Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2008. / Submitted by Jaqueline Oliveira (jaqueoliveiram@gmail.com) on 2008-12-04T19:03:56Z
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DISSERTACAO_2008_JimmyAlexanderGuerreroVargas.pdf: 1916877 bytes, checksum: d700ddf73df00f0f92fbe08e9c73d637 (MD5) / A peçonha de escorpiões é uma mistura complexa de peptídeos que exercem sua atividade modulando canis iônicos de membranas biológicas. O presente projeto
teve como objetivo central realizar a análise proteômica da peçonha do escorpião
colombiano Centruroides margaritatus. Tal espécie é capaz de produzir acidentes
moderados e graves em humanos, no entanto existe pouca informação disponível
relacionada aos componentes desta peçonha. A peçonha foi obtida por estimulação elétrica aplicando-se 5 impulsos de 50 V em cada escorpião, liofilizada e
armazenada a -20oC. Diferenças significativas na produção de peçonha entre
machos e fêmeas e também entre fêmeas grávidas e não-grávidas foram
observadas. A peçonha bruta foi submetida a fracionamento por RP-HPLC usando
coluna C8 (4.6 x 250 mm) e 43 frações foram eluídas, coletadas e secadas a vácuo.
Todas essas frações foram analisadas por MALDI-TOF/MS e detectou-se 91
componentes com massas moleculares distintas. A peçonha de C. margaritatus
apresenta 54% de suas toxinas no intervalo de massas moleculares de 2,5 a 6,0
kDa, no qual estão incluídas as toxinas de cadeia curta bloqueadoras de canais para
potássio; 13% do total encontram-se no intervalo de 6,5 até 8,0 kDa que corresponde
ao grupo das toxinas moduladoras de canais para sódio voltagem-dependentes.
Finalmente, 33% dos componentes presentes na peçonha de C. margaritatus são
pequenos compostos com 2,0 kDa que fazem parte de um grupo de moléculas
raramente descrito nas peçonhas de escorpiões. Também foram isolados e
caracterizados quimicamente dois novos peptídeos: a margatoxina 2 (MgTx2), com
24 resíduos de aminoácidos (MM = 2,6 kDa) e três pontes dissulfeto, pertencente à
família das das -KTx e a margatoxina 3 (MgTx3) com 30 resíduos de aminoácidos
(MM = 3,38 kDa) e três pontes dissulfeto. Trata-se de uma molécula inédita, sem
similaridade com outras descritas na literatura.
______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Scorpion venoms are a complex mixture of peptides that exert their action via
ion-channel modulation in biological membranes. The central objective of this project was to perform the proteomic characterization of the venom from the Colombian scorpion Centruroides margaritatus. This species is capable of producing moderate accidents and serious complications in humans, but little information is available related to its components. The venom was obtained by mild electrical stimulation method, applying 5 impulses of 50 V in each scorpion. It was observed differences in the production of the venom between males and females and also between pregnant and not-pregnant females. The crude venom was fractioned by RP-HPLC using a C8 column (4.6 x 250 mm) and 43 fractions were collected and vacuum dried. All these fractions were analyzed by MALDI-TOF/MS and 91 distinct compounds had their molecular masses characterized. The venom of C. margaritatus exhibits 54% of their toxins in the molecular mass range from 2.5 to 6.0 kDa that probably includes
short-chain K+ channel blockers; 13% of the total are in the range from 6.5 to 8.0 kDa
and may include long-chain Na+ channel toxins. Finally, 33% of the components
present in C. margaritatus venom are peptides smaller than 2.0 KDa, a group rarely
described in scorpions venoms. Two novel peptides were purified and chemically
characterized: margatoxin 2 (MgTx2), 24 amino acids long (MM = 2,6 kDa) and three
disulfide bridges, belonging to the -KTx family and margatoxin 3 (MgTx3), 30 amino
acids long (MM = 3,38 kDa) and three disulfide bridges, with no significant
similarities to other scorpion neurotoxins described.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unb.br:10482/1235 |
| Date | 14 March 2008 |
| Creators | Guerrero Vargas, Jimmy Alexander |
| Contributors | Castro, Mariana de Souza |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UnB, instname:Universidade de Brasília, instacron:UNB |
| Rights | Free, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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