ASSIS, Lívia Coelho de. Avaliação da atividade cicatrizante do extrato etanólico e do Triterpeno 3, 6 , 16 Trihydroxylup-20 (29) - Eno provenientes de folhas de Combretum leprosum mart. no tratamento de lesões cutâneas induzidas em camundongos. 2015. 65 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-11-19T13:30:46Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_lcassis.pdf: 1077040 bytes, checksum: 0250c79249643f6ebf1a715508586500 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-11-19T13:33:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_lcassis.pdf: 1077040 bytes, checksum: 0250c79249643f6ebf1a715508586500 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-19T13:33:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_lcassis.pdf: 1077040 bytes, checksum: 0250c79249643f6ebf1a715508586500 (MD5) Previous issue date: 2015 / Wound healing is a complex and dynamic process involving an integrated action of several cell types, extracellular matrix and soluble mediators such as cytokines, which serve to recover the integrity of damaged anatomical structure. Natural products are the basis for many biotechnological inputs, as they are biologically active compounds with great potential for therapeutics and can provide molecular basis for many drugs in the clinics. Combretum leprosum Mart. is a native species of Caatinga, important biome in the Brazilian semiarid region, being popularly used in Brazil for the treatment of many diseases such as skin diseases. This study aimed to investigate the pro-healing potential of the ethanol extract (EECL) and the bioactive triterpene 3β, 6 β, 16 β-trihydroxylup-20 (29) ene (CLF-1) isolated from leaves of C. leprosum. Cell migration assay was performed using fibroblasts, which were treated with CLF-1 (1.75 µg / ml and 2.5 µg / ml) and analyzed after 0, 6 and 24 hours. Skin wounds (1 cm2) were induced in the dorsal region of mice (n = 30) and were treated with daily topical application (100µl) according to the group: saline, EECL (100μg / ml) and CLF-1 (100μg / ml) for 12 days. The results showed that CLF-1 did not show toxicity to fibroblasts and further increased cell proliferation and migration so that a significant increase on injury closing percentage was observed using both concentrations (1.75 mg / ml vs 2.5 mg / mL,) compared to control (p <0.05). Within 24 hours, there was also a significant increase in the rate of migration comparing CLF-1 at 2.5 ug / ml and control group (p<0.05). For the in vivo analysis, on the 2nd post surgical day (PS), the lesions treated with EECL and CLF-1 showed moderate presence of vessels in granulation tissue progressing to the dermis, as well as a slight inflammatory infiltrate. It was also observed that, on the 7th PS day, the animals treated with CLF-1 showed moderate angiogenesis, whereas animals treated with saline showed cell proliferation and migration into the wound. Furthermore, on the 12th day PS, the animals treated with EECL and CLF-1 showed complete closing of the injury, while those receiving saline exhibited open wounds. Thus, it was concluded that EECL and CLF-1 showed pro-healing effects, as well as a possible anti-inflammatory action and additional research is needed to elucidate its mechanisms in the wound healing process. / A cicatrização cutânea é um processo complexo e dinâmico que envolve uma ação integrada de vários tipos celulares, matriz extracelular e mediadores solúveis como citocinas, que tem por finalidade a recuperação da integridade da estrutura anatômica danificada. Produtos naturais são a base para diversos insumos biotecnológicos, pois são compostos biologicamente ativos com grande potencial terapêutico, e que podem formar bases moleculares para muitas drogas em uso clínico. Combretum leprosum Mart. é uma espécie nativa da Caatinga, bioma importante na região do semiárido brasileiro, sendo esta espécie popularmente utilizada no Brasil para o tratamento de diversas doenças, tais como doenças de pele. O presente estudo investigou o potencial pró-cicatrizante do extrato etanólico (EECL) e do triterpeno bioativo 3β, 6 β, 16 β-trihydroxylup-20 (29)-eno (CLF-1) isolado das folhas de C. leprosum. Para isto, o ensaio de migração de células foi realizado com fibroblastos, que foram pós tratados com CLF-1 (1,75 μg/mL e 2,5 μg/mL) e analisados em 0, 6 e 24 horas. Feridas cutâneas (1 cm2) foram realizadas na zona dorsal de camundongos (n=30) e em seguida foram tratadas com uma aplicação tópica diária (100 μl) de acordo com o grupo: salina, EECL (100μg/mL) e CLF-1 (100μg/mL) durante 12 dias. Os resultados demonstraram que CLF-1 não apresentou toxicidade aos fibroblastos e, ainda, em 6 horas estimulou a proliferação e migração celular, de modo que observou-se um aumento significativo na porcentagem de fechamento em ambas concentrações (1,75 μg/mL e 2,5 μg/mL) em relação ao controle (p<0,05). Em 24 horas, verificou-se também aumento significativo na taxa fechamento quando comparado CLF-1 2,5 μg/mL em relação ao controle (p<0,05). Na avaliação in vivo, observou-se no 2° dia pós cirúrgico (P.C.), que as lesões tratadas com EECL e CLF-1 mostraram presença moderada de vasos no tecido de granulação, progredindo na derme, bem como apresentaram um leve infiltrado inflamatório. Observou-se, ainda, que no 7° dia P.C. os animais tratados com CLF-1 demonstraram moderada angiogênese, enquanto que os animais tratados com salina apresentaram proliferação e migração celular em direção ao leito da ferida. Ademais, no 12° dia P.C., os animais tratados com EECL e CLF-1 apresentaram o fechamento completo da lesão, enquanto os que receberam salina, apresentaram, ainda, feridas abertas. Desta forma, foi possível concluir que o EECL e o CLF-1 apresentaram efeitos pró-cicatrizante, bem como uma possível ação anti-inflamatória e investigações adicionais são necessárias para elucidar o mecanismo de ação no processo de cicatrização cutânea.

