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Previous issue date: 2011-07-29 / Nanobiotechnology has provided new scientific and technological knowledge in
distinct areas making it a priority area of research in developed and developing
countries. The sperm-mediated gene transfer (SMGT) technique may become more
simple, efficient and cost-effective technique for the generation of transgenic animals.
The development of nanocomposites able to carry foreign DNA into the nucleus of
cells with greater efficiency allows techniques such as SMGT be improved. The
NanoSMGT is a technique used to generate transgenic animals in which
nanotechnology is used to enhance the ability of sperm to capture exogenous DNA.
The objective of this study was to determine whether cationic nanopolymer or
halloysite clay nanotubes are able to transfect the exogenous DNA to unsorted and
sex-sorted bovine sperm then evaluate whether these sperm are able to transmit
transgene to in vitro fertilized bovine embryos. Using real-time PCR, we found that
the cationic nanopolymer is capable of introducing exogenous DNA into unsorted and
sex-sorted bovine sperm without negative effects to sperm motility and viability. Was
also demonstrated for the first time that cationic nanopolymer or halloysite clay
nanotubes are able to increase both the sperm DNA transfection of as the
transmission of the transgene to bovine embryos produced in vitro. These results
demonstrate that NanoSMGT can be a viable technique for producing transgenic
bovine embryos. / A nanobiotecnologia tem proporcionado novos avanços científicos e tecnológicos em
diversas áreas do conhecimento tornando-se assim área de pesquisa prioritária em
países desenvolvidos e em desenvolvimento. A transferência gênica mediada por
espermatozóides (SMGT) poderá se tornar a técnica mais simples, eficiente e com
melhor custo-benefício para a geração de animais transgênicos. O desenvolvimento
de nanocompósitos capazes de carrear o DNA exógeno para o interior de células
com maior eficiência permite que técnicas como a SMGT sejam aperfeiçoadas. A
NanoSMGT é uma técnica utilizada para a geração de animais transgênicos onde a
nanotecnologia é utilizada para incrementar a habilidade dos espermatozóides em
capurar o DNA exógeno. O objetivo do presente trabalho foi de verificar se
nanopolímero catiônico ou nanotubos de haloisita são capazes de transfectar o DNA
exógeno para o interior de espermatozóides bovinos sexados e não sexados e em
seguida verificar se estes espermatozóides transfectados são capazes de gerar
embriões bovinos transgênicos. Utilizando PCR em tempo real, verificou-se que o
nanopolímero catiônico é capaz de introduzir o DNA exógeno em espermatozóides
bovinos sexados e não sexados sem danos para a motilidade e viabilidade
espermática. Também foi demonstrado pela primeira vez que o nanopolímero
catiônico ou os nanotubos de haloisita são capazes de incrementar tanto a
transfecção de DNA em espermatozóides como a transmissão do transgene para
embriões bovinos produzidos in vitro. Estes resultados demonstram que a
NanoSMGT pode ser uma técnica viável para a produção de embriões bovinos
transgênicos.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpel.edu.br:123456789/1295 |
| Date | 29 July 2011 |
| Creators | Campos, Vinicius Farias |
| Contributors | CPF:92045715000, Collares, Tiago Veiras |
| Publisher | Universidade Federal de Pelotas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, UFPel, BR, Biotecnologia |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPEL, instname:Universidade Federal de Pelotas, instacron:UFPEL |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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