Streptokinase is clinically used as a thrombolytic agent for the treatment of patients with
acute myocardial infarction and venous and arterial thrombosis. In the present work, a substrate
chromogenic assay was validated for the potency evaluation of biopharmaceutical formulations.
Method validation investigated parameters such as the linearity (r²=0.9988) intra- and inter- day
precision, accuracy and robustness; the method yielded good results with a quantitation limit of
2.50 IU/mL and a detection limit of 1.10 IU/mL. The biological assay was carried out by
chromogenic end point giving potencies between 98.42% and 108.97%. The results demonstrated
the validity of the chromogenic assay for the potency assessment of streptokinase in
biopharmaceutical formulations. Besides, the activities of streptodornase and streptolysin were
evaluated in the same samples by optimized assays based on the biological activity, giving results
according to the Pharmacopoeial specifications. The combination of assays is necessary to assure
the quality, and to improve the methods that can be applied for the characterization of
streptokinase, by ensuring batch-to-batch consistency of the bulk and finished biopharmaceutical
products. / A estreptoquinase é clinicamente utilizada como agente trombolítico para o tratamento de
pacientes com infarto agudo do miocárdio e trombose arterial e venosa. Neste trabalho, validouse
o ensaio com substrato cromogênico para a determinação de potência de formulações
biofarmacêuticas. O método foi validado, avaliando-se os parâmetros de linearidade (r² =
0,9988), precisão intra e inter-dias, exatidão e robustez; o método mostrou resultados adequados,
os quais cumpriram os requisitos preconizados, com limite de quantificação de 2,50 UI/mL e
limite de detecção de 1,10 UI/mL. O ensaio biológico foi realizado pelo método de ponto final
cromogênico, fornecendo potências entre 98,42% e 108,97%. Os resultados demonstraram a
validade do ensaio cromogênico para a determinação de potência de estreptoquinase nas
formulações biofarmacêuticas. Além disto, as atividades de estreptodornase e estreptolisina
foram avaliadas nas mesmas amostras, por métodos otimizados baseados na atividade biológica,
dando resultados de acordo com as especificações farmacopeicas. A combinação de ensaios é
necessária para assegurar a qualidade e aprimorar os métodos que podem ser aplicados para a
caracterização de estreptoquinase, assegurando a consistência entre lotes de soluções
concentradas e de produtos biofarmacêuticos acabados.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufsm.br:1/5815 |
| Date | 26 July 2013 |
| Creators | Camponogara, Raphael Leite |
| Contributors | Dalmora, Sergio Luiz, Nogueira, Daniele Rubert, Silva, Jose Edson Paz da |
| Publisher | Universidade Federal de Santa Maria, Programa de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia Farmacêuticas, UFSM, BR, Farmacologia |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFSM, instname:Universidade Federal de Santa Maria, instacron:UFSM |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 201000000000, 400, 300, 300, 300, 300, c5c3d2e7-af0f-4f36-b006-046daf37340a, b35f9676-cf14-43e3-8d7d-c3a82090450a, 879d8b2c-23a2-464e-b730-c9259057bcc8, a60513ce-67a1-4332-a0ea-3f5599b7ceb4 |
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