FLORÊNCIO, K. G. D. Piericidina A1 de Streptomyces SP. recuperada de sedimento do arquipélago Fernando de Noronha altera fenótipo de células tumorais. 2017. 100 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-14T15:52:00Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_kgdflorencio.pdf: 2180779 bytes, checksum: 81aa72b2692c21ed2525d3bbcdec95ec (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-14T15:52:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_kgdflorencio.pdf: 2180779 bytes, checksum: 81aa72b2692c21ed2525d3bbcdec95ec (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-14T15:52:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_kgdflorencio.pdf: 2180779 bytes, checksum: 81aa72b2692c21ed2525d3bbcdec95ec (MD5) Previous issue date: 2017-01-30 / Cancer is a major health problem and presents great biological complexity, making it extremely difficult to develop effective therapeutic strategies to treatment of the disease, especially in advanced stages. Natural products play an important role in pharmacology because of the notorious contribution to the development of drugs as pharmacological tools. The marine sediment is a profitable source of microorganisms that produce secondary metabolites with biomedical properties, and the actinomycetes, Gram-positive bacteria, are excellent producers of compounds with diverse biological activities. In this work, the pharmacological potential of the microbiota recovered from the marine sediment collected in Fernando de Noronha Archipelago was investigated in tumor cells in culture. Sixteen actinomycete lineages were isolated, 7 of which yielded cytotoxic crude extracts (inhibition of growth > 75%) in human colorectal cancer cells HCT-116. The mean inhibitory concentration (IC50) values of the crude extracts varied from 0.06 to 10g/mL. The BRA-399 strain, identified as Streptomyces sp., presented the highest potency (IC50 = 0.06g/mL) and was selected to proceed with the purification of the active principle and characterization of the biological effect in tumor cells. Through a bioguided chemical fractionation, Piericidin A1 (PA1) was isolated, and other molecules of the same class were identified. The cytotoxicity of PA1 was then investigated in 2 tumoral lineages, HCT-116 and in murine metastatic melanoma (B16-F10). The MTT, SRB, cell count and membrane integrity by cytometry assays were performed with both cell lines to obtain a cell proliferation inhibition profile caused by PA1 at 24, 48 and 72h. The results showed cell proliferation inhibition in both lineages at the highest tested concentrations (between 3.8nM and 12M). Lower concentrations (0.1 to 24pM) inhibited proliferation in HCT-116 cells, but not in B16-F10 cells. Despite the unique potency, cells had the membrane integrity preserved at almost all concentrations, except the greater, 12M. PA1 blocks the complex I of the electron transport chain, and the change in the energy metabolism is a hallmark of tumor cells involved in tumor agressiveness. From these observations, some experiments were carried out to evaluate the influence of PA1 on the agressiveness of tumor cells (HCT-116 and B16-F10) in the concentration of 500fM. Cells pretreated with PA1 showed an increase in IC50 compared to treatment with the chemotherapeutic doxorubicin. Treatment with PA1 also increased the cell migration rate in B16-F10, as well as induced morphological alterations compatible with greater migratory activity cells, reinforcing the hypothesis that the alteration caused by PA1 in the tumor cell metabolism may induce alteration in their phenotype. / O câncer é um grande problema de saúde e apresenta grande complexidade biológica, tornando extremamente difícil o desenvolvimento de estratégias terapêuticas eficazes para tratamento da doença sobretudo em estados avançados. Os produtos naturais desempenham um papel relevante na farmacologia pela notória contribuição para desenvolvimento de fármacos como de ferramentas farmacológicas. O sedimento marinho é uma fonte profícua de microrganismos produtores de metabólitos secundários com propriedades biomédicas e os actinomicetos, bactérias Gram-positivas, são excelentes produtores de compostos com diversas atividades biológicas. Neste trabalho, o potencial farmacológico da microbiota recuperada do sedimento marinho coletado no Arquipélago Fernando de Noronha foi investigado em células tumorais em cultura. Dezesseis linhagens de actinomicetos foram isoladas, sendo que 7 renderam extratos brutos (EB) citotóxicos (inibição do crescimento > 75%) em células de câncer colorretal humano HCT-116. Os valores de concentração inibitória média (CI50) dos EBs variaram de 0,06 a 10 µg/mL. A linhagem BRA-399, identificada como Streptomyces sp., apresentou a maior potência (CI50 = 0,06 µg/mL) e foi selecionada para prosseguir com a purificação do princípio ativo e caracterização do efeito biológico em células tumorais. Através de um fracionamento químico bioguiado com diferentes polaridades, isolou-se a Piericidina A1 (PA1), e outras moléculas da mesma classe foram identificadas. A citotoxicidade da PA1 foi então investigada em 2 linhagens tumorais, HCT-116 e em melanoma metastático murino (B16-F10). Os ensaios do MTT, do SRB e de contagem de células e integridade de membrana por citometria foram realizados com ambas linhagens celulares para se obter um perfil de inibição da proliferação celular causado pela PA1 após 24, 48 e 72h. Os resultados mostraram inibição da proliferação celular em ambas linhagens nas concentrações mais altas testadas (entre 3,8 nM e 12 µM). Nas concentrações mais baixas (entre 0,1 aM e 24 pM) houve inibição da proliferação na linhagem HCT-116, mas não em B16-F10. Apesar da potência singular, as células tinham a integridade da membrana preservada em quase todas as concentrações, exceto a maior de 12 µM. A PA1 é um bloqueador do complexo I da cadeia transportadora de elétrons e a alteração do metabolismo energético é uma característica das células tumorais envolvida com a agressividade do tumor. A partir destas observações alguns experimentos foram realizados para avaliar a influência da PA1 na indução de alterações fenotípicas associadas à agressividade nas duas linhagens tumorais utilizadas (HCT-116 e B16-F10) na concentração de 500 fM. As células pré-tratadas com PA1 apresentaram aumento da CI50 frente ao tratamento com o quimioterápico doxorrubicina. O tratamento com PA1 também aumentou a taxa de migração celular em B16-F10, bem como induziu alterações morfológicas compatíveis com células com maior atividade migratória, reforçando a hipótese de que a alteração causada pela PA1 no metabolismo da célula tumoral pode induzir alteração no fenótipo destas.

