Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-Graduação em Química. / Made available in DSpace on 2012-10-23T07:17:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 247681.pdf: 758667 bytes, checksum: e0556064ba4bf9884638e647b225cdb9 (MD5) / Quinze derivados de uma mistura dos triterpenos e -amirina (1:2) foram preparados através de acilação com anidridos de ácido carboxílico apropriados ou cloreto de acila e oxidação na presença de cromato de t-butila ou clorocromato de piridínio. As estruturas moleculares dos compostos obtidos foram confirmadas através dos espectros de IV e 1H RMN. Os compostos foram avaliados quanto sua atividade antinociceptiva e antifúngica. A atividade antinociceptiva foi avaliada no modelo de dor induzida por ácido acético. Os derivados 3-O-acilados propanoato de e -amirina 4, hexanoato de e -amirina 6 e octanoato de e -amirina 7 foram os compostos mais ativos da série. Surpreendentemente, a substância octanoato de e -amirina 7 foi 24180 vezes mais potente que a aspirina e 427 vezes mais potente, no modelo de dor testado, que a morfina e não produziu nenhuma alteração comportamental nos ratos. A atividade antifúngica foi avaliada contra diferentes espécies de Candida e, adicionalmente, a inibição da adesão de Candida Albicans nas células epiteliais bucal in vitro foi determinada para o composto mais ativo. Entre os quinze compostos, formiato de e -amirina 2 e acetato de e -amirina 3 foram os mais ativos, inibindo todas as espécies de Candida testadas. Adicionalmente, formiato de e -amirina 2, foi tão efetivo quanto fluconazol, droga comercialmente disponível, em inibir a adesão de Candida Albicans nas células epiteliais bucal. Este estudo demonstrou que, na fase pré-clinica, os derivados da mistura de triterpenos pentacíclicos e -amirina exibiram significante atividade antinociceptiva, utilizando o modelo de dor induzida por ácido acético, e significante atividade antifúngica contra diferentes espécies de Candida.

OLIVEIRA, Francisco de Assis. Estudo das propriedades farmacológicas da resina de Protium heptaphyllum (Aubl.) March. e de seus principais constituintes, mistura de alfa e beta amirina. 2005. 279 f. Tese (Doutorado emm Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2005. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-06-08T16:00:11Z No. of bitstreams: 1 2005_tese_faoliveira.pdf: 1292244 bytes, checksum: 5d14230bd000de7b93f6340049209cb6 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-06-11T15:31:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2005_tese_faoliveira.pdf: 1292244 bytes, checksum: 5d14230bd000de7b93f6340049209cb6 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-06-11T15:31:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2005_tese_faoliveira.pdf: 1292244 bytes, checksum: 5d14230bd000de7b93f6340049209cb6 (MD5) Previous issue date: 2005 / Protium heptaphyllum March (Burseraceae) populary known as “almécega” is a popular medicinal plant largely encountered in the Amazon region, various States of Brazil and in several South American Countries. The oily amorphous exudate obtained from this plant is widely used in skin diseases, healing of ulcers, and as an analgesic and anti-inflamatory agent. Phytochemical studies reveled the presence of several monoterpenes and pentacyclic triterpenes such as a mixture of α- e β – amyrin, maniladilol and breine. The present study aimed to investigate the general toxicity and to establish the pharmacological activity of resin and is major triterpenoid mixture, the α and β – amyrin. In toxicity tests, both the resin and triterpene mixture exhibited low toxicity to mice. Resin at doses up 5 g/kg, (p.o.) or 2 g/kg (i.p.) and triterpene mixture up to 3 g/kg, (p.o.) or 2 g/kg (i.p.) failed to induce any mortality in mice. In Artemia-lethality test, the calculated (probit analysis) CL50 values for resin and triterpenes were in the order of 42,54 ± 19,96 and 400 ± 27,85 μg/mL, respectively. In pharmacological tests, the resin was analysed for anti-inflamatory (carrageenan-induced edema, cotton pellet-induced granuloma, and vascular permeability increase induced by i.p. acetic acid) and gastroprotective (absolute ethanol and acidified ethanol) effects, whereas the triterpene mixture was examined in assays that demostrate gastroprotective (against lesions induced by absolute ethanol), antipruritus (against pruritus induced by Dextran T40 and compound 48/80), acute and visceral antinociceptive (test of subplantar and intracolonic capsaicin) and hepatoprotective (against acetaminophen- and Ga1N/LPS-induced models of hepatitis) effects. In anti-inflammatory test, the resin (200 e 400 mg/kg, p.o.) although failed to modify the carrageenan-induced acute rat paw-edema response, it caused signficant inhibitions at a dose of 400mg/kg on the formation of cotton pellet-induced granulomas and on the vascular permeability increase induced by i.p. acetic acid in mice. In addition, the (200 e 400 mg/kg) showed gastroprotective potential against absolute- and acidified ethanol- induced gastric lesions as evidenced from siginificant diminution in lesion scores, restoration of the ethanol-induced depletion of non-protein sulfhydryl content More over, the resin demonstrated an antisecretory effect on gastric acid secretion induced in 4-h pylorus ligated rats. The triterpene mixture also produced similar gastroprotection against ethanol-induced lesions in a manner similar to capsaicin, a pungent principle from hot peppers. This protection possibly involves capsaicin-sencitive primary afferents since it was abolished in mice pretreated with a neurotoxic dose of capsaicin. The α and β – amyrin mixture (100 mg/kg) manifested antipruritus effect as evidenced from suppression of scratching behaviour in the mouse model of prurits induced by s.c. injections of dextran T40 and compound 48/80. Besides, it also produced an antiedematogenic effect in model of hind paw edema induced by histamine, compound 48/80 and dextran T40 and markedly depressed the compound 48/80-elicited rat mast cell degranulation (ex vivo). An antinociceptive effect of triterpenoid mixture (3-100 mg/kg) was observed in capsaicin-evoked somatic (1.6 μg/site, suplantar) and visceral (149 μg, intracolonic) models of nociception in mice. Greater suppression of nociceptive behaviors were evidenced at a dose of 10 mg/kg α and β – amyrin mixture, which mimicked the effect produced by ruthenium red, a non-competitive capsaicin antagonist. The antinociceptive effect of triterpenoid mixture was found to be naloxone (2 mg/kg)- sensitive, suggesting an opioid mechanism. A blockade by triterpene mixture was also evidenced on the hyperthermic but not the hypothermic response of subcutaneously administered capsaicin (10 mg/kg) suggesting possible incolvement of TRPV1 receptor. In open-field and rota-rod