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Previous issue date: 2016-02-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O reimplante tardio de dentes avulsionados é uma realidade dentro dos consultórios
odontológicos. Na tentativa de se restabelecer a arquitetura e a função do ligamento
periodontal, além de se evitar a anquilose, evitando ou modulando a reabsorção por
substituição, a superfície radicular dos dentes avulsionados pode ser tratada com
diversas substâncias, dentre elas o EDTA (ácido etilenodiamino tetra-acético) a
17%, sempre visando uma menor chance de ocorrer reabsorção inflamatória e por
substituição. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do
tratamento de discos da superfície vestibular de raízes de dentes bovinos, com
EDTA 17%, com Emdogain®
, com ácido hialurônico e com colágeno, através de
testes de viabilidade celular, quantificação das citocinas IL-1ß, IL-6, IL-8, IL-10 e
TNF-α por ensaio ELISA, além da ilustração por microscopia eletrônica de varredura
da adesão dos fibroblastos sobre os discos de dentina. Foram cortados 155 discos
de dentina, com 4,5 mm de diâmetro, da face vestibular da superfície radicular de
dentes bovinos, previamente raspados ou não com cureta periodontal. Os discos
foram regularizados, limpos e autoclavados. Os espécimes foram tratados com as
substâncias preconizadas e colocados em placas de 96 poços onde foram
semeadas células de culturas primárias de fibroblastos humanos de ligamento
periodontal, que ficaram em contato com os discos por 48 horas. A sobrevivência e a
viabilidade celular na superfície dos discos foram avaliadas através do ensaio de
XTT. A microscopia eletrônica de varredura foi utilizada para verificar a adesão de
fibroblastos à superfície dos discos. A detecção e quantificação das citocinas foram
realizadas pelo teste ELISA. Os dados foram submetidos à análise estatística pelo
teste ANOVA e Tukey (p < 0,05). Os resultados obtidos mostraram que o uso de
EDTA 17% por 5 minutos sem agitação foi mais eficaz que os outros protocolos (p <
0,05) e aliado ao ácido hialurônico, foi menos citotóxico promovendo melhor
viabilidade celular. Não foi possível assegurar a visualização dos fibroblastos em
microscopia eletrônica de varredura. Quanto ao ensaio de ELISA, houve expressão
das citocinas IL-1β, IL-6 e IL-8 (citocinas pró-inflamatórias), porém houve diferença
estatisticamente significante entre a IL-6 e a IL-8. Sendo assim, podemos concluir
que o EDTA 17% por 5 minutos sem agitação e o ácido hialurônico apresentaram
menor índice de citotoxicidade aos fibroblastos do ligamento periodontal, porém
houve resposta inflamatória pela expressão de IL-6 e IL-8. / The delayed reimplantation of avulsed teeth is a reality in dental
offices. In an attempt to restore architecture and function of the periodontal ligament,
avoiding ankylosis, preventing or modulating the replacement resorption, avulsed
teeth root surface may be treated with various substances including EDTA
(ethylenediaminetetraacetic acid) to 17%, always seeking a lower chance of
occurring inflammatory or replacement resorption. Thus, the aim of this study was to
evaluate the effectiveness of the treatment of discs cutted of the vestibular surface of
bovine teeth roots with EDTA 17% with Emdogain® with hyaluronic acid and collagen
through cell viability tests, quantification of cytokines IL -1ß, IL-6, IL-8, IL-10 and
TNF-α by ELISA assay and, in addition, it was taken Illustrations by scanning
electron microscopy of the accession of fibroblasts on the dentin disks. 155 dentin
discs with 4,5 mm in diameter will be cut from the vestibular surface of the root
surface of bovine teeth, previously scraped or not with periodontal curette. The discs
were regularized, cleaned and autoclaved. The specimens were treated with the
substances advocated and placed in 96 well plates are seeded in which primary cell
cultures of human periodontal ligament fibroblasts that were in contact with the discs
for 48 hours. The survival and cell viability on the surface of the disks are evaluated
by XTT assay. The scanning electron microscopy was used to verify adherence of
fibroblasts to the surface of the discs. Detection and quantification of cytokines were
done by ELISA assay. The data were statistically analyzed by ANOVA and Tukey (p
< 0.05). The results showed that the use of 17% EDTA for 5 minutes without stirring
was more effective than the other protocols (p <0.05) and combined with hyaluronic
acid was less cytotoxic promoting better cell viability. It was not possible to ensure
the fibroblasts display in scanning electron microscopy. As for the ELISA assay,
there was expression of IL- 1β, IL -6 and IL -8 (pro- inflammatory cytokines), but
there was just statistically significant difference between IL -6 and IL -8. Thus, we can
conclude that 17% EDTA for 5 minutes without stirring and hyaluronic acid showed
less cytotoxicity index fibroblasts of the periodontal ligament, but there was
inflammatory response by IL -6 and IL-8 expression .
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unesp.br:11449/137914 |
| Date | 17 February 2016 |
| Creators | Moreira, Camila Said [UNESP] |
| Contributors | Universidade Estadual Paulista (UNESP), Camargo, Carlos Henrique Ribeiro Camargo [UNESP] |
| Publisher | Universidade Estadual Paulista (UNESP) |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UNESP, instname:Universidade Estadual Paulista, instacron:UNESP |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 600 |
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