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-04-13T19:46:18Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Michellangelo Nunes da Silva.pdf: 2117434 bytes, checksum: d85805b4fffcc0cf9857c274d15e1ca5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-13T19:46:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Michellangelo Nunes da Silva.pdf: 2117434 bytes, checksum: d85805b4fffcc0cf9857c274d15e1ca5 (MD5) Previous issue date: 2015-02-23 / FACEPE / Leveduras pigmentadas destacam-se nos processos biotecnológicos devido aos metabólitos produzidos com funções fisiológicas importantes, contribuindo com a resposta imune e tratamento de doenças. Assim, com o objetivo de detectar bioprodutos dessas leveduras e avaliar o potencial antifúngico foi desenvolvido além de técnicas in vitro, um modelo experimental de candidíase vaginal. Leveduras pigmentadas da Micoteca URM foram revisadas por critérios taxonômicos clássicos, moleculares e por espectrometria de massa. Testes de sensibilidade envolvendo o bioproduto de leveduras e antifúngicos comerciais foram realizados frente a isolados clínicos de Candida albicans. O isolado com menor concentração inibitória mínima foi selecionado para o modelo experimental. Fêmeas Wistar albinas, com peso médio de 230g, foram mantidas em temperatura controlada, umidade e fotoperíodo. A pre-disposição à infecção ocorreu por antibioticoterapia. A candidiase vaginal foi reproduzida atraves da inoculado de suspensão (106 UFC/mL) e C. albicans e após cinco dias foram tratadas com subproduto por via intravaginal. As leveduras pigmentadas foram autenticadas como Rhodotorula mucilaginosa. Entre outras substâncias, o acido oleico foi produzido com destaque pelas leveduras, sobretudo no isolado URM 6683. Apos os testes foi verificado a sensibilidade dos isolados de C. albicans tanto in vitro quanto no tratamento de candidíase vaginal. A aplicação de especies de Rhodotorula na biotecnologia representa uma importante opção na promoção à saúde. / Pigment include yeasts in biotechnology processes is due to metabolites produced with important physiological functions contributing to the immune response and treatment of diseases. Thus, in order to detect and evaluate byproducts of the yeast antifungal potential was developed in vitro techniques well as an experimental model of vaginal candidiasis. URM Culture Collection of pigmented yeasts were reviewed by classical taxonomic criteria, and molecular mass spectrometry. Sensitivity tests involving byproduct of yeast and commercial antifungal were performed against clinical isolates of Candida albicans. Isolated with lower minimum inhibitory concentration was selected for the experimental model. Albino Wistar rats, weighing 230g, were maintained under controlled temperature, humidity and photoperiod. The pre-disposition to the infection resulted from antibiotic therapy. Vaginal candidiasis is reproduced through the suspension for inoculation (106 CFU/mL) C. albicans and five days later were treated intravaginally byproduct. Pigmented yeasts were certified as Rhodotorula mucilaginosa. Among other substances, oleic acid was produced especially by yeasts, especially in isolated URM 6683. After testing it was found the sensitivity of the isolates of C. albicans both in vitro and in treatment vaginal candidiasis. The application of species of Rhodotorula biotechnology is an important option in health promotion.

CARVALHO, A. M. R. Estudo do mecanismo de ação da atividade antinociceptiva da Riparina II de Aniba riparia em camundongos. 2016. 120 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-12-20T13:37:11Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_amrcarvalho.pdf: 3402390 bytes, checksum: 98526c246cdb7fb39239799fd341c2a1 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-12-20T13:37:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_amrcarvalho.pdf: 3402390 bytes, checksum: 98526c246cdb7fb39239799fd341c2a1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-20T13:37:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_amrcarvalho.pdf: 3402390 bytes, checksum: 98526c246cdb7fb39239799fd341c2a1 (MD5) Previous issue date: 2016-11-24 / The unripe fruit of the species of Aniba riparia (Nees) Mez, found some alkamides, one in particular, Riparin II (RipII) has an interesting therapeutic potential. Previous studies showed that it had anxiolytic and antidepressant effects as well as an antiinflammatory effect. This study was conducted after approval by the CEUA/UFC (n° 41/15). The aim of the study was to evaluate the role of RipII in nociception process, possible mediators involved and the possible pharmacological mechanisms involved. They used male Swiss mice and was initially performed the toxicity test according to OECD 425, the oral toxicity test for 28 days and the molecular modeling of the TRPV1, TRPA1 and bradikynin receptors. The models of nociception were performed: writhes induced by acetic acid, hyperalgesia mechanical induced nociceptive agents (carrageenan, PGE2 and epinephrine), nociception test induced by intraplantar injection of capsaicin, cinnamaldehyde, menthol, bradykinin, PMA and 8-Br-cAMP, and investigate the role of potassium channels and some neurotransmitter systems. Molecular modeling has shown that RipII has a Strong interaction with TRPV1, TRPA1 and bradykinin receptors. The RipII (25 and 50 mg/kg, p.o.) was able to significantly reduce nociception induced by acetic acid and hyperalgesia induced by carrageenan, PGE2 and epinephrine. In the test of writhing induced by acetic acid was carried out time curve at a dose of 50 mg/kg and we observed that the effects of RipII-50mg/kg appeared within 30 minutes and persisted for 240 minutes. In the investigation of the analgesic mechanism, RipII showed effect related to the K+ ATP channels, TRPV1, TRPM8, ASIC, bradykinin receptors, PKA and PKC. To study possible neurotransmission pathways was performed writhing model of acetic acid-induced and the animals were pretreated different substances. The analgesic effect of RipII (50 mg/kg, p.o.) was reversed when the animals were pretreated with naloxone, glibenclamide and yohimbine, while the animals showed no behavioral change when pretreated with NAN-190, ritanserin, ondansetron, atropine or haloperidol. These data demonstrate that RipII produces a significant antinociceptive effect via molecular mechanisms of K+ ATP channels, TRPV1, TRPA1, TRPM8, ASIC, PKC, PKA, bradykinin receptors, α2 adrenergic receptors and opioid receptors. / Do fruto verde da espécie Aniba riparia (Nees) Mez, são encontradas algumas alcamidas, uma em especial, a Riparina II (RipII) possuindo um interessante potencial terapêutico. Estudos anteriores mostraram que a mesma apresentou efeitos ansiolítico e antidepressivo além de um efeito antiinflamatório. Este trabalho foi desenvolvido após aprovação pela CEUA/UFC (nº 41/15). O objetivo do estudo foi avaliar o papel da RipII no processo de nocicepção, os possíveis mediadores envolvidos e mecanismos farmacológicos. Foram utilizados camundongos Swiss machos e inicialmente foi realizado o teste de toxicidade segundo a OECD 425, o teste de toxicidade oral por 28 dias e a modelagem molecular para os os receptores TRPV1, TRPA1 e bradicinina. Os modelos experimentais de nocicepção realizados foram: contorções induzidas pelo ácido acético, hipernocicepção mecânica induzida por agentes algésicos (carragenina, PGE2 e epinefrina), teste de nocicepção induzida pela injeção intraplantar de capsaicina, cinamaldeído, mentol, bradicinina, PMA e 8-Br-AMPc, além de investigar o envolvimento dos canais de potássio e alguns sistemas de neurotransmissores. A modelagem molecular mostrou que a RipII possui uma forte interação com os receptores TRPV1, TRPA1 e bradicinina. A RipII (25 e 50 mg/kg, v.o.) foi capaz de reduzir de forma significativa a nocicepção induzida por ácido acético e a hipernocicepção induzida por carragenina, PGE2 e epinefrina. No teste das contorções abdominais induzidas por ácido acético foi realizada curva de tempo com a RipII na dose de 50mg/kg, onde observou-se que os efeitos da RipII-50mg/kg apareceram após 30 minutos e persistiu por 240 minutos. Na investigação do mecanismo antinociceptivo, a RipII mostrou efeito relacionado com os canais K+ATP, TRPV1, TRPM8, ASIC, receptores de bradicinina, PKA e PKC. Para estudar as possíveis vias de neurotransmissão foi realizado o modelo de contorções induzidas por ácido acético e os animais foram pré-tratados com diferentes substâncias. O efeito antinociceptivo da RipII (50 mg/kg, v.o.) foi revertido quando os animais foram pré tratados com naloxona, glibenclamida e ioimbina, enquanto os animais não apresentaram qualquer alteração comportamental, quando pré-tratadas com NAN-190, ritanserina, ondansetrona, atropina ou haloperidol. Estes dados demonstram que RipII produz um importante efeito antinociceptivo através de mecanismos moleculares dos canais K+ATP, TRPV1, TRPA1, TRPM8, ASIC, PKC, PKA, receptores de bradicinina, receptores α2-adrenérgico e receptores opioides.