tests, the triterpene mixture did not manifest signs of either sedation or motor abnormality in mice that could account for the observed antinociception. In the model of acetaminophen (500 mg/kg)-induced hepatotoxicity, the triterpenoid mixture (50 and 100 mg/kg) effectively reduced the elevated serum AST and ALT levels, restored the depleted GSH and markedly diminished the histopathological alterations. Potentation of pentobarbital-sleeping time was, however observed at these doses of triterpenoid, incidating a probable suppression of cytochrome P450 and thus a diminished metabolite formation that may account for reduced acetaminophen toxicity. The α- and β – amyrin mixture offered complete protection against the mortality associated with Ga1N/LPS , but caused only a moderate diminution of serum enzymes and histopathological alterations. Taken together, these findings show that the resin and α- and β – amyrin mixture possess low toxicity and have a wide therapeutic potential with anti-inflammatory, antinociceptive, antipruritus, and gastro- and hepato-protective actions. Most of the effects of triterpenoid mixture appear to involve in part the participation of primary sensory afferents in their actions. / A espécie Protium heptaphyllum (Aubl.) March (Burseraceae) popularmente conhecida como almécega, é encontrada na região Amazônica, em vários Estados do Brasil e países da América do Sul. Esta espécie exsuda uma resina oleosa e amorfa, usada na medicina popular como analgésico, cicatrizante e expectorante. Estudos fitoquímicos demonstraram a presença de monoterpenos e triterpenos pentacíclicos, tais como α - amirina e β - amirina, maniladilol e breina. O presente trabalho teve como objetivo investigar os efeitos tóxicos e farmacológicos da resina e de seus constituintes majoritários, a mistura de triterpenos α e β – amirina. Na avaliação dos efeitos tóxicos observamos a toxicidade aguda destes produtos em camundongos e Artemia sp. Analisando os efeitos sistêmicos, avaliamos a atividade antiinflamatória da resina (edema de pata induzido por carragenina, granuloma induzido por “pellets” de algodão e permeabilidade vascular induzida por ácido acético) e da mistura de α e β – amirina (edema induzido por histamina, serotonina, dextrana T40 e composto 48/80). Examinamos ainda as atividades gastroprotetora e antisecretória da resina (lesões gástricas induzidas pelo etanol absoluto e etanol acidificado e secreção ácida induzida pela ligação pilórica) e as atividades gastroprotetora (lesões gástricas induzidas pelo etanol absoluto, com animais dessensibilizados por capsaicina), antipruriginosa (prurido induzido pelo dextrana T40 e composto 448/80 e desgranulação de mastócitos ex vivo) antinociceptiva (nocicepção induzida pela administração subplantar e intracolônica de capsaicina, resposta hipotérmica induzida por capsaicina) e hepatoprotetora (lesões hepáticas induzidas por acetaminofeno e Ga1N/LPS) da mistura de α e β – amirinas. Não foi possível estabelecer as DL50 da resina (até 5 g/kg, v.o. e 1 g/kg, i.p.) e da mistura de α e β – amirina (até 3 g/kg, v.o. e até 2 g/kg, i.p.) em camundongos. A mistura de α e β – amirina, mas não a resina, mostrou toxicidade para Artemisa sp, sendo as CL50 de 42,54 ± 19,96 e 400 ± 27,85 μg/mL, respectivamente. Nos modelos de permeabilidade vascular induzido por ácido acético (camundongo) e granuloma induzido por “pellet” de algodão (ratos), a resina demonstrou efeito antiinflamatório significativo na dose de 400mg/kg, reduzindo a permeabilidade vascular e o peso seco do granuloma. Contudo, a reina não apresentou atividade sobre edema induzido por carragenina (ratos). Adicionalmente, a resina preveniu as lesões gástricas induzidas por etanol absoluto e etanol acidificado, além de impedir a depleção dos grupos sulfidrilas produzida pelo etanol absoluto nas doses de 200 e 400 mg/kg. Um efeito antisecretório da resina (200 e 400mg/kg) foi observado no modelo de secreção ácida induzida pela ligação pilórica em ratos. A mistura de α e β – amirina também exibiu atividade gastroprotetora inibindo as lesões gástricas por etanol absoluto, cujo mecanismo parece envolver os neurônios sensoriais primários sensíveis à capsaicina. A administração oral dos triterpenos α e β – amirina (100 mg/kg), apresentou atividade antiedematogênica, nos modelos de edema de pata induzidos por histamina, composto 48/80 e dextrana T40, mas não sobre o edema induzido por serotonina. A atividade antipruriginosa também foi observada com as α e β – amirina nas doses variando de 50 a 200 mg/kg, em modelos de prurido induzido por dextrana T40 e pelo composto 48/80 e na redução (100 mg/kg) da degranulação de mastócitos peritoneais ex vivo pelo composto 48/80. O efeito antinociceptivo da mistura, nas doses de 3 a 100 mg/kg, foi verificado através da inibição dos comportamentos de nocicepção induzidos pela administração subplantar ou intracolônica de capsaicina em camundongos. A antinocicepção produzida por estes triterpenos (10 mg/kg) sobre o tempo de lambedura induzido pela capsaicina (1,6 μg/20 μL) não foi potencializada nem revestida pelo vermelho de rutênio (1,5 mg/kg), mas foi significativamente inibida pela naloxona (2 mg/kg), sugerindo mecanismo opióide. A participação dos receptores α2 - adrenérgicos neste efeito também foi eliminada, tendo em vista que a ioimbina não reverteu o efeito antinociceptivo das amirinas no modelo de nocicepção visceral induzida pela capsaicina. Estes triterpenos bloquearam ainda a hipertermia induzida pela capsaicina (10 mg/kg), mas não reverteram a resposta hipotérmica induzida por este agente, sugerindo a participação do receptor vanilóide (TRPV1) no efeito antinociceptivo das amirinas. Nos modelos de hepatoxidade, a mistura de α e β – amirina (50 e 100 mg/kg) reduziu o aumento dos níveis séricos de ALT e AST e restabeleceu os níveis de GSH hepáticos, diminuindo as alterações histopatológicas induzidas pelo acetaminofeno (500 mg/kg), além de potencializar o tempo de sono induzido por pentobarbital sódico (50 mg/kg), indicando que este efeito hepatoprotetor envolve a inibição do citocromo P – 450. A mistura ofereceu ainda completa proteção contra a mortalidade induzida por Ga1N/LPS, reduzindo as lesões hepáticas em camundongos e reduzindo os níveis séricos de ALT, mas não de AST ou GSH hepáticos, sugerindo um possível feito neuroimunomodulatório neste modelo. Os triterpenos α e β – amirina nas doses variando de 3 a 30 mg/kg, não manifestam efeitos sedativos ou incoordenação motora em camundongos. A resina e mistura de α e β – amirina possuem baixa toxicidade e atividades antiinflamatória e gastroprotetora. Os triterpenos α e β – amirina exibiram atividade antipruriginosa, antinociceptiva e hepatoprotetora, cujos efeitos envolvem, pelo menos em parte, a participação dos neurônios aferentes sensoriais primários.

