
Crystal Microbalance [QCM]). The electrochemical biosensor showed greater response for
DENV-3 (RCT = 180%) compared to DENV-1 (RCT = 60%) and DENV-2 (RCT = 80%).
Moreover, piezoelectric technique identified qualitatively the presence of DENV. In order to
increase the specificity in the identification of DENV, four electrochemical immunosensors
based on self-organized layer of cysteine, gold nanoparticles and monoclonal antibody (Anti-
DENV-1, Anti-DENV-2, Anti-DENV-3 e Anti-DENV-4) were developed and evaluated after
exposure to dengue virus (DENV- 1, DENV-2, DENV-3 and DENV-4). The immunosensors
demonstrated efficacy, linearity and specificity for all serotypes analyzed. In addition, atomic
force microscopy and scanning electron microscopy techniques, satisfactorily characterized
the immobilization on the surface of all developed biosensors.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/16852 |
| Date | 27 February 2015 |
| Creators | LUNA, Débora Máximo das Neves |
| Contributors | ANDRADE, César Augusto Souza de, OLIVEIRA, Maria Danielly Lima de |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco, Programa de Pos Graduacao em Inovacao Terapeutica, UFPE, Brasil |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Breton |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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