Made available in DSpace on 2016-03-15T14:19:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 alessandra_siqueira_ioc_dout_2013.pdf: 5125105 bytes, checksum: 7996bd731234972da642d664ce7911db (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-01-13 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A asma é uma desordem de caráter alérgico que vem atingindo muitas pessoas por todo mundo. Embora existam muitos tratamentos para essa doença, novas terapias são necessárias, pois muitos dos tratamentos típicos causam efeitos colaterais para o paciente. Nidularium procerum (Np) é uma Bromeliaceae, encontrada principalmente no estado do Rio de Janeiro. Estudos realizados em nosso laboratório demonstraram que as folhas de Np, possuem atividade antialérgica, anti-inflamatória e antinociceptiva. No modelo de inflamação alérgica pulmonar, o extrato etanólico de N. procerum (NpEt) se mostrou eficiente em inibir a migração de eosinófilos para os pulmões em 58 % na dose de 1 mg/kg. Para verificar a real eficácia do extrato testamos esta dose no modelo de asma estabelecida. Após a instalação da doença, o tratamento (uma ou duas vezes ao dia) com NpEt, via oral, nas doses de 1 e 10 mg/kg não inibiu a migração de eosinófilos. O tratamento via aerolização com NpEt também não foi eficaz. Ao aumentarmos a dose para 100 e 500 mg/kg, observamos tendência de inibição da migração de eosinófilos, porém com pouca eficácia. Por isso, NpEt foi fracionado com solventes em doses crescentes de polaridade dando origem as frações hexânica (NpEtFH), diclorometânica (NpEtFHD), acetato de etila (NpEtFAe), butanólica (NpEtFB) e aquosa (NpEtFAq). Foram realizados experimentos in vitro com linfócitos T, mastócitos e eosinófilos. As frações NpEtFB e NpEtFAq não apresentaram efeito sobre os linfócitos T. NpEtFD inibiu todas as características estudadas, porém devido á sua toxicidade, conforme demonstrado no ensaio de apoptose. NpEtFAe foi a que inibiu a proliferação e liberação de citocinas, sem toxicidade. NpEt não impediu a proliferação destas células, mas modulou a liberação de IFN-\03B3 Com relação aos mastócitos, os extratos/subfrações não foram tóxicos para estas células, algumas frações modularam negativamente a liberação de IL-8, e todos inibiram a expressão de COX2, após 8h de cultura. Analisando os eosinófilos, observamos que todos foram capazes de inibir, nas doses de 10 \03BCg/mL e/ou 50 \03BCg/mL, a produção de corpúsculos lipídicos sem toxicidade. Visto que a subfração NpEtFAe foi a que modulou negativamente todas as células analisadas, testamos sua eficácia no modelo de asma estabelecida. Observamos que NpEtFAe foi capaz de inibir a migração de eosinófilos e a liberação de IgE, entretanto, NpEtFAe não interviu na hiperreatividade. Como NpEtFAe foi eficaz de impedir algumas das características da asma, mesmo com a mesma já instalada, testamos a mesma no modelo de asma crônica. O tratamento com NpEtFAe causou redução do número de eosinófilos (não foi significativo devido ao baixo número de animais), sem efeito na hiperreatividade, o que indica que outros experimentos são necessários, para melhor caracterização dos resultados. Com estes dados sugerimos que a fração NpEtFAe pode ser uma boa alternativa terapêutica para o controle da asma / Asthma is an alle rgic disorder that has incidence worldwide. Although many treatments are available, new therapies are necessary, because most of them cause strong side - effects to the patients. Nidularium procerum (Np) is a Bromeliaceae, lo calized mainly in Rio de Jan eiro state. Studies p erformed in our laboratory demonstrated that treatment with Np leaves in mice , inhibited allergy, inflammation and nociception. In the model of murine allergic inflammation, the ethanol extract of N. procerum leaves (NpEt) , v. o., was effective in inhibiting eosinophils migration to the lungs in 58 % at a dose of 1 mg/kg. To determine the true efficacy of the extract , we tested this dose in a model of established asthma . NpEt treatment with doses of 1 and 10 mg/kg (one or twice daily), after the onset of the disease, had no effect on eosinophil migration, the treatment with aerosolization were not effective either. I ncrea sing the dose to 100 and 500 mg /kg resulted in an indication of inhibition , but with low efficiency. So , NpEt was frac tionated using solvents of increasing polarity giving hexane ( NpEtFH ), dichloromethane ( NpEtFD ), ethyl acetate (NpEtFAe), butane (NpEtFB ) and aqueous ( NpEtFAq ) fractions . In vitro experiments were performed with T lymphocytes, mast cells and eosinophils. N pEtFB and NpEtFAq did not have effect on lymphocytes . NpEtFD inhibited all the studied aspects but due to its toxicity , demonstrated by apoptosis assay . NpEtFAe was the one which inhibited the prolifer ation and cytokine release, without toxicity. NpEt did not impair T cell proliferation , but it modulated negatively the release of IFN - γ. R egard ing to mast cells, neither the extract nor the fractions was toxic , some of them modulate d IL - 8 release and all inhibited the expression of COX2 in a 8 - h our culture . Analyzing eosinophils, we found that all fractions were able to inhibit lipid bodies production at 10 μg/mL and/or 50 μg/mL . Since NpEtFAe negatively modulated all the cells tested, we verified its efficacy in the model of established asthma . We observed that NpEtFAe was able to inhibit the migration of eosinophils and the release of IgE significantly, however, NpEtFAe did not interfere in hyperreactivity. As NpEtFAe was effective to prevent some asthma features , even in the established asthma, we tested it in the model of chronic asthma. NpEtFAe treatment decreased eosinophils number in the lungs (it was no significant due to animal number) and it had no effect on hyperreactivity . Other experiments are necessary to better elucidate the results. With this data, we suggest the NpEtFAe, can be a good alternative to asthma treatment.