Made available in DSpace on 2016-03-15T14:19:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 alessandra_siqueira_ioc_dout_2013.pdf: 5125105 bytes, checksum: 7996bd731234972da642d664ce7911db (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-01-13 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A asma é uma desordem de caráter alérgico que vem atingindo muitas pessoas por todo mundo. Embora existam muitos tratamentos para essa doença, novas terapias são necessárias, pois muitos dos tratamentos típicos causam efeitos colaterais para o paciente. Nidularium procerum (Np) é uma Bromeliaceae, encontrada principalmente no estado do Rio de Janeiro. Estudos realizados em nosso laboratório demonstraram que as folhas de Np, possuem atividade antialérgica, anti-inflamatória e antinociceptiva. No modelo de inflamação alérgica pulmonar, o extrato etanólico de N. procerum (NpEt) se mostrou eficiente em inibir a migração de eosinófilos para os pulmões em 58 % na dose de 1 mg/kg. Para verificar a real eficácia do extrato testamos esta dose no modelo de asma estabelecida. Após a instalação da doença, o tratamento (uma ou duas vezes ao dia) com NpEt, via oral, nas doses de 1 e 10 mg/kg não inibiu a migração de eosinófilos. O tratamento via aerolização com NpEt também não foi eficaz. Ao aumentarmos a dose para 100 e 500 mg/kg, observamos tendência de inibição da migração de eosinófilos, porém com pouca eficácia. Por isso, NpEt foi fracionado com solventes em doses crescentes de polaridade dando origem as frações hexânica (NpEtFH), diclorometânica (NpEtFHD), acetato de etila (NpEtFAe), butanólica (NpEtFB) e aquosa (NpEtFAq). Foram realizados experimentos in vitro com linfócitos T, mastócitos e eosinófilos. As frações NpEtFB e NpEtFAq não apresentaram efeito sobre os linfócitos T. NpEtFD inibiu todas as características estudadas, porém devido á sua toxicidade, conforme demonstrado no ensaio de apoptose. NpEtFAe foi a que inibiu a proliferação e liberação de citocinas, sem toxicidade. NpEt não impediu a proliferação destas células, mas modulou a liberação de IFN-\03B3 Com relação aos mastócitos, os extratos/subfrações não foram tóxicos para estas células, algumas frações modularam negativamente a liberação de IL-8, e todos inibiram a expressão de COX2, após 8h de cultura. Analisando os eosinófilos, observamos que todos foram capazes de inibir, nas doses de 10 \03BCg/mL e/ou 50 \03BCg/mL, a produção de corpúsculos lipídicos sem toxicidade. Visto que a subfração NpEtFAe foi a que modulou negativamente todas as células analisadas, testamos sua eficácia no modelo de asma estabelecida. Observamos que NpEtFAe foi capaz de inibir a migração de eosinófilos e a liberação de IgE, entretanto, NpEtFAe não interviu na hiperreatividade. Como NpEtFAe foi eficaz de impedir algumas das características da asma, mesmo com a mesma já instalada, testamos a mesma no modelo de asma crônica. O tratamento com NpEtFAe causou redução do número de eosinófilos (não foi significativo devido ao baixo número de animais), sem efeito na hiperreatividade, o que indica que outros experimentos são necessários, para melhor caracterização dos resultados. Com estes dados sugerimos que a fração NpEtFAe pode ser uma boa alternativa terapêutica para o controle da asma / Asthma is an alle rgic disorder that has incidence worldwide. Although many treatments are available, new therapies are necessary, because most of them cause strong side - effects to the patients. Nidularium procerum (Np) is a Bromeliaceae, lo calized mainly in Rio de Jan eiro state. Studies p erformed in our laboratory demonstrated that treatment with Np leaves in mice , inhibited allergy, inflammation and nociception. In the model of murine allergic inflammation, the ethanol extract of N. procerum leaves (NpEt) , v. o., was effective in inhibiting eosinophils migration to the lungs in 58 % at a dose of 1 mg/kg. To determine the true efficacy of the extract , we tested this dose in a model of established asthma . NpEt treatment with doses of 1 and 10 mg/kg (one or twice daily), after the onset of the disease, had no effect on eosinophil migration, the treatment with aerosolization were not effective either. I ncrea sing the dose to 100 and 500 mg /kg resulted in an indication of inhibition , but with low efficiency. So , NpEt was frac tionated using solvents of increasing polarity giving hexane ( NpEtFH ), dichloromethane ( NpEtFD ), ethyl acetate (NpEtFAe), butane (NpEtFB ) and aqueous ( NpEtFAq ) fractions . In vitro experiments were performed with T lymphocytes, mast cells and eosinophils. N pEtFB and NpEtFAq did not have effect on lymphocytes . NpEtFD inhibited all the studied aspects but due to its toxicity , demonstrated by apoptosis assay . NpEtFAe was the one which inhibited the prolifer ation and cytokine release, without toxicity. NpEt did not impair T cell proliferation , but it modulated negatively the release of IFN - γ. R egard ing to mast cells, neither the extract nor the fractions was toxic , some of them modulate d IL - 8 release and all inhibited the expression of COX2 in a 8 - h our culture . Analyzing eosinophils, we found that all fractions were able to inhibit lipid bodies production at 10 μg/mL and/or 50 μg/mL . Since NpEtFAe negatively modulated all the cells tested, we verified its efficacy in the model of established asthma . We observed that NpEtFAe was able to inhibit the migration of eosinophils and the release of IgE significantly, however, NpEtFAe did not interfere in hyperreactivity. As NpEtFAe was effective to prevent some asthma features , even in the established asthma, we tested it in the model of chronic asthma. NpEtFAe treatment decreased eosinophils number in the lungs (it was no significant due to animal number) and it had no effect on hyperreactivity . Other experiments are necessary to better elucidate the results. With this data, we suggest the NpEtFAe, can be a good alternative to asthma treatment.

