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Previous issue date: 2016-06-30 / CAPES / O uso de biomarcadores enzimáticos e de genotoxicidade é uma importante ferramenta na avaliação da contaminação ambiental. Esta poluição, que em grande parte tem origem nas atividades humanas, é liberada no ambiente tendo como destino final, preferencialmente, os corpos d’água. No estuário Canal de Santa de Cruz a expansão das atividades industriais e turísticas , além do elevado crescimento populacional humano e sobrepesca, colocam em risco o delicado sistema ecológico deste local. Neste contexto, o uso do molusco bivalve Crassostrea sp. como bioindicador torna-se uma ferramenta útil e eficaz para diagnosticar os efeitos dos impactos antropogênicos nesse ambiente. Portanto, a presente tese avaliou a atividade de biomarcadores enzimáticos (AChE, BChE, CAT, SOD, amilase, pepsina, tripsina, quimotripsina) e não enzimáticos, GSSG, GSH, Malonaldeído em brânquias, vísceras e músculo adutor da ostra do mangue Crassostrea sp., e o ensaio de Genotoxicidade e mutagenicidade (ensaio cometa e MN) em hemócitos de ostras capturadas durante o período seco e chuvoso em três locais do Canal de Santa de Cruz (vila velha Itamaracá – PE); e em uma região referência (Depuradora/controle) em Penedo, AL. O impacto genotóxico foi confirmado pela detecção de microlesões no DNA por meio do ensaio cometa, e pela alta frequência de macrolesões (MN) nos hemócitos em relação as ostras controle. Diferenças significativas (p<0,05) entre ostras coletadas sazonalmente no estuário, e entre estas ostras e ostras controle, foram observadas nas frequências de MN nas coletas do período seco e chuvoso; no Índice de dano no período seco e na frequência de danos no período chuvoso para um ponto de coleta. No presente trabalho, a AChE presente em vísceras e brânquias de Crassostrea sp. foi caracterizada físico-química e cineticamente e foi exposta a pesticidas organofosforados, carbamatos e a íons. Todos os pesticidas usados mostraram efeito inibitório na atividade da AChE apresentando decréscimo significativo. Foi verificado a influência de alguns íons sobre a atividade da AChE nos dois tecidos estudados. A atividade da AChE e BChE de brânquias, vísceras e musculo adutor de ostra coletadas no estuário no período seco e chuvoso, foi significativamente (p<0,05) menor que as ostras depuradas. No presente estudo foram observadas diferenças sazonais significativas (p<0,05) e respostas sinérgicas para AChE e BChE, e nos demais biomarcadores (enzimático, não enzimático e genético) avaliados nos três tecidos da ostra. Analisados em conjunto, os dados obtidos apontam para respostas de biomarcadores em ostras, indicando que esses organismos apresentaram indícios de neurotoxicidade ou de danos causados por estresse oxidativo a macromoléculas. Eles também apontam para a importância de considerar a sazonalidade, os parâmetros físico-químicos, microbiológicos e como esses fatores influenciam nas respostas de biomarcadores em programas de monitoramento de contaminação ambiental. Considerando que a influência dos fatores ambientais, dos fatores endógenos e da biodisponibilidade de metais traço sobre os mecanismos bioquímicos que modulam a atividade desses biomarcadores é ainda pouco conhecida, a necessidade de estudos sobre estes parâmetros é enfatizada. Desta forma, as oscilações na atividade das enzimas analisadas ao longo do experimento nos três pontos do Canal de Santa Cruz poderiam ser interpretadas dentro de um contexto molecular integrado, visando não só compreender a inter-relação destes parâmetros e as necessidades de osmoconformação dos animais, como também otimizar o uso de biomarcadores nesta espécie de molusco. / The use of enzymatic biomarkers and genotoxicity is an important tool in the evaluation of environmental contamination. This pollution, which largely originates in human activities, is released into the environment with the final destination, preferably, bodies of water. In the estuary Canal de Santa Cruz, the expansion of industrial and tourist activities, besides the high human population growth and overfishing, put at risk the delicate ecological system of this place. In this context, the use of the bivalve mollusk Crassostrea sp. as a bioindicator becomes a useful and effective tool to diagnose the effects of anthropogenic impacts in this environment. Therefore, this thesis evaluated the activity of enzyme biomarkers (AChE, BChE, CAT, SOD, amylase, pepsin, trypsin, chymotrypsin) and non-enzymatic, GSSG, GSH, malondialdehyde in gills, adductor muscle and viscera of the mangrove oyster Crassostrea sp.. Test of genotoxicity and mutagenicity (comet assay and MN) in hemocytes of oysters taken during the dry and rainy season in three locations in the Canal Santa Cruz (Vila Velha Itamaracá - PE); and a reference region (purifying / control) in Penedo, AL. The genotoxic impact was confirmed by microinjuries detection in DNA through the comet assay, and high frequency macrolesões (MN) in hemocytes in relation oysters control. Significant differences (p <0.05) and seasonal oysters from the estuary and oysters control, were observed in the frequency of MN in the collections of the dry and rainy season; the damage index in the dry period and frequency of damage in the rainy season to a collection point. In this study, the AChE present guts and gills of Crassostrea sp. was characterized physico-chemical and kinetically and was exposed to organophosphorus pesticides, carbamates and ions. All pesticides used showed inhibitory effect on AChE activity presenting significant decrease. It was verified the influence of some ions on the activity of AChE in both tissues studied. The activity of AChE and BChE gills, guts and muscle adductor oyster collected in the estuary in the dry and rainy season was significantly (p <0.05) lower than the refined oysters. In the present study, we observed significant seasonal differences (p <0.05) and synergistic responses to AChE and BChE, and other biomarkers (enzymatic, non-enzymatic and genetic) evaluated the three oyster tissues. Taken together, the data point to biomarker responses in oysters, indicating that these bodies showed evidence of neurotoxicity or damage caused by oxidative stress to macromolecules. They also point to the importance of considering the seasonality, the physico-chemical parameters, microbiological and how these factors influence the responses of biomarkers in environmental pollution monitoring programs. Whereas the influence of environmental factors, endogenous factors and bioavailability of trace metals on the biochemical mechanisms that modulate the activity of these biomarkers is still unknown, the need for studies on these parameters is emphasized. Thus, fluctuations in the activity of the enzymes analyzed during the experiment in the Santa Cruz Channel could be interpreted within an integrated molecular context, aiming not only to understand the inter-relationship between these parameters and osmoconformação needs of animals, as well as optimize biomarkers this mollusc species.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/25953 |
| Date | 30 June 2016 |
| Creators | SOUZA, Kelma Sirleide de |
| Contributors | http://lattes.cnpq.br/2205151409139871, BEZERRA, Ranilson de Souza, ASSIS, Caio Rodrigo Dias de |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco, Programa de Pos Graduacao em Ciencias Biologicas, UFPE, Brasil |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/embargoedAccess |
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