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Previous issue date: 2006 / Hemorragia é uma patologia que ocorre devido à anormalidade das funções dos fatores da
coagulação, do endotélio dos vasos sanguíneos e/ou das plaquetas. Enzimas da peçonha
dos Viperídeos, designadas hemorraginas, toxinas hemorrágicas ou ainda fatores
hemorrágicos são as principais responsáveis pelo quadro hemorrágico (local e sistêmico)
apresentado nos acidentes por viperídeos. A espécie Bothrops leucurus é uma das mais
importantes serpentes peçonhentas do Nordeste do Brasil. Neste trabalho foi realizada a
purificação e caracterização parcial de duas toxinas hemorrágicas da peçonha de Bothrops
leucurus. As hemorraginas Bleu-H1 e Bleu-H2 foram purificadas através de três passos
cromatográficos: troca iônica de 600 mg da peçonha de B. leucurus, dividida em quatro
alíquotas, em coluna de Mono Q (10 x 100 mm), seguida de gel em filtração TSK G-3000
(7,5 mm x 60 cm) e recromatografia em coluna de Mono Q (5 x 50 mm), obtendo
rendimento de 0,1% para cada toxina. Os resultados do dot-blot indicam que ambas
hemorraginas são metaloproteases. De acordo com os resultados da SDS-PAGE em
condições redutoras, Bleu H1 é constituída de pelo menos seis cadeias (66, 63, 38, 28, 19 e
17 KDa), enquanto Bleu H2 revelou cinco cadeias (63, 41, 38, 28, 18, 16 kDa), sugerindo
que as hemorraginas Bleu H1 e Bleu-H2 apresentem massas moleculares superiores a 278
KDa e 207 KDa, respectivamente. A SDS-PAGE sem a presença de agente redutor
confirmou a homogeneidade de Bleu-H1. A Dose Mínima Hemorrágica (DMH) da
peçonha de B. leucurus foi 1,96 μg, e a de Bleu H1 e de Bleu H2 foram 1,23 μg e 1,42 μg,
respectivamente. Bleu H1 e Bleu H2 apresentaram atividade ativadora de fator X, e
capacidade de hidrolisar os substratos cromogênicos S-2222 e S-2238, sendo Bleu-H2
consideravelmente mais ativa do que Bleu-H1. Em conclusão, duas metaloproteinases
ácidas da classe P-IV, com baixa atividade hemorrágica, alta atividade ativadora de fator X e capacidade de hidrolisar os substratos cromogênicos S-2222 e S-2238, denominadas Bleu-
H1 e Bleu-H2, foram purificadas da peçonha de Bothrops leucurus
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/707 |
| Date | January 2006 |
| Creators | Mendes Correia, Juliana |
| Contributors | Roberto Botelho de Souza, José |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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