DANTAS, Mariana Brito. Estudo do potencial terapêutico do ácido betulínico no tratamento de dislipidemia e diabetes em camundongos. 2012. 96 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-12-19T13:26:06Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_mbdantas.pdf: 2750222 bytes, checksum: 832a583f841f21d92c7f56810ea8289e (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2012-12-19T13:34:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_mbdantas.pdf: 2750222 bytes, checksum: 832a583f841f21d92c7f56810ea8289e (MD5) / Made available in DSpace on 2012-12-19T13:34:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_mbdantas.pdf: 2750222 bytes, checksum: 832a583f841f21d92c7f56810ea8289e (MD5) Previous issue date: 2012 / Diabetes and dyslipidemia prevalence has been increasing globally configured as an epidemic resultant mainly from overweight, physical inactivity and genetic susceptibility. There are reports of many natural products that have hypoglycemic and hypolipidemic activity. Among them we mention the terpenes, which are the largest group of secondary products of plants metabolism. The terpene studied in this work was betulinic acid (BA), a pentacyclic triterpene lupano type that presents a variety of biological and pharmacological activities. The objective of this study was to evaluate BA hypoglycemic and hypolipidemic effects in experimental protocols of dyslipidemia and diabetes induced pharmacologically as well as studying their toxic potential in vivo. The BA-treated groups received doses of 5 (BA5), 10 (BA10) and 20 (BA20) mg/kg. The evaluation of the BA hypoglycemic action was carried out through diabetes induced by alloxan protocol and oral glucose tolerance test (OGTT). To check their activity on lipid metabolism, it was carried out dyslipidemia protocol induced by Triton WR 1339 intraperitoneal injection. In addition, it was performed the protocol modified diet-induced hypercholesterolemia. Toxicity was assessed by the study repeated doses for 28 days treating daily with BA doses via gavage. After the protocol of alloxan-induced diabetes, there was a blood glucose reduction in groups BA10 and BA20. Triglycerides and total cholesterol decreased significantly at all doses studied. BA10 treatment, also reduced the blood glucose peak caused by glucose overload (2g/Kg) in the OGTT. After 24 hours of dyslipidemia induced by triton, there was a significant triglycerides reduction in groups treated with BA at doses of 10 and 20mg/Kg. After 48h, triglycerides levels remained reduced in group treated with BA10. In hypercholesterolemia induced by diet modified protocol BA at doses of 10 and 20mg/kg, promoted a significant decrease in total cholesterol levels. There were no significant changes in the parameters evaluated after repeated dose oral toxicity protocol. Results demonstrate the therapeutic potential and safety of betulinic acid in the treatment of dyslipidemia and diabetes, although others pre-clinical and clinical studies are necessary for its use by population. / A prevalência da diabetes e das dislipidemias vem crescendo mundialmente configurando-se como uma epidemia resultante,principalmente, do excesso de peso, da inatividade física e da suscetibilidade genética. Existem relatos de muitos produtos de origem natural que possuem atividade hipoglicêmica e hipolipidêmica. Dentre eles, podemos citar os terpenos, que constituem o maior grupo de produtos do metabolismo secundário de plantas. O terpeno estudado no presente trabalho é o ácido betulínico (AB), um triterpeno pentacíclico do tipo lupano que apresenta uma variedade de atividades biológicas e farmacológicas. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito hipolipidêmico e hipoglicêmico do AB em protocolos experimentais de dislipidemias e diabetes induzidas farmacologicamente bem como estudar seu potencial tóxico in vivo. O grupos tratados com AB receberam as doses de 5(AB5), 10(AB10) e 20(AB20)mg/Kg. A avaliação da ação do hipoglicêmica do AB foi através do protocolo de diabetes induzida por aloxano e o teste oral de tolerância a glicose (TOTG). Para verificar sua atividade sobre o metabolismo lipídico, foi realizado o protocolo de indução da dislipidemia através da injeção intraperitoneal de triton WR 1339. Além disso, foi realizado o protocolo de hipercolesterolemia induzida por dieta modificada. A toxicidade foi avaliada pela realização do estudo toxicológico de doses repetidas durante 28 dias mediante administração única diária por via oral de AB. Depois do protocolo de diabetes induzida por aloxano, observou-se uma redução da glicemia nos animais dos grupos AB10 e AB20. Os triglicerídeos e o colesterol total reduziram significativamente em todas as doses estudas. O tratamento com AB10, reduziu ainda o pico glicêmico causado pela sobrecarga de glicose (2g/Kg) no TOTG. Após 24h da indução com triton, verificou-se a redução significativa dos triglicerídeos nos grupos tratados com AB nas doses de 10 e 20mg/Kg. Depois de 48h, os animais do grupo AB10 manteve tal redução. No protocolo de hipercolesterolemia induzida por dieta modificada o AB nas doses de 10 e 20mg/Kg, promoveu uma diminuição significativa do colesterol total plasmático. Não foram encontradas alterações significativa nos parâmetros avaliados após protocolo de toxicidade oral em doses repetidas. Os resultados obtidos demonstram o potencial terapêutico e a segurança do ácido betulínico no tratamento das dislipidemias e diabetes, apesar de serem necessários novos estudos pré-clínicos e clínicos para sua utilização no mercado.

ASSIS, Lívia Coelho de. Avaliação da atividade cicatrizante do extrato etanólico e do Triterpeno 3, 6 , 16 Trihydroxylup-20 (29) - Eno provenientes de folhas de Combretum leprosum mart. no tratamento de lesões cutâneas induzidas em camundongos. 2015. 65 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-11-19T13:30:46Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_lcassis.pdf: 1077040 bytes, checksum: 0250c79249643f6ebf1a715508586500 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-11-19T13:33:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_lcassis.pdf: 1077040 bytes, checksum: 0250c79249643f6ebf1a715508586500 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-19T13:33:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_lcassis.pdf: 1077040 bytes, checksum: 0250c79249643f6ebf1a715508586500 (MD5) Previous issue date: 2015 / Wound healing is a complex and dynamic process involving an integrated action of several cell types, extracellular matrix and soluble mediators such as cytokines, which serve to recover the integrity of damaged anatomical structure. Natural products are the basis for many biotechnological inputs, as they are biologically active compounds with great potential for therapeutics and can provide molecular basis for many drugs in the clinics. Combretum leprosum Mart. is a native species of Caatinga, important biome in the Brazilian semiarid region, being popularly used in Brazil for the treatment of many diseases such as skin diseases. This study aimed to investigate the pro-healing potential of the ethanol extract (EECL) and the bioactive triterpene 3β, 6 β, 16 β-trihydroxylup-20 (29) ene (CLF-1) isolated from leaves of C. leprosum. Cell migration assay was performed using fibroblasts, which were treated with CLF-1 (1.75 µg / ml and 2.5 µg / ml) and analyzed after 0, 6 and 24 hours. Skin wounds (1 cm2) were induced in the dorsal region of mice (n = 30) and were treated with daily topical application (100µl) according to the group: saline, EECL (100μg / ml) and CLF-1 (100μg / ml) for 12 days. The results showed that CLF-1 did not show toxicity to fibroblasts and further increased cell proliferation and migration so that a significant increase on injury closing percentage was observed using both concentrations (1.75 mg / ml vs 2.5 mg / mL,) compared to control (p <0.05). Within 24 hours, there was also a significant increase in the rate of migration comparing CLF-1 at 2.5 ug / ml and control group (p<0.05). For the in vivo analysis, on the 2nd post surgical day (PS), the lesions treated with EECL and CLF-1 showed moderate presence of vessels in granulation tissue progressing to the dermis, as well as a slight inflammatory infiltrate. It was also observed that, on the 7th PS day, the animals treated with CLF-1 showed moderate angiogenesis, whereas animals treated with saline showed cell proliferation and migration into the wound. Furthermore, on the 12th day PS, the animals treated with EECL and CLF-1 showed complete closing of the injury, while those receiving saline exhibited open wounds. Thus, it was concluded that EECL and CLF-1 showed pro-healing effects, as well as a possible anti-inflammatory action and additional research is needed to elucidate its mechanisms in the wound healing process. / A cicatrização cutânea é um processo complexo e dinâmico que envolve uma ação integrada de vários tipos celulares, matriz extracelular e mediadores solúveis como citocinas, que tem por finalidade a recuperação da integridade da estrutura anatômica danificada. Produtos naturais são a base para diversos insumos biotecnológicos, pois são compostos biologicamente ativos com grande potencial terapêutico, e que podem formar bases moleculares para muitas drogas em uso clínico. Combretum leprosum Mart. é uma espécie nativa da Caatinga, bioma importante na região do semiárido brasileiro, sendo esta espécie popularmente utilizada no Brasil para o tratamento de diversas doenças, tais como doenças de pele. O presente estudo investigou o potencial pró-cicatrizante do extrato etanólico (EECL) e do triterpeno bioativo 3β, 6 β, 16 β-trihydroxylup-20 (29)-eno (CLF-1) isolado das folhas de C. leprosum. Para isto, o ensaio de migração de células foi realizado com fibroblastos, que foram pós tratados com CLF-1 (1,75 μg/mL e 2,5 μg/mL) e analisados em 0, 6 e 24 horas. Feridas cutâneas (1 cm2) foram realizadas na zona dorsal de camundongos (n=30) e em seguida foram tratadas com uma aplicação tópica diária (100 μl) de acordo com o grupo: salina, EECL (100μg/mL) e CLF-1 (100μg/mL) durante 12 dias. Os resultados demonstraram que CLF-1 não apresentou toxicidade aos fibroblastos e, ainda, em 6 horas estimulou a proliferação e migração celular, de modo que observou-se um aumento significativo na porcentagem de fechamento em ambas concentrações (1,75 μg/mL e 2,5 μg/mL) em relação ao controle (p<0,05). Em 24 horas, verificou-se também aumento significativo na taxa fechamento quando comparado CLF-1 2,5 μg/mL em relação ao controle (p<0,05). Na avaliação in vivo, observou-se no 2° dia pós cirúrgico (P.C.), que as lesões tratadas com EECL e CLF-1 mostraram presença moderada de vasos no tecido de granulação, progredindo na derme, bem como apresentaram um leve infiltrado inflamatório. Observou-se, ainda, que no 7° dia P.C. os animais tratados com CLF-1 demonstraram moderada angiogênese, enquanto que os animais tratados com salina apresentaram proliferação e migração celular em direção ao leito da ferida. Ademais, no 12° dia P.C., os animais tratados com EECL e CLF-1 apresentaram o fechamento completo da lesão, enquanto os que receberam salina, apresentaram, ainda, feridas abertas. Desta forma, foi possível concluir que o EECL e o CLF-1 apresentaram efeitos pró-cicatrizante, bem como uma possível ação anti-inflamatória e investigações adicionais são necessárias para elucidar o mecanismo de ação no processo de cicatrização cutânea.