Made available in DSpace on 2016-03-15T14:19:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 romulo_bezerra_ioc_dout_2012.pdf: 7162611 bytes, checksum: 3d02f06c712f13335b047fc33620dd3c (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / O P2X7 é um receptor purinérgico que está envolvido em importantes funções fisiológicas e metabólicas, mas também tem participação em diversas patologias, principalmente aquelas de caráter inflamatório. Apesar de sua relevância, ainda não se têm disponíveis antagonistas específicos que possam ser utilizados na clínica para o tratamento de doenças relacionadas à ativação deste receptor. Muitos fármacos comercializados nos dias de hoje apresentam estruturas químicas relacionadas a um produto natural extraído de alguma espécie botânica de uso consagrado na medicina popular. Baseia-se nisso a relevância do estudo de produtos naturais para obtenção de uma atividade específica sobre alvos celulares. Logo, esse trabalho teve como interesse o estudo de extratos vegetais e fúngicos obtidos de espécies dos diferentes biomas, cedidos pelo LQPN do Centro de Pesquisas René Rachou \2013 Fiocruz-MG, visando á identificação de antagonistas para o receptor P2X7. Nosso primeiro passo foi à padronização de uma metodologia que permitiu a triagem de cerca de 60 extratos ao mesmo tempo, através da utilização de um espectrofotômetro de placas. Depois de padronizada, promovemos a aplicação dessa metodologia na triagem de 1800 extratos, dos quais apenas três extratos (8067,8549 e 8568) apresentaram atividade antagonista na faixa de corte pré-estabelecida [100 \03BCg/mL], com perfis de inibição de 65 %, 62 % e 61 % respectivamente, sobre o P2X7R. Destes extratos foram determinados os IC´s50 tanto em células de linhagem murina (2,1 \03BCg/mL; 2.6 \03BCg/mL e 3.8 \03BCg/mL) quanto em células de linhagem humana (0.69, 0.92 e 1.5 \03BCg/mL), sendo possível verificar maior atividade quando testados em células de linhagem humana Posteriormente avaliamos a ação destes sobre funções fisiológicas relacionadas à ativação do P2X7R, nessa etapa, observamos o efeito inibitório destes extratos sobre a liberação de IL-1beta, ROS e NO, onde os três compostos foram capazes de inibir estas funções numa faixa entre 50 % a 60 %. Para obtermos uma caracterização do efeito farmacológico destes extratos sobre o receptor P2X7, realizamos experimentos de eletrofisiologia, caracterizando assim uma ação inibitória dose-dependente destes, sendo que nos respectivos IC´s50 os perfis de inibição da corrente foram de: 76 %, 47 % e 75 %. Também avaliamos a citotoxicidade in vitro utilizando as células de ambas às linhagens e verificamos que não apresentaram significativa toxicidade quando tratadas por 24 h. em doses até quatro vezes maiores que o IC50, visto que os resultados foram semelhantes ao controle não tratado. Depois de avaliarmos a atividade antagonista destes extratos in vitro, partimos para os experimentos in vivo utilizando os modelos de úlcera induzida por etanol e de dor neuropática e inflamatória, pois existem trabalhos previamente descritos na literatura que correlacionam a atividade do P2X7R com a evolução dessas patologias. No ensaio de dor neuropática, apenas dois extratos mostraram atividade analgésica (8067 e 8549) inibindo o estímulo de dor em 68 % e 66 %, porém no contexto da dor inflamatória os três extratos mostraram efeito analgésico, inibindo o estímulo em: 8067 = 48%, 8549 = 50% e 8568 = 44 % Os resultados obtidos do experimento de úlcera induzida por etanol demonstraram o efeito inibitório sobre a formação de úlceras desses extratos em: 88 %, 84 % e 51 %, inclusive foram mais efetivos que o BBG (antagonista reversível deste receptor) e que o medicamento utilizado na clínica (Lansoprazol), os quais inibiram a formação de úlceras em 43 % e 46% respectivamente. Nosso conjunto de resultados apontam extratos com significativa atividade antagonista sobre o P2X7R, com potencial para o desenvolvimento de novos fármacos com grande interesse para a indústria farmacêutica, além de contribuir para o conhecimento acerca de propriedades medicinais presentes na biodiversidade / The purinergic receptor P2X7 is involved in important physiological and metabolic functions, but it also participates in pathology, especially when inflammatory in character. Despite the importance of P2X7, it has no specifi c antagonists yet available for use in clinical treatment of diseases related to the receptor's activation. Today, many drugs on the market have chemical structures related to natural products obtained from botanical species with traditional use in indigen ous medicine, forming the basis for studying natural products to obtain specific activity on cellular targets. This work focused primarily on the study of plant and fungal species extracts obtained from different biomes provided by LQPN of the Research Cen ter René Rachou - Fiocruz - MG, aiming to identify antagonists for the P2X7 receptor. The first step was to standardize a method that allowed the screening of approximately 60 extracts at the same time through the use of a plate spectrophotometer. Once stand ardized, the application of this methodology was promoted in the screening of 1800 extracts. Of these, only three extracts (8067, 8549 and 8568) showed antagonistic activity in the pre - established cut range [100 mg/mL], with inhibition profiles of 65%, 62% , and 61% respectively, on the P2X7R. Th e IC's50 of them were determinate in murine (2.1, 2.6, and 3.8 mg/mL) and human (0.69, 0.92, and 1.5 mg/mL) cell lines. Which an increased activity was possible to verify when they were tested in human cells. Consequ ent evaluation of action on physiological functions related to the activation of P2X7R revealed an inhibitory effect of these extracts on the release of IL - 1beta, NO, and ROS. The three tested compounds were able to inhibit these functions in a range betwe en 50% and 60%. To obtain a pharmacological characterization of these extracts on the P2X7 receptor, electrophysiological experiments were conducted, which characterized the dose - dependent inhibitory effects, exhibiting inhibitory current profiles of 76%, 47%, and 75%, respectively. In vitro cytotoxicity was also evaluated, using both cell strains, showing no significant toxicity after 24 hours of treatment at doses of up to four times that of the IC50; the results were similar to the untreated control. Aft er evaluating the antagonistic activity of these extracts in vitro, experiments using the in vivo models of ethanol - induced ulcers and inflammatory and neuropathic pain were performed. Previous studies correlate the activity of the P2X7R with the evolution of these pathologies. In the neuropathic pain protocol experiment, only two extracts showed analgesic activity (8067 and 8549) by inhibiting the pain stimulation by 68% and 66%, but in the context of inflammatory pain, the three tested extracts showed ana lgesic effects by inhibiting the stimulus by the following percentages: 8067 = 48 %, 8549 = 50%, and 8568 = 44%. The results of the ethanol - induced ulcer demonstrated an inhibitory effect on the ulcer’s development of 88%, 84%, and 51% by these extracts, a nd found that the extracts were more effective than BBG (reversible antagonist of this receptor) and the medicine used clinically (Lansoprazole), which inhibited the formation of ulcers by 43% and 46%, respect ively. The data set links to extracts with significant antagonist activity on the P2X7R, and potential to the development xix of new medicines of great interest to the pharmaceutical industry and important contributions to the knowledge of medicinal properties present in biodiversity

