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Aplicação de técnica molecular no desenvolvimento de teste para diagnóstico de tuberculose paucibacilar e na caracterização gonotípica do Mycobacterium tuberculosis

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Previous issue date: 2003 / A Tuberculose (TB) é uma patologia cujo diagnóstico precoce e tratamento
adequado são essenciais para a eficácia dos programas públicos de controle da doença,
os quais buscam curar os doentes e evitar a transmissão da doença. O diagnóstico
laboratorial envolve a baciloscopia realizada com auxílio da coloração de Ziehl-
Neelsen, uma metodologia rápida, barata e acessível, com uma sensibilidade de 104
bacilos/ml e a cultura que é mais sensível mas cujo resultado pode demorar entre 9 a 45
dias. Para o diagnóstico de tuberculose espera-se que as técnicas de amplificação
genéticas melhorem a velocidade, sensibilidade e especificidade para a detecção de
micobactérias. Neste sentido foram objetos deste estudo o desenvolvimento de uma
técnica molecular para diagnóstico de tuberculose paucibacilar e a caracterização
genotípica de isolados de Mycobacterium tuberculosis (M.tb). Uma reação de
heminested PCR voltada para o diagnóstico de tuberculose e utilizando como alvo, o
marcador genético IS6110, foi elaborada a partir de criteriosa escolha de primers e
condicões ideais de concentração dos primers e cloreto de magnésio e de temperaturas
de anelamento. A sensibilidade da técnica foi de 30 fg e pode ser concluída em até 3
dias após a coleta de amostras biológicas para análise. Comparada com a PCR
convencional, a heminested PCR aumenta a sensibilidade e especificidade, o que é
importante, especialmente nas amostras biológicas paucibacilares. Os resultados da
caracterização genotípica de 61 isolamentos de M.tb obtidos durante os anos de 2000 a
2002, possibilitaram através da técnica do Double Repetitive Elements-PCR (DREPCR)
identificar cinco grupos de pacientes, designados I, II, III, IV e V com 4, 3, 6, 2 e
2 pacientes respectivamente, portadores de cepas com 100% de similaridade e
apresentando respectivamente 5, 5, 1, 2 e 5 bandas na eletroforese em gel de agarose.
As cepas com mesmo perfil de resistência a drogas apresentaram perfis genéticos
distintos, exceto três do grupo I. A melhor correlação epidemiológica dos grupos foi a
apresentada pelo grupo I. Três membros são da mesma familía, todos portadores de
cepas resistentes a isoniazida e rifampicina. São três mulheres com diagnóstico de
diabetes mellitus . O primeiro caso diagnosticado de TB nessas pacientes foi em 1999
e o segundo em 2000. O terceiro caso foi diagnosticado na filha desta última em 2002.
O impacto da genotipagem nestes casos, foi a análise da dinâmica de transmissão e a
imediata utilização de esquema terapêutico adequado para a filha, já que era conhecida a
Artur Henrique Bach Diagnóstico e Genotipagem de M.tuberculosis
resistência aos antimicrobianos de primeira escolha utilizados para o tratamento das
outras duas pacientes

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/6330
Date January 2003
CreatorsHenrique Bach, Artur
ContributorsLucena Cavalcanti Licínio da Silva, Norma
PublisherUniversidade Federal de Pernambuco
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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