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Imobilização de anticorpos em compósito de Polisiloxano-Álcool polivinílico para uso em imunodiagnóstico

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Previous issue date: 2006 / Buscou-se neste trabalho a síntese de um polímero a base de Polisiloxano (POS)-
Glutaraldeído-Álcool polivinílico (PVA), mediante o processo sol-gel, sendo obtidos discos
com diâmetro médio de 4,0 mm2 que foram utilizados como suporte sólido para
imobilização de anticorpos. Inicialmente, através de microscopia eletrônica, foi feita a
caracterização ultra-estrutural dos discos antes e depois das etapas de imobilização, bem
como foram realizados testes da análise química elementar e espectro infravermelho dos
discos. O anticorpo monoclonal anti-Proteína S100 humana foi covalentemente fixada à
rede semi-interpenetrada de POS-PVA e utilizado em ensaios imunoenzimáticos tipo
ELISA para avaliar a capacidade de detecção da proteína S100 contida no soro de
pacientes portadores de adenocarcinoma prostático e indivíduos sadios. Os discos de
POS-PVA fixaram até 92,8% de anticorpo oferecido (7,72 μg de anticorpo/disco). Os
melhores valores de anticorpo anti-Proteína S100 imobilizado e diluição do soro foram 10
μg e 1:400, respectivamente. Foi realizada a leitura da densidade ótica dos imunoensaios
para proteína S100 sérica obtendo-se a partir dos soros dos pacientes com
adenocarcinoma prostático (0,425 ± 0,042) valores significativamente menores (p<0,05)
quando comparados àqueles encontrados nos soros dos indivíduos sadios (1,034 ±
0,124). O anticorpo anti-Galectina-3 também foi imobilizado e avaliada a capacidade de
reconhecer a proteína sérica. Semelhante aos resultados da proetína S100, também
ocorreu um decréscimo significativo no soro de pacientes portadores de câncer de
próstata. Também foi realizado um estudo imunohistoquímico a partir de fragmentos de
tecido prostático utilizando o mesmo anticorpo a fim de comparar os resultados da
expressão tecidual da proteína com aqueles valores séricos obtidos pelo teste ELISA com
os discos de POS-PVA. Pode-se verificar uma nítida diferença entre os níveis teciduais e
sorológicos da Proteína S100, constatando-se que o método sorológico é mais sensível e
menos invasivo para avaliar os níveis desta proteína entre diferentes doenças tumorais da
próstata. Conclui-se então, que a rede semi-interpenetrada de POS-PVA, aliado à sua
fácil síntese e baixo custo, presta-se como modelo de suporte para a imobilização
covalente de anticorpos e a partir disso pode ser utilizado no desenvolvimento de
imunosensores para diferentes tipos de doenças

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/2062
Date January 2006
CreatorsMELO JUNIOR, Mario Ribeiro de
ContributorsCARVALHO JUNIOR, Luiz Bezerra de
PublisherUniversidade Federal de Pernambuco
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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