SAHM, Bianca Del Bianco. Prospecção de substâncias com potencial anticâncer em microrganismos associados ao zoantídeo Protopalythoa variabilis (cnidaria, anthozoa). 2014. 104 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-10-07T15:54:47Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_bdbsahm.pdf: 2081558 bytes, checksum: d0b1f0d3bb8290c475c247d1e3be880d (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-10-07T15:55:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_bdbsahm.pdf: 2081558 bytes, checksum: d0b1f0d3bb8290c475c247d1e3be880d (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-07T15:55:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_bdbsahm.pdf: 2081558 bytes, checksum: d0b1f0d3bb8290c475c247d1e3be880d (MD5) Previous issue date: 2014 / Natural products exhibit a fundamental role in the discovery of new medicines. Marine natural products possess a huge chemical and pharmacological potential to yield new leads. Previous results support the promising chemical and pharmacological potential of the zoanthid Protopalythoa variabilis from the coast of Ceara State. On the other hand, strong evidences have indicated that associated microorganisms are the producers of the elaborate arsenal of secondary metabolites isolated from marine invertebrates. Then this study aimed to investigate the biomedical potential of associated microbiota to P. variabilis. The efforts to isolate associated bacteria yielded 10 different strains, and 3 of them showed typical actinomycete morphology. Here 2 of these actinomcetes had their anticancer potential studied. The strain BRA-035 belongs to the genus Streptomyces. BRA-035 culture using A1 broth yielded an acetate extract with potent cytotoxicity against a prostatic carcinoma cell line (PC-3/M), with inhibitory concetrantion mean (IC50) value in pg/mL. The bioguided fractionation led to the isolation of glucopiericidin A, piericidin D and piericidin A, and the later showed high antiprolifetative activity against ovarian cancer (OVCAR-8), colon cancer (HCT-116) and PC-3/M with IC50 values ranging from pico to fentomolar. Although Piericidin A has been widely studied, this might be the first report of cytotoxic activity against the lineages tested in this work, as well as the magnitude of its potency. Another strain selected for this study, BRA-060, was identified as belong to the genus Streptomyces also. The fermentation was optimized in marine broth to produce an acetate extract highly cytotoxic against a leukemia cell line (HL-60). The bioguided fractionation of these extracts yielded three diketopiperazines: cyclo (L-Try-trans-L-Pro); cyclo (L-Phe-cis-4-OH-D-Pro) and cyclo (L-Phe-trans-4-OH-D-Pro). The diketopiperazines isolated showed potent cytotoxic activity against glioblastoma (SF-295), ovarian cancer (OVCAR-8), HCT-116, HL-60 and another leukemia (K-562) The IC50 values ranging from nanomolar and micromolar. Althought their structures have already been described in the literature, there was no previous report of their cytotoxic acitivities. Altogether, these results emphasize the value of microbiota associated with the zoanthid P. variabilis, found on the coast of Ceará State, as a source of active compounds. / Os produtos naturais apresentam um papel fundamental na descoberta de novos fármacos. Nesse contexto, os produtos naturais marinhos apresentam um grande potencial químico e farmacológico. Resultados prévios demonstraram um potencial químico e farmacológico promissor do zoantídeo Protopalythoa variabilis encontrado no litoral cearense. Por outro lado, fortes indícios apontam que os microrganismos associados sejam os verdadeiros responsáveis pelo elaborado arsenal de metabólitos secundários isolados de invertebrados marinhos. Dessa forma surgiu o interesse em estudar o potencial biomédico da microbiota associada ao P. variabilis. Os esforços para isolar as bactérias renderam um total de 10 colônias. Destas, 3 apresentaram padrões morfológicos típicos de actinomicetos e 2 delas foram estudadas neste trabalho. A cepa BRA-035 foi identificada como pertencente ao gênero de actinomicetos Streptomyces, e seu extrato acetato de etila, resultante da fermentação em meio A1, causou alta inibição do crescimento celular contra a linhagem de carcinoma de próstata metastático PC-3/M, com concentração inibitória média (CI50 ) na ordem de pg/mL. O fracionamento bioguiado levou ao isolamento dos compostos glicopiericidina A, piercidina D, e piericidina A, sendo que esta última apresentou elevada atividade antiproliferativa em linhagens tumorais de câncer de ovário (OVCAR-8), câncer de cólon (HCT-116) e PC-3/M, com CI50 encontradas na ordem de pico até fento molar. Apesar de já ter sido amplamente estudada, esta pode ser a primeira ocorrência de atividade antiproliferativa de Piericidina A contra as linhagens testadas neste trabalho, assim como a ordem de grandeza de sua potência. Outra cepa selecionada para estudo, a BRA-060, também foi identificada como pertencente ao gêrero Streptomyces. Sua fermentação foi otimizada em meio Marine Broth para produção de extrato acetato de etila com citotoxicidade contra a linhagem de leucemia promielocítica HL-60 em ng/mL. O fracionamento bioguiado deste extrato resultou no isolamento de três dicetopiperazinas: a ciclo (L-Tyr-trans-L-Pro), a ciclo(L-Phe-cis-4-OH-D-Pro) e a ciclo(L-Phe-trans-4-OH-L-Pro). As dicetopiperazinas isoladas apresentaram potente atividade citotóxica contra as linhagens de glioblastoma (SF-295), câncer de ovário (OVCAR-8), HCT-116 e HL-60 e outra leceumia K-562, com valores de CI50 variando de nano a micro molar. Embora suas estruturas já terem sido descritas pela literatura, nenhum trabalho foi feito quanto a suas atividades citotóxicas, podendo este ser o primeiro relato sobre suas propriedades antitumorais. Esses resultados ressaltam a importância da microbiota associada ao zoantídeo P. variabilis, encontrado no litoral cearense, como fonte de compostos com potencial anticâncer.