SILVA, R. E. S.; BANDEIRA, M. A. M. Estudo químico de Cestrum laevigatum Schlecht (Solanaceae). 2009. 159 f. Dissertação (Mestrado em Química Orgânica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2009. / Submitted by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2014-10-10T20:26:58Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_ressilva.pdf: 5952584 bytes, checksum: a848de258704f99ff1e54a4eadb1a8d3 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-11-24T17:12:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_ressilva.pdf: 5952584 bytes, checksum: a848de258704f99ff1e54a4eadb1a8d3 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-24T17:12:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_ressilva.pdf: 5952584 bytes, checksum: a848de258704f99ff1e54a4eadb1a8d3 (MD5) Previous issue date: 2009 / This work reports the chemical study of the stem of Cestrum laevigatum Schlecht (Solanaceae), collected at the Pacoti-CE. The investigation of the ethanol extract using conventional techniques of adsorption chromatography (silica gel and silica flash) and exclusion (Sephadex LH-20) was possible the isolation of steroids and triterpene. The spirostan steroids have been characterized as the mixture at the sapogenins 25(S)-5-espirostan-2,3-diol and 25(R)-5-espirostan-2,3-diol (gitogenin) (CL-1), a mixture of epimers (25R)-5-espirostan-2,3-diol-3-O--Dgalactopyranoside and (25S)-5-espirostan-2,3-diol-3-O--D-galactoyiranoside (CL-2), and the mixture of new epimer (25R,S)-5-espirostan-2,3-diol-3-O--Dgalactopyranosil(1→4)--D-galactopyranosil(1→4)--D-glicopyranosil (CL-3). Besides these compounds, were also isolated the mixture of steroids β-sitosterol and stigmasterol (CL-5) and its glycosides (CL-6), and the pentacyclic triterpene β-lup-20(29)-en-3-ol (lupeol) (CL-4). The structural characterization of the isolated compounds was possible through the use of spectroscopic techniques, mainly NMR, including sequences of uni and bidimensional pulse, and comparison with literature data. CL-3 was shown to be active against Bacille subtilis, Pseudomonas aeruginosa and Enterobacter aerogenes. The leishmanicide activity was performed with CL-1, CL-2 and CL-3, however, only CL-3 was shown to be active against Leishmania amazonensis. For the antifungical activity, CL-1 was shown to be active only against Microsporum canis. CL-2 showed excellent results against Candida albicans, Trichophyton rubrum and Trichophyton mentagrophytes, and a relatively good activity against Microsporum canis. CL-3 appears with excellent activity antifungical against all strains tested. The promising results obtained so far from the ethanol extract of the stem of C. laevigatum confirm the great potential chemical / pharmacological species of this genus, and justify the importance of work / O presente trabalho relata o estudo químico do caule de Cestrum laevigatum Schlecht (Solanaceae), coletado no município de Pacoti-CE. A partir da investigação do extrato etanólico utilizando técnicas clássicas de cromatografia de adsorção (gel de sílica e sílica flash) e exclusão (Sephadex LH-20) foi possível o isolamento de esteróides e um triterpeno. Os esteróides de esqueleto espirostano foram caracterizados como uma mistura de sapogeninas 25(S)-5-espirostano-2,3-diol e 25(R)-5-espirostano-2,3-diol (gitogenina) (CL-1), a mistura de epímeros (25R)-5-espirostano-2,3-diol-3-O--D-galactopiranosídeo e (25S)-5-espirostano-2,3-diol-3-O--D-galactopiranosídeo (CL-2), e a mistura epimérica da saponina de caráter inédito na literatura (25R,S)-5-espirostan-2,3-diol-3-O--D-galactopiranosil(1→4)- -D-galactopiranosil(1→4)--D-glicopiranosil (CL-3). Além destes compostos, foram isolados ainda a mistura dos esteróides -sitosterol e estigmasterol (CL-5) e seus derivados glicosilados (CL-6), além do triterpeno pentacíclico de esqueleto do tipo lupano β-lup-20(29)-en-3-ol (lupeol) (CL-4). A caracterização estrutural dos compostos isolados foi possível através do uso de técnicas espectroscópicas, principalmente RMN, incluindo seqüências de pulso uni e bidimensionais, e comparação com dados relatados na literatura. Das saponinas investigadas quanto ao potencial antimicrobiano, apenas CL-3 mostrou-se ativa contra Bacillos subtilis, Pseudomonas aeruginosa e Enterobacter aerogenes. A atividade leishmanicida foi realizada com CL-1, CL-2 e CL-3, porém, apenas CL-3 mostrou-se ativa contra Leishmania amazonensis. Em relação à atividade antifúngica, CL-1 mostrou-se ativa apenas contra Microsporum canis. CL-2 apresentou excelentes resultados contra Candida albicans, Trichophyton rubrum e Trichophyton mentagrophytes, e uma atividade relativamente boa contra Microsporum canis. Já CL-3 aparece revelou uma excelente atividade antifúngica contra todas as cepas testadas. Os resultados promissores obtidos até o momento a partir do extrato etanólico do caule de C. laevigatum confirmam o grande potencial químico/farmacológico das espécies deste gênero, e justificam a importância do trabalho realizado

FROTA, Julyanne Torres. Avaliação das atividades hipoglicemiante e hipolipidêmica da mistura de a, ß-Amirina, triterpenos pentacíclicos isolados do Protium heptaphyllum em camundongos . 2011. 112 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2011 . / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-04-12T14:19:28Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_jtfrota.pdf: 1419855 bytes, checksum: 969fccaf232d27ec83834898b9cdcb92 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-04-13T16:15:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_jtfrota.pdf: 1419855 bytes, checksum: 969fccaf232d27ec83834898b9cdcb92 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-04-13T16:15:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_jtfrota.pdf: 1419855 bytes, checksum: 969fccaf232d27ec83834898b9cdcb92 (MD5) Previous issue date: 2011 / The Protium heptaphyllum (almecegueira) exudes an amorphous resin consisting of four binary mixtures of triterpenoids, and the mixture of ,-amyrin its major constituent. In folk medicine, the resin of Protium heptaphyllum is used as anti-inflammatory, gastroprotective, analgesic, expectorant and healing. The mixture of pentacyclic triterpenes ,-amyrin (AB) (63:37) has gastroprotective, antipruritic, antiinflammatory and antioxidant properties. Experimental studies with pentacyclic