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Previous issue date: 2011-06-27 / he main objective of this work was to introduce the gene bvlI with confirmed potential
antifungal of lectin from Bauhinia variegata, Apple Tree (Malus domestica Borkh) cv.
Gala, to establish resistance to fungus Coletotrichum gloeosporioides, causing Leaf
Spot. Multiplication experiments were performed in vitro regeneration of leaf explant
culture and two protocols via Agrobacterium tumefaciens transformation aimed at
inserting the gene bvll. The multiplication of shoots the medium that has best results was
MS supplemented with 0.1 mg L-1 ANA and 8.3 mg L-1 2iP and, for the regeneration of
the best responses were obtained with using MS, supplemented with 30 g L-1 sorbitol,
0.5 mg L-1 ANA and 5 mg L-1 TDZ, reaching a rate of 94.5% of regenerations. As
regards the processing protocols, which showed best results was the P1 Protocol, which
through analysis of PCR were obtained 15% shoots containing the gene bv/l. However,
the expression of BVLI protein was not detected by Dot Blot, indicating the need for
further procedure, such as refinement of protein extraction protocol, as well as utilization
other techniques of analyses, such as Real Time. / O objetivo principal do presente trabalho foi introduzir o gene bvlI com potencial
antifúngíco confirmado da lectina de Bauhinia variegata, em macieira (Malus domestica
Borkh), cv. Gala, para estabelecer resistência ao fungo Coletotrichum gloeosporioides,
causador da Mancha Foliar. Foram realizados experimentos de multiplicação in vitro,
regeneração de explantes foliares e, dois protocolos de transformação via
Agrobacterium tumefaciens visando a inserção do gene bvll. Na multiplicação de
brotações o meio que apresentou melhores resultados foi o MS suplementado com 0,1
mg L-1 ANA e 8,3 mg L-1 de 2iP e, para a regeneração as melhores respostas foram
obtidas com meio MS, suplementado com 30 g L-1 de sorbitol, 0,5 mg L-1 ANA e 5 mg L1
de TDZ, atingindo um percentual de 94,5% de regenerações. Quanto aos protocolos
de transformação, o que apresentou melhores resultados foi o protocolo P1, no qual
através da análise de PCR foram obtidas 15% de brotações contendo o gene bv/l. No
entanto, a expressão da proteína BVLI não foi detectada através de Dot Blot, indicando
a necessidade de novos procedimentos, como refinamento do protocolo de extração de
proteínas, bem como utulização de outras técnicas de análises, como Real Time.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpel.edu.br:123456789/1298 |
| Date | 27 June 2011 |
| Creators | Costa, Raquel Rosa da |
| Contributors | CPF:12375918953, http://lattes.cnpq.br/0540625238777673, Peters, José Antonio |
| Publisher | Universidade Federal de Pelotas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, UFPel, BR, Biotecnologia |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPEL, instname:Universidade Federal de Pelotas, instacron:UFPEL |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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