MAGALHÃES, Hemerson Iury Ferreira. Atividade antitumoral in vitro e in vivo das fisalinas B e D isoladas da Physalis angulata Lin. 2005. 118 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina. Fortaleza, 2005. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-04-02T16:33:21Z No. of bitstreams: 1 2005_dis_hifmagalhães.pdf: 2442734 bytes, checksum: 7f6232f80f4f580fef80227118698302 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-04-04T11:27:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2005_dis_hifmagalhães.pdf: 2442734 bytes, checksum: 7f6232f80f4f580fef80227118698302 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-04-04T11:27:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2005_dis_hifmagalhães.pdf: 2442734 bytes, checksum: 7f6232f80f4f580fef80227118698302 (MD5) Previous issue date: 2005 / The present study describes the phytochemical analysis of the chloroform and ethyl acetate partitions obtained from the ethanol extract of Physalis angulata L. (Solanaceae). The sílica gel chromatography resulted on the separation of 5 whytaesteroids (physalina D, B, F, 5-a-etoxi-6-b-hidroxi-5,6-dihidrophysalin B, E and a semi-synthetic physalin named as 5-a-etóxi-6-b-hidróxi-2,3,5,6-tetrahidrophysalin B). The physalins were evaluated for their cytotoxic potentials on 9 tumor cell lines (CEM, HL-60, PC-3, HCT-8, MDA-MB-231, MDA-MB 435, K-562, MCF-7, B-16), on the embryogenesis of sea-urchin eggs and for its lytic capacity in erythrocytes. Antitumoral activity in vivo was observed on a mouse model inoculated with Sarcoma 180. The physalins showed a promising cytotoxic effect, being physalin D the most active on the cell lines (IC50 < 3,0 mg/mL). The physalins D, B, F, 5-a-etoxi-6-b-hidroxi-5, 6-dihidrophysalin B inhibited the progression of the sea-urchin embryo’s cell cycle within a concentration under 30 µg/mL. On the 1st cleavage and blastulae stages, physalin D showed to be the most active, with the respective IC50 of 4.786 and 5.498 µg/mL. On 3rd cleavage, physalin B presented an IC50 of 5.308 µg/mL. None of the physalins showed any sings of lytic activity in concentrations as high as 200 µg/mL. The study about the physalins effects upon cell viability (trypan blue daye) and death mechanisms on HL-60 cells (EB/AO staining) suggests that physalins B and D were the strongest inducers of apoptosis. Physalin D also induced cellular necrosis on a rather intense level. Physalin B, on doses of 10 and 25 mg/Kg, inhibited tumor growth on 44 e 52%, respectively, while physalin D inhibited tumor growth on 45% in both treatments. The antitumor activity in vivo was related to the lowest proliferation rate, as evaluated by the Ki-67 antibody marker. The histopathological analysis of kidney and liver suggests that those organs are affected, in a reversible manner, on mice treated with physalins. / Physalis angulata L. (Solanaceae) é uma planta considerada daninha conhecida popularmente como Camapu, dispersa em vários estados do Brasil e em vários continentes. O presente trabalho relata o estudo fitoquímico dos extratos: clorofórmico e acetato de etila, oriundos do extrato etanólico das partes aéreas de Physalis angulata L. A cromatografia em sílica gel resultou na separação de cinco vitaesteróides (fisalinas D, B, F, 5-a-etóxi-6-b-hidróxi-5,6-diidrofisalina B, E, e uma fisalina semi-sintética denominada de 5-a-etóxi-6-b-hidróxi-2,3,5,6-tetrahidrofisalina B). As cinco fisalinas foram avaliadas quanto ao potencial citotóxico em 9 linhagens de células tumorais (CEM, HL-60, PC-3, HCT-8, MDA-MB-231, MDA-MB 435, K-562, MCF-7, B-16), sobre o desenvolvimento de embriões de ouriço do mar e quanto à sua capacidade hemolítica. A atividade antitumoral in vivo para as fisalinas B e D foi avaliada em camundongos inoculados com o tumor sarcoma 180. As fisalinas apresentaram uma promissora atividade citotóxica, sendo que a fisalina D foi a mais ativa sobre as células tumorais com uma CI50 < 3,0 µg/mL. As fisalinas D, B, F, 5-a-etóxi-6-b-hidróxi-5,6-diidrofisalina B, inibiram o desenvolvimento embrionário em uma concentração < 30 µg/mL, entretanto, na 1ª. divisão e na blástula, a fisalina D (PA-1), novamente foi a mais ativa, com CI50 = 4.786 e 5.498 µg/mL, respectivamente. Na 3ª divisão, a fisalina B (PA-2) mostrou uma CI50 de 5.308 µg/mL. Nenhuma fisalina apresentou atividade hemolítica na máxima concentração testada (200 µg/mL). O estudo dos efeitos das frações sobre a viabilidade (exclusão por azul de tripan), e indução de morte (coloração por BE/LA) nas células HL-60 demonstrou que principalmente a fisalina B e D (10 µg/mL) foram as mais fortes indutoras do fenômeno apoptótico. Porém, fisalina D (15 µg/mL) apresentou elevado perfil na indução de necrose celular. As fisalinas D e fisalina B nas doses de 10 e 25 mg/Kg apresentaram potencial de inibição do crescimento tumoral correspondente a 45% em ambas as doses para a fisalina D e de 44 e 52%, respectivamente para a fisalina B. Esta atividade antitumoral in vivo foi relacionada à inibição da taxa de proliferação do tumor, como observado pela marcação através do anticorpo Ki-67. A análise de histopatológica de rim e fígado mostrou que ambos os órgãos foram moderadamente afetados após o tratamento com as fisalinas, mas de uma maneira reversível.