triterpene compounds belonging to the groups ursan, oleanan and lupan showed inhibition of different enzyme systems intimately related to metabolism/absorption of carbohydrates and lipids. Thus the hypoglycemic and hypolipidemic activity of AB was evaluated in Swiss mice, the models of diabetes induced by streptozotocin (STZ) and alloxan (ALX) and hyperlipidemia induced by triton WR-1339 and hyperlipidemic diet (DH). AB (10, 30 and 100mg/kg) was able to reduce blood glucose in a model of acute treatment in STZ-induced diabetes, we observed two times (3 and 5 hours after administration of AB). In five days after treatment of diabetic animals by ALX, AB (30 and 100 mg/kg) also decreased hyperglycemia, an effect also observed for the use of glibenclamide (10 mg/Kg) in both models. But in normal animals, AB did not affect blood glucose, unlike the positive control glibenclamide (10 mg/kg). Although the model of diabetes for ALX, AB reduced total cholesterol (TC) serum at a dose of 100mg/kg, and triglycerides (TG) at doses of 30 and 100 mg/kg. In this same model, reduced the serum amylase AB (AB 30 and 100 mg/kg) and serum lipase (AB 100 mg/kg), a result also observed in normal animals, the same doses. In the Oral Glucose Tolerance Test (OGTT), AB (30 and 100 mg/kg) was shown to reduce blood glucose levels 60 min after administration of glucose, and AB (10, 30 and 100 mg/kg) in 90 min. In the model of hyperlipidemia by triton, AB (10, 30 and 100 mg/kg) significantly reduced the levels of TC and TG, in times of 24 and 48 h after administration of triton, an effect also observed for fenofibrate (200 mg/kg) used as positive control. The levels of HDL-c elevation experienced with the use of AB at all doses and times observed, as well as fenofibrate. In the model of hyperlipidemia by HD, AB (10, 30 and 100 mg/kg) controlled weight gain of animals receiving HD, as well as reduced TC, TG, LDL-c and VLDL-c, although the latter only in doses 30 and 100 mg/kg. These two doses were also effective in raising HDL-c. All doses of AB administered reduced the atherogenic index. All doses of AB also reduced the hepatic cholesterol in this model. All effects reported were similar to the positive control (fenofibrate 200 mg/kg). AB (10, 30 and 100 mg/kg) was able to significantly improve the antioxidant defenses of the liver, because it elevated the activity of hepatic SOD and CAT when compared to control high-fat diet, and raised the level of NP-SH in dose of 100 mg/kg, as well as reduced lipid peroxidation by decreasing the MDA, at all doses. Together, these results indicate that α,β-amyrin has hypolipidemic and hypoglycemic effect and deserves further evaluation in larger animal models that simulate chronic conditions of diabetes and dyslipidemia, in addition to research on their mechanism of action. / O Protium heptaphyllum (almecegueira) exsuda uma resina amorfa constituída de quatro misturas binárias de triterpenóides, sendo a mistura de ,-amirina o constituinte majoritário. Na medicina popular, a resina de Protium heptaphyllum é utilizada como antiinflamatória, gastroprotetora, analgésica, expectorante e cicatrizante. A mistura de triterpenos pentacíclicos ,-amirina (AB) (63:37) possui propriedades gastroprotetora, antipruriginosa, antiinflamatória e antioxidante. Estudos experimentais com compostos triterpênicos pentacíclicos que pertencem ao grupo ursano, oleanano e lupano mostraram a inibição de diferentes sistemas enzimáticos intimamente relacionados ao metabolismo/absorção de carboidratos e lipídios, deste modo, a atividade hipoglicemiante e hipolipemiante de AB foi avaliada, em camundongos Swiss, nos modelo de diabetes induzida por estreptozotocina (STZ) e por aloxano (ALX) e hiperlipidemia induzida por triton WR-1339 e dieta hiperlipidêmica (DH). AB (10, 30 e 100mg/Kg) foi capaz de reduzir a glicemia num tratamento agudo no modelo de diabetes induzida por STZ, nos dois tempos observados (3 e 5h após administração de AB). Em tratamento após cinco dias de animais diabéticos por ALX, AB (30 e 100mg/Kg) também diminuiu a hiperglicemia, efeito este, também observado para o uso de glibenclamida (10mg/Kg) nos dois modelos. Porém em animais normais, AB não alterou a glicose sanguínea, ao contrário do controle positivo glibenclamida (10 mg/Kg). Ainda no modelo de diabetes por ALX, AB reduziu o colesterol total (CT) sérico na dose de 100mg/Kg, bem como os triglicerídeos (TG) nas doses de 30 e 100 mg/Kg. Neste mesmo modelo, AB reduziu a amilase sérica (AB 30 e 100 mg/Kg) e a lipase sérica (AB 100mg/Kg), resultado este observado também em animais normais, nas mesmas doses. No Teste Oral de Tolerância à Glicose (TOTG), AB (30 e 100 mg/Kg) mostrou reduzir a glicemia 60 min após a administração de glicose, bem como AB (10, 30 e 100 mg/Kg) em 90 min. No modelo de hiperlipidemia por triton WR-1339, AB (10, 30 e 100mg/Kg) reduziu de forma significativa os níveis de CT e TG, nos tempos de 24h e 48h após a administração do triton WR-1339, efeito observado também para fenofibrato (200mg/Kg) utilizado como controle positivo. Os níveis de HDL-c sofreram elevação com o uso de AB em todas as doses e tempos observados, assim como o fenofibrato. No modelo de hiperlipidemia por DH, AB (10, 30 e 100mg/Kg) controlou o ganho de peso dos animais que receberam a DH, bem como reduziram CT, TG, LDL-c e VLDL-c, porém este último somente nas doses de 30 e 100mg/Kg. Estas duas doses também foram eficazes para elevar o HDL-c. Todas as doses de AB administradas reduziram o índice aterogênico. Todas as doses de AB também reduziram o colesterol hepático neste modelo. Todos os efeitos relatados foram similares ao controle positivo (fenofibrato 200mg/Kg). AB (10, 30 e 100 mg/Kg) foi capaz de melhorar significativamente as defesas antioxidantes do tecido hepático, pois elevou a atividade das enzimas catalase e superóxido dismutase hepáticas, quando comparado ao controle dieta hiperlipídica, bem como elevou o nível dos grupos sulfidrílicos não protéicos na dose de 100mg/Kg, assim como reduziu a peroxidação lipídica ao diminuir o malondialdeído, em todas as doses. Em conjunto, esses resultados indicam que α,β-amirina possui efeito hipoglicemiante e hipolipemiante e que merece maior avaliação futura em modelos animais que simulem situações crônicas de diabetes e dislipidemias, além de pesquisa de seu mecanismo de ação.

