Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-10-17T03:22:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2017 / O diagnóstico das neoplasias de células linfoides B maduras (NCLBM) é baseado nos exames histopatológicos, imunofenotípicos, citogenéticos e moleculares. Atualmente, a imunofenotipagem por citometria de fluxo é considerada uma ferramenta fundamental para o diagnóstico dessas neoplasias e existe uma tendência de tentar alcançar a subclassificação correta das NCLBM com apenas a avaliação do imunofenótipo. No entanto, devido à sobreposição fenotípica, esse propósito não pode ser atingido em todos os casos. Assim, o objetivo do presente estudo foi investigar a importância dos novos marcadores imunofenotípicos CD150 e CD307a para o diagnóstico diferencial das NCLBM. Por conseguinte, foi avaliada a expressão de ambos antígenos por meio da citometria de fluxo em 120 amostras de pacientes portadores de NCLBM. As amostras foram marcadas com o painel anticorpos monoclonais pela técnica de marcação direta e a expressão de CD150 e CD307a foi avaliada por meio da intensidade de fluorescência média (IFM) nas células B neoplásicas e qualitativamente por meio da comparação com o controle negativo interno. Os resultados mostram que existe uma expressão diferencial do antígeno CD150 entre os casos de linfoma de Burkitt (LB) e as neoplasias de células B precursoras, portanto, a expressão de CD150 parece ser útil na identificação dos casos de LB com características fenotípicas de precursor B. A forte expressão de CD150 nos dois casos de linfoma folicular (LF) grau 3A avaliados sugerem que esse marcador é importante para o diagnóstico diferencial desse subtipo de NCLBM e o LF de baixo grau. A perda da expressão de CD150 observada nos plasmócitos clonais dos linfomas com diferenciação plasmocitária (LDP), representa um achado inédito e a única alteração fenotípica observada em todos casos de LDP estudados. Foi observado que todos os casos de linfoma de células do manto (LCM) apresentaram diminuição da expressão de CD307a em relação aos linfócitos B normais. Em contrapartida, a expressão desse marcador no grupo das leucemias linfoides crônicas (LLC) foi heterogênea com casos totalmente negativos até casos com expressão forte e maior à observada nos linfócitos B normais. Assim, pode ser inferido que a expressão moderada e forte desse marcador poderia excluir o diagnóstico de LCM. Foi corroborado que tanto o marcador CD150 quanto o CD307a apresentam menor expressão nos casos de LLC com marcadores prognósticos desfavoráveis. Em vista dos resultados obtidos, a inclusão desses marcadores no painel imunofenotípico de rotina pode contribuir com o aprimoramento da imunofenotipagem por citometria de fluxo para o diagnóstico diferencial das NCLBM.<br> / Abstract : Diagnosis of mature B cell neoplasms (MBCN) is based on results yielded by histopathological, immunophenotypic, cytogenetic and molecular analysis. Consequently, flow cytometric immunophenotyping is deemed fundamental as a tool for B cell neoplasms diagnosis. Given the advantages this methodology provides, there exists a tendency to attempt to fully subclassify MBCN solely on the basis of flow cytometric immunophenotyping results. However, due to the existence of overlapping phenotypes this aim is not achieved in every single case. Because of that, the goal of the present study was to investigate on the importance of novel immunophenotypic markers CD150 and CD307a in the differential diagnosis of the MBCN. To accomplish that, the expression of both antigens was analyzed in 120 samples taken from patients diagnosed with MBCN. Samples were assessed with a panel of monoclonal antibodies using a direct staining protocol and the CD150 and CD307a expression was quantitated by calculating the mean fluorescence intensity (MFI) for neoplastic B cell in each case, and was also ascertained in qualitative terms in comparison with internal negative control. A differential expression of CD150 has been proven to exist between Burkitt lymphoma (BL) and precursor B cell neoplasms cases; therefore, the expression of CD150 might identify BL patients with phenotypic features of B cell precursors. Both follicular lymphoma (FL) grade 3A cases studied showed high homogenic levels of that marker, which becomes relevant in differential diagnosis of that entity with low grade FL. Neoplastic plasma cells of B cell lymphomas with plasmacytic differentiation (LPD) showed a loss of expression of CD150 when compared to normal polyclonal plasma cells. Such decrease was the only phenotypic aberration observed in every LPD sample evaluated. It was also ascertained that every mantle cell lymphoma (MCL) case showed lower levels of CD307a in comparison to normal B cell population. Differently, a spectrum of CD307a expression, from negative to bright, was seen in chronic lymphocytic leukemia (CLL). Thus, moderate and bright CD307a expression virtually excludes MCL diagnosis. A lower expression of both markers in CLL patients with unfavorable prognosis was confirmed in this study. In conclusion, these results suggest that the inclusion of both markers in an immunophenotypic panel could improve the differential diagnosis of MBCN by flow cytometry.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufsc.br:123456789/180239 |
| Date | January 2017 |
| Creators | Auat, Mariángeles |
| Contributors | Universidade Federal de Santa Catarina, Silva, Maria Cláudia Santos da |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | 119 p.| il., gráfs., tabs. |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFSC, instname:Universidade Federal de Santa Catarina, instacron:UFSC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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