A pancreatina é um produto biotecnológico que contém um complexo enzimático obtido do pâncreas suíno, constituído principalmente pela amilase, lipase e protease. A literatura ainda apresenta poucos dados relacionados à estabilidade da pancreatina em formulações. Desta forma, foram realizados experimentos relativos à estabilidade usando o medicamento comercial Creon 10.000 e também o padrão de pancreatina puro e suas misturas binárias empregando 6 excipientes na proporção de 1:1 (m/m). Para isso, as amostras foram armazenadas durante 1, 3 e 6 meses em câmara de estabilidade a 40 ± 1°C e 75 ± 5% de umidade relativa e a 40 ± 1ºC na ausência de umidade. Foram realizados ainda testes de estresse em 5 condições (alta temperatura, pH ácido, pH básico, luz ultravioleta e oxidação forçada) para avaliar o efeito destes fatores na atividade das 3 enzimas que compõe o complexo. O resultado da atividade da α-amilase (%) nas amostras secas armazenadas por 1 mês, mostrou que a sacarose e o manitol foram os que apresentaram menor interação com a enzima sendo observado uma atividade de 78,6 ± 0,9 e 68,2 ± 0,6, respectivamente. Já a atividade da protease (%) nas amostras armazenadas nas mesmas condições descritas anteriormente, mostrou que a celulose foi o excipiente de menor interação com a enzima (atividade de 11,0 ± 0,5). Em relação à lipase (%), o estearato de magnésio foi o excipiente de menor interação com esta enzima apresentando uma atividade de 66,0 ± 0,8. Por outro lado, a umidade apresentou-se como um fator de forte influência na perda de atividade da α-amilase e protease, porém a atividade da lipase não foi significativamente afetada (88,8 ± 0,9% na mistura com sacarose). O estudo no biofármaco Creon 10.000, mostrou uma diminuição significativa da atividade da α-amilase (68%), lipase (77%) e protease (58%) nas amostras em pó armazenadas por 3 meses à 40ºC e 0% de umidade relativa. Nos resultados dos testes de estresse foi observado que o pH 9,0 e a luz UV não provocaram alterações significativas na atividade da α-amilase. Por outro lado, a lipase sofreu perdas consideráveis de atividade (inferiores a 32%) em todas as condições avaliadas. Os dados mostraram que características dos excipientes e condições de armazenamento afetam a estabilidade da enzima e, consequentemente, sua atividade. Todas as amostras geradas neste trabalho foram analisadas empregando-se espectrofotometria UV/Vis, que é uma técnica recomendada pelo ICH para avaliação de estabilidade de biofármacos. / Pancreatin is a biotechnological product containing an enzyme complex obtained from porcine pancreas, constituted mainly by amylase, lipase and protease that are used for digestive treatment. In literature, a few data related to pancreatin stability in pharmaceutical formulations is available. Thus, experiments were performed concerning the stability of the commercial product "Creon 10,000”, standard pancreatin and its binary mixtures with 6 excipients in the proportion of 1:1 (w/w). In order to accomplish these goals, the samples were subjected to storage during 1, 3 and 6 months using stability camera under two different conditions: at 40 ± 1°C and 75 ± 5% relative humidity and 40 ± 1°C in absence of moisture. Stress testing on 5 conditions (high temperature, acidic pH, alkaline pH, ultraviolet light and forced oxidation) was also performed. In these cases, the consequences in all three enzymes activity were evaluated. α-Amylase activity in samples stored for 1 month in absence of moisture has showed that saccharose and mannitol are the excipients that interact in lower levels with this enzyme (activity of 78.6 ± 0.9% and 68. 2 ± 0.6%, respectively). The protease activity in same condition described previously, has showed cellulose as the excipient that presents minor interaction with this enzyme (activity of 11.0 ± 0.5% was found). Regarding to lipase activity, the magnesium stearate exhibited inferior interaction with this enzyme, once it preserved 66.0 ± 0.8% of activity level. Humidity showed itself as a strong influencing factor in the reduction of α-amylase and protease activities; however, the lipase activity was not significantly affected (88.8 ± 0.9% in the mixture with saccharose). The enzymatic stability study of the biopharmaceutical Creon 10.000 as powdered samples, after 3 months of storage at 40° and 0% relative humidity showed a significant decrease in activity for α-amylase (68%), lipase (77%) and protease (58%). Through the stress testing, it could be observed that pH 9.0 and UV light did not induce great alterations in the α-amylase activities. On the other hand, the lipase suffered considerable activity decrease under all conditions evaluated (less than 32%). The results reveal that the excipients characteristics as well as the storage conditions affect the enzymes stability and consequently their activities. In these works, all samples generated were analysed employing spectrophotometry UV/Vis, which is recommended by the ICH for stability studies of biopharmaceuticals products.

Made available in DSpace on 2014-07-28T18:09:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 116.pdf: 1356327 bytes, checksum: be79ab2e79362b06e440aaf115bd4b8e (MD5) Previous issue date: 2007 / Made available in DSpace on 2014-12-22T16:56:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 116.pdf: 1356327 bytes, checksum: be79ab2e79362b06e440aaf115bd4b8e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / O registro sanitário de produtos é uma importante ferramenta de controle e proteção à saúde.Verifica-se, entretanto, que muitos produtos são registrados como alimentos ou cosméticos, apesar de utilizados pela população devido às suas ações terapêuticas, popularmente conhecidas. O objetivo desta dissertação é comparar as diferentes formas de enquadramento sanitário de produtos de origem natural como alimento, medicamento e cosmético. Foi conduzida uma análise retrospectiva, no período de 2000 a 2005, em três bases de dados: sítio eletrônico da ANVISA, DATA VISA e I-HELPS, a fim de quantificar quais os produtos de origem natural possuíam registro como alimento ou cosmético e tinham processos de registro como medicamento. Como resultado, encontrou-se os seguintes produtos com interface na área de alimento e medicamento: óleo de fígado de bacalhau, óleo de peixe, Allium sativus, Pauliniacupana, lecitina de soja, gelatina, Saccharomyces cerevisiae, Oenothera biennis e Plantagoovat. Foram contabilizados 627 processos de registro de alimentos e 90 de medicamentos.Foram aceitas 539 solicitações de registro como alimento (86 por cento) e 296 encontram-se vigentes.Foram aprovadas 60 solicitações de registro como medicamento (67 por cento dos registros concedidos) e 34 estão válidos. Na interface entre cosmético e medicamentos foram encontrados produtos com os seguintes ativos: Amica montana, Aloe vera, Calendula officinalis, Virginiana Hamamelis, Symphytum officinale e própolis. Foram contabilizados 1103 processos como cosmético e apenas 50 como medicamento. Foram deferidas 942 solicitações de registro de cosméticos (85 por cento) e 908 estão vigentes. Foram aceitos 25 registros como medicamento (50 por cento) e13 encontram-se válidos. Observa-se desta forma que há uma entrada muito maior de processos de registro em outras categorias do que na de medicamentos.