CARVALHO, K. M. B. A resina de protium heptaphyllum e seu principal constituinte, a mistura de triterpenos alfa e beta-amirina, previnem a obesidade induzida por dieta em camundongos: evidências e potenciais mecanismos. 2015. 122 f. Tese (Doutorado em Ciências Médicas) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-05-17T12:11:00Z No. of bitstreams: 1 2015_tese_kmmbcarvalho.pdf: 1194526 bytes, checksum: 5258a2ccb6f909caf0a767fbe1ef9d9a (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-05-17T12:11:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_tese_kmmbcarvalho.pdf: 1194526 bytes, checksum: 5258a2ccb6f909caf0a767fbe1ef9d9a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-17T12:11:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_tese_kmmbcarvalho.pdf: 1194526 bytes, checksum: 5258a2ccb6f909caf0a767fbe1ef9d9a (MD5) Previous issue date: 2015-10-16 / Obesity which is characterized by excessive accumulation of body fat mainly due to the increased consumption of high-calorie foods and sedentary lifestyle is associated with various pathological conditions such as cardiovascular disease, diabetes, musculoskeletal disorders and cancer. Pharmacologic options for the treatment of obesity are limited and have many side effects. In Brazil only two drugs are available, sibutramine and orlistat. In the search for new therapeutic options for the treatment of obesity, medicinal plants have been an important source of research, particularly the terpene compounds, known regulators of blood glucose and lipid metabolism. This study investigated the antiobesity effect of Protium heptaphyllum resin (RPH) and its main constituent, the mixture of triterpenes alpha and betaamyrin (AMY), in obesity induced by high calorie diet in mice and its possible mechanisms of action. Swiss albino male mice were used, weighing between 20-25g, which after a week of free access to standard chow (Purina®, Brazil) were divided into 7 groups of 10 animals each and treated with standard diet (SD), high-fat diet (HFD), HFD+RPH 10mg/kg, HFD+RPH 20mg/kg, HFD+AMY 10mg/kg, HFD+AMY 20 mg/kg or HFD+sibutramine 10mg/kg (SIB) for 15 weeks. RPH and AMY were initially diluted in 2% Tween 80 in water. The HFD group received the same vehicle. SIB was diluted with water. Vehicle, RPH, AMY and SIB were replaced twice a week. The evaluation of obesity parameters consisted of measurements of body weight, abdominal adipose tissue and liver, as well as determination of glucose, amylase, lipase, ALT, AST, total cholesterol, triglycerides, insulin, ghrelin, leptin, TNF- , MCP-1, IL-6 and plasma resistin, triglycerides and cholesterol, and histological evaluation of liver and abdominal fat. It was also evaluated the gene expression of PPARy and lipoprotein lipase (LPL) in abdominal adipose tissue and the effect of PHR on adipogenesis in vitro. The animals that received only the high-fat diet (HFD), at the end of the 15th week, showed significant increase in body weight, liver and abdominal fat and plasma levels of glucose, amylase, lipase, ALT, AST, total cholesterol and triglycerides when compared to group that received the standard diet (SD). The animals treated with RPH 10 and 20mg/kg, AMY 10 and 20mg/kg and SIB 10 mg/kg showed a significant reduction of body weight, liver and visceral fat and plasma levels of glucose, amylase, lipase, ALT, AST, total cholesterol and triglycerides in relation to the HFD group. Only RPH 10 mg/kg did not significantly alter plasma levels of lipase compared to the HFD group. HFD increased significantly total cholesterol and hepatic triglycerides in comparison to HFD and this increase was significantly reduced by RPH, AMY and SIB. Feed intake was significantly higher in animals that received HFD compared to animals of SD, and this consumption was significantly reduced by RPH, AMY and SIB. There was no significant difference between the groups regarding water consumption. In addition, treatment with RPH 10 and 20 mg/kg, AMY 10 and 20 mg/kg and SIB 10 mg/kg reduced plasma leptin and insulin levels compared to animals that received only HFD. Plasma levels of ghrelin appeared in the HFD significantly reduced when compared to SD, while RPH increased significantly ghrelin levels in relation to HFD, these were reduced by AMY and SIB. Only RPH 20 mg/kg and AMY 20 mg/kg reduced significantly plasma resistin levels in relation to HFD. HFD significantly elevated plasma levels of TNF- , IL-6 and MCP-1 compared to the SD. RPH, AMY and SIB significantly reduced IL-6 and MCP-1 levels, while for TNF- it was observed a reduction with RPH 20mg/kg and AMY 10 and 20mg/kg. There was a significant increase of PPAR mRNA and LPL expression in adipose tissue of the HFD group compared to SD. RPH and AMY caused significant reduction of PPAR and LPL expression, but the same was not observed with SIB. The adipocytes area was significantly bigger in HFD animals compared to SD animals and it was reduced by RPH, AMY and SIB. While HFD promoted a liver inflammation with necrosis and steatosis signs, this was prevented by RPH 20 mg/kg, AMY 20 mg/kg and SIB. RPH 12.5; 25 and 50 μg/mL significantly reduced adipogenesis in vitro, observed by the reduction of the accumulation of lipids in 3T3-L1 cells and by down-regulation of protein expression of PPAR , C/EBP and C/EBP- . These findings suggest RPH and AMY have a preventive anti-obesity potential for their modulatory effects on carbohydrates and lipids metabolism, on the regulation of hormones regulating hunger and satiety on adipokines and cytokines in addition to the regulation of adipogenesis. / A obesidade, que se caracterizada pelo acúmulo excessivo de gordura corporal decorrente principalmente do aumento do consumo de alimentos calóricos e do sedentarismo, está associada a várias condições patológicas como doenças cardiovasculares, diabetes, desordens musculoesqueléticas e câncer. As opções farmacológicas para o tratamento da obesidade são limitadas e apresentam diversos efeitos colaterais. No Brasil apenas dois fármacos estão disponíveis, sibutramina e orlistate. Na busca de novas opções terapêuticas para o tratamento da obesidade, as plantas medicinais têm sido uma importante fonte de pesquisa, em especial os compostos terpênicos, conhecidos reguladores da glicemia e do metabolismo lipídico. O presente estudo investigou o efeito antiobesidade da resina do Protium heptaphyllum (RPH) e de seu principal constituinte, a mistura de triterpenos alfa e beta-amirina (AMI), na obesidade induzida por dieta hipercalórica em camundongos e seus possíveis mecanismos de ação. Foram utilizados camundongos Swiss, albinos, machos, pesando entre 20-25g, que após uma semana de livre acesso a ração padrão (Purina®, Brasil) foram divididos em 7 grupos de 10 animais e tratados com dieta padrão (DP), dieta hipercalórica (DH), DH+RPH 10mg/kg, DH+RPH 20mg/kg, DH+AMI 10mg/kg, DH+AMI 20 mg/kg ou DH+sibutramina 10mg/kg (SIB) por 15 semanas. RPH e AMI foram inicialmente diluídas em 2% Tween 80 em água. O grupo DH recebeu o mesmo veículo. SIB foi diluída em água. Veículo, RPH, AMI e SIB foram trocados duas vezes na semana. A avaliação dos parâmetros de obesidade foi constituída das medidas do peso corporal, do tecido adiposo abdominal e do fígado, bem como da determinação de glicose, amilase, lipase, ALT, AST, colesterol total, triglicérides, insulina, grelina, leptina, TNF- , MCP-1, IL-6 e resistina plasmáticos, colesterol e triglicerídeos hepáticos e avaliação histológica da gordura abdominal e do fígado. Foi ainda avaliado a expressão gênica de PPARy e de lipoproteína lipase (LPL) no tecido adiposo abdominal e o efeito de RPH na adipogênese in vitro. Os animais que receberam apenas a dieta hipercalórica (DH), ao final da 15ª. semana, apresentaram aumento significativo do peso corporal, da gordura abdominal e do fígado e dos níveis plasmáticos de glicose, amilase, lipase, ALT, AST, colesterol total e triglicerídeos em relação ao grupo que recebeu apenas a dieta padrão (DP). Os animais tratados com RPH 10 e 20mg/kg, AMI 10 e 20mg/kg e SIB 10mg/kg demonstraram redução significativa do peso corporal, da gordura abdominal e do fígado e dos níveis plasmáticos de glicose, amilase, lipase, ALT, AST, colesterol total e triglicerídeos em relação ao grupo DH. Apenas RPH 10mg/kg não alterou significativamente os níveis plasmáticos de lipase comparado ao grupo DH. A DH aumentou significativamente o colesterol total e os triglicerídeos hepáticos em relação a DH e esta elevação foi significativamente reduzida pela RPH, AMI e SIB. O consumo de ração foi significativamente maior nos animais que receberam a DH em comparação aos animais da DP, e este consumo foi significativamente reduzido pela RPH, AMI e SIB. Não houve diferença significativa entre os grupos quanto ao consumo de água. Além disso, o tratamento com RPH 10 e 20mg/kg, AB 10 e 20mg/kg e SIB 10mg/kg reduziu os níveis plasmáticos de insulina e leptina em relação aos animais que receberam apenas a DH. Os níveis plasmáticos de grelina apresentaram-se reduzidos significativamente na DH quando comparados a DP, enquanto a RPH elevou significativamente os níveis de grelina em relação a DH, estes foram reduzidos por AMI e SIB. Apenas RPH 20mg/kg e AMI 20 mg/kg reduziram significativamente os níveis plasmáticos de resistina em relação a DH. A DH elevou significativamente os níveis plasmáticos de TNF- , IL-6 e MCP-1 em relação a DP. RPH, AMI e SIB reduziram significativamente os níveis de IL-6 e MCP-1, enquanto para o TNF- esta redução foi observada em RPH 20mg/kg e AMI 10 e 20 mg/kg. Houve elevação significativa da expressão de mRNA de PPAR e LPL no tecido adiposo do grupo DH em relação a DP. RPH e AMI promoveram significativa redução da expressão de PPAR e LPL, o mesmo não sendo observado com a SIB. A área dos adipócitos foi significativamente maior nos animais da DH comparado aos animais da DP e esta foi reduzida por RPH, AMI e SIB. Enquanto a DH promoveu um processo inflamatório hepático com sinais de necrose e esteatose, este foi prevenido pela RPH 20mg/kg, AMI 20mg/kg e SIB. RPH 12,5; 25 e 50 μg/mL reduziu significativamente a adipogênese in vitro, observada pela redução do acúmulo de lipídeos nas células 3T3-L1 e pela regulação negativa da expressão proteica de PPAR , C/EBP e C/EBP- . Estes achados sugerem RPH e AMI possuem um potencial antiobesidade preventivo pelos seus efeitos moduladores sobre o metabolismo de carboidratos e lipídeos, sobre a regulação de hormônios reguladores da fome e da saciedade, sobre adipocinas e citocinas, além da regulação da adipogênese.

A nível mundial, os protozoários Trichomonas vaginalis, Leishmania amazonensis e Plasmodium falciparum são responsáveis por um grande número de infecções parasitárias, com maior destaque para a malária, com 438.000 mortes anuais. A problemática envolvida no combate a estas infecções está no seu tratamento, especialmente pela resistência dos parasitos aos fármacos comumente utilizados. Portanto, considerando a necessidade de novas alternativas terapêuticas, este trabalho, através da abordagem da valorização de resíduos, do uso de produtos naturais como fonte de moléculas bioativas e da utilização da ferramenta semissíntese, visou à obtenção de compostos com atividade antiprotozoária, especialmente atividade antimalárica. Os compostos naturais ácidos ursólico (AU) e betulínico (AB) foram extraídos do subproduto de uma indústria de suco de maçã (Malus domestica) e das cascas do Platanus acerifolia, respectivamente, e foram planejados novos derivados por modificação nas posições C-3 e C-28. Duas séries de derivados do AU e AB foram preparadas e identificadas, totalizando 24 compostos, que foram avaliados frente à cepa de P. falciparum resistente à cloroquina (W2), e frente a T. vaginalis e L. amazonensis. Os compostos modificados apenas em C-3 foram os mais ativos contra os três protozoários. O composto ácido 3β-acetil betulínico (100 μM) reduziu a viabilidade de trofozoítos de T. vaginalis em cerca de 74%, e o ácido 3β-isobutíril ursólico (100 μM) inibiu o crescimento de promastigotas de L. amazonensis em cerca de 55%. De forma mais significativa, o ácido 3β-butiril betulínico apresentou relevante atividade antimalárica, IC50=3,4 μM. Além disso, os compostos não apresentaram significativa citotoxicidade frente a células de mamíferos (VERO) e células de hepatoma humano (HepG2), apresentando alto índice de seletividade aos parasitos. Nanoemulsões e nanocápsulas de núcleo lipídico do composto 3β-butanoil betulínico foram desenvolvidas com sucesso através do método de nanoemulsificação espontânea e nanoprecipitação, respectivamente, e o método CLAE-UV se mostrou adequado para a quantificação do derivado triterpênico nas nanoestruturas. Apesar de apresentar atividade antimalárica in vitro, o composto ácido 3β-butanoil betulínico livre e incorporado na nanoemulsão não apresentou atividade no modelo in vivo, não apresentando, portanto, correlação in vitro - in vivo. Isto ocorreu, provavelmente, devido à baixa solubilidade do composto, que não alcançou o sítio ativo em uma concentração satisfatória para sua ação. De forma geral, os dados obtidos neste trabalho contribuem para o desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas de baixo custo, visto que o aproveitamento de resíduos, assim como a utilização de produtos naturais e de processos de semissíntese são estratégias pouco onerosas. Ainda, mostramos de forma inédita a viabilidade da incorporação de compostos triterpênicos em sistemas nanocarreadores biodegradáveis (nanoemulsões e em nanocápsulas de núcleo lipídico), utilizando nanoprecipitação, uma metodologia simples, eficaz e reprodutível. / The protozoans Trichomonas vaginalis, Leishmania amazonensis and Plasmodium falciparum are responsible for a large number of parasitic infections in worldwide, especially malaria, with 438,000 deaths annually. The main problems involved in the combat of these infections involve the treatment, especially by the resistance of parasites to commonly used drugs. Therefore, considering the need for new therapeutic alternatives, this work, through the recovery of waste, the use of natural products as a source of bioactive molecules and the use of semisynthesis tool, aimed to obtain compounds with antiprotozoal activity, particularly antimalarial activity. The ursolic acid (UA) was isolated from apple pomace (Malus domestica) obtained from a local juice manufacture, and betulinic acid (BA) from barks of Platanus acerifolia, and these compounds were modified at C-3 and C-28 positions. Two series of UA and BA derivatives were prepared and identified, totaling 24 compounds, which were tested against the P. falciparum chloroquine resistant strain (W2), T. vaginalis and L. amazonensis. Against all protozoans, compounds only modified at C-3 were the most active. The compound 3β-acetyl betulinic acid (100 μM) reduced the trophozoites viability of T. vaginalis nearly 74% and 3β-isobutyryl ursolic acid (100 μM) inhibited the growth promastigotes of L. amazonensis by 55%. More significantly, the 3β-butyryl betulinic acid showed significant antimalarial activity, IC50 = 3.4 μM. Moreover, the compounds did not shown significant toxicity against mammalian cells (VERO) and human hepatocellular carcinoma (HepG2) cells, demonstrating high selectivity index towards parasites. Nanoemulsions and lipid-core nanocapsules of the compound 3β-butanoyl betulinic were successfully developed by spontaneous nanoemulsification and nanoprecipitation method, respectively, and HPLC-UV method was adequate for the quantification of the triterpene derivative in the nanostructures. In spite of the in vitro antimalarial activity, the compound 3β-butanoyl betulinic acid free and incorporated in the nanoemulsion showed no activity in the in vivo model, not presenting in vitro - in vivo correlation. This was probably due to the low solubility of the compound, which not reached the active site in a concentration satisfactory for its action. Overall, the data obtained in this study contribute to the development of new and low cost therapeutic alternatives, since the utilization of wastes, as well as the use of natural products and semisynthesis process are inexpensive strategies. In addition, it was demonstrated in an unprecedented way the feasibility of the incorporation of triterpenic compounds in biodegradable nanocarrier systems (nanoemulsions and lipid-core nanocapsules) using nanoprecipitation, a simple, effective and reproducible methodology.

A nível mundial, os protozoários Trichomonas vaginalis, Leishmania amazonensis e Plasmodium falciparum são responsáveis por um grande número de infecções parasitárias, com maior destaque para a malária, com 438.000 mortes anuais. A problemática envolvida no combate a estas infecções está no seu tratamento, especialmente pela resistência dos parasitos aos fármacos comumente utilizados. Portanto, considerando a necessidade de novas alternativas terapêuticas, este trabalho, através da abordagem da valorização de resíduos, do uso de produtos naturais como fonte de moléculas bioativas e da utilização da ferramenta semissíntese, visou à obtenção de compostos com atividade antiprotozoária, especialmente atividade antimalárica. Os compostos naturais ácidos ursólico (AU) e betulínico (AB) foram extraídos do subproduto de uma indústria de suco de maçã (Malus domestica) e das cascas do Platanus acerifolia, respectivamente, e foram planejados novos derivados por modificação nas posições C-3 e C-28. Duas séries de derivados do AU e AB foram preparadas e identificadas, totalizando 24 compostos, que foram avaliados frente à cepa de P. falciparum resistente à cloroquina (W2), e frente a T. vaginalis e L. amazonensis. Os compostos modificados apenas em C-3 foram os mais ativos contra os três protozoários. O composto ácido 3β-acetil betulínico (100 μM) reduziu a viabilidade de trofozoítos de T. vaginalis em cerca de 74%, e o ácido 3β-isobutíril ursólico (100 μM) inibiu o crescimento de promastigotas de L. amazonensis em cerca de 55%. De forma mais significativa, o ácido 3β-butiril betulínico apresentou relevante atividade antimalárica, IC50=3,4 μM. Além disso, os compostos não apresentaram significativa citotoxicidade frente a células de mamíferos (VERO) e células de hepatoma humano (HepG2), apresentando alto índice de seletividade aos parasitos. Nanoemulsões e nanocápsulas de núcleo lipídico do composto 3β-butanoil betulínico foram desenvolvidas com sucesso através do método de nanoemulsificação espontânea e nanoprecipitação, respectivamente, e o método CLAE-UV se mostrou adequado para a quantificação do derivado triterpênico nas nanoestruturas. Apesar de apresentar atividade antimalárica in vitro, o composto ácido 3β-butanoil betulínico livre e incorporado na nanoemulsão não apresentou atividade no modelo in vivo, não apresentando, portanto, correlação in vitro - in vivo. Isto ocorreu, provavelmente, devido à baixa solubilidade do composto, que não alcançou o sítio ativo em uma concentração satisfatória para sua ação. De forma geral, os dados obtidos neste trabalho contribuem para o desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas de baixo custo, visto que o aproveitamento de resíduos, assim como a utilização de produtos naturais e de processos de semissíntese são estratégias pouco onerosas. Ainda, mostramos de forma inédita a viabilidade da incorporação de compostos triterpênicos em sistemas nanocarreadores biodegradáveis (nanoemulsões e em nanocápsulas de núcleo lipídico), utilizando nanoprecipitação, uma metodologia simples, eficaz e reprodutível. / The protozoans Trichomonas vaginalis, Leishmania amazonensis and Plasmodium falciparum are responsible for a large number of parasitic infections in worldwide, especially malaria, with 438,000 deaths annually. The main problems involved in the combat of these infections involve the treatment, especially by the resistance of parasites to commonly used drugs. Therefore, considering the need for new therapeutic alternatives, this work, through the recovery of waste, the use of natural products as a source of bioactive molecules and the use of semisynthesis tool, aimed to obtain compounds with antiprotozoal activity, particularly antimalarial activity. The ursolic acid (UA) was isolated from apple pomace (Malus domestica) obtained from a local juice manufacture, and betulinic acid (BA) from barks of Platanus acerifolia, and these compounds were modified at C-3 and C-28 positions. Two series of UA and BA derivatives were prepared and identified, totaling 24 compounds, which were tested against the P. falciparum chloroquine resistant strain (W2), T. vaginalis and L. amazonensis. Against all protozoans, compounds only modified at C-3 were the most active. The compound 3β-acetyl betulinic acid (100 μM) reduced the trophozoites viability of T. vaginalis nearly 74% and 3β-isobutyryl ursolic acid (100 μM) inhibited the growth promastigotes of L. amazonensis by 55%. More significantly, the 3β-butyryl betulinic acid showed significant antimalarial activity, IC50 = 3.4 μM. Moreover, the compounds did not shown significant toxicity against mammalian cells (VERO) and human hepatocellular carcinoma (HepG2) cells, demonstrating high selectivity index towards parasites. Nanoemulsions and lipid-core nanocapsules of the compound 3β-butanoyl betulinic were successfully developed by spontaneous nanoemulsification and nanoprecipitation method, respectively, and HPLC-UV method was adequate for the quantification of the triterpene derivative in the nanostructures. In spite of the in vitro antimalarial activity, the compound 3β-butanoyl betulinic acid free and incorporated in the nanoemulsion showed no activity in the in vivo model, not presenting in vitro - in vivo correlation. This was probably due to the low solubility of the compound, which not reached the active site in a concentration satisfactory for its action. Overall, the data obtained in this study contribute to the development of new and low cost therapeutic alternatives, since the utilization of wastes, as well as the use of natural products and semisynthesis process are inexpensive strategies. In addition, it was demonstrated in an unprecedented way the feasibility of the incorporation of triterpenic compounds in biodegradable nanocarrier systems (nanoemulsions and lipid-core nanocapsules) using nanoprecipitation, a simple, effective and reproducible methodology.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T07:28:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 291803.pdf: 1525292 bytes, checksum: 65a7d2d28f99ad02e183976767ad2a57 (MD5) / O presente estudo revela que o tratamento oral com os triterpenos pentacíclicos betulina (30 mg/mg), ácido ursólico (50 mg/kg) e ácido oleanólico (30 mg/kg) reduziu a hiperalgesia mecânica induzida pela injeção intraplantar (i.pl.) de Adjuvante Completo de Freund (CFA) e pela ligação parcial do nervo ciático (LPNC). De maneira similar, o tratamento oral com a mistura de isômeros , -amirina (30 mg/kg) significativamente reduziu a hiperalgesia mecânica e térmica induzida pelo CFA ou pelo procedimento de LPNC. Demonstrou-se também que a propriedade analgésica da mistura de isômeros , -amirina em modelos experimentais de dor persistente é mediada pela ativação direta dos receptores canabinóides CB1 e CB2. O tratamento oral com , -amirina foi tão efetivo quanto o tratamento realizado com os agonistas seletivos ACEA (CB1, 10 mg/kg; intra-peritoneal [i.p.]) ou JWH-133 (CB2, 10 mg/kg; i.p.) em reduzir a hiperalgesia mecânica induzida pela injeção i.pl. de CFA. O pré-tratamento com o antagonista seletivo do receptor CB1, AM251 (1 mg/kg; i.p.) ou do receptor CB2, AM630 (3 mg/kg; i.p.), bem como o bloqueio da expressão desses receptores através do tratamento com oligonucleotídeo anti-sense (ODN-AS), foi igualmente eficaz em reverter o efeito anti-hiperalgésico demonstrado pela , -amirina. O ensaio de ligação específica demonstrou que , -amirina pode atuar como um agonista de receptores canabinóides. Em condições fisiológicas, o composto demonstrou uma grande afinidade pelo receptor CB1 (Ki = 0,133 nM) e uma menor afinidade pelo receptor CB2 (Ki = 1.989 nM). O tratamento com , -amirina, ACEA ou JWH-133, em doses efetivas contra a hiperalgesia, não causou qualquer distúrbio de comportamento quando avaliado no ensaio da tétrade. Além disso, , -amirina demonstrou uma potente ação antiinflamatória, ao inibir a produção/liberação das citocinas interleucina-1 (IL-1 ), fator de necrose tumoral- (TNF- ), interleucina-6 (IL-6) e da quimiocina derivada de queratinócitos (KC), bem como a atividade da mieloperoxidase, tanto na pata quanto na medula espinhal de camundongos. O tratamento com , -amirina também foi efetivo em prevenir a ativação do fator de necrose kappa B (NF-kB) e da proteína de ligação ao elemento responsivo AMP cíclico (CREB) e diminuir a expressão da ciclooxigenase-2 (COX-2) na pata de camundongos submetidos à injeção i.pl. de CFA ou na medula espinhal de camundongos submetidos ao procedimento de LPNC. Os resultados do presente trabalho demonstram, portanto que a , -amirina exibe propriedades anti-hiperalgésicas e antiinflamatórias quando avaliadas em dois modelos de dor persistente, via ativação dos receptores canabinóides e pela inibição da produção/liberação de citocinas pró-inflamatórias e inibição da expressão de NF-kB, CREB e COX-2.