Orientador: Ana Paula de Souza Pardo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-13T02:34:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2009 / Resumo: Nosso objetivo neste estudo foi investigar o padrão de metilação na posição CpG -686 do promotor da MMP-3 em células epiteliais da mucosa bucal e células do tecido gengival. Os voluntários foram divididos em três grupos: indivíduos com periodonto saudável não fumantes e indivíduos com periodontite crônica fumantes e não-fumantes. Também foi nosso objetivo analisar os níveis de expressão de RNAm da MMP-3 nestes indivíduos. Para isto, DNA foi purificado de células epiteliais bucais obtidas após bochecho com dextrose 3%. DNA e RNA foram purificados de células gengivais obtidas de biópsias de tecido gengival. O padrão de metilação na posição -686 do promotor do gene da MMP-3 foi investigado utilizando a enzima de restrição sensível à metilação HpaII, em seguida foi realizada a PCR e eletroforese. Amostras metiladas apresentaram amplificação positiva e amostras não-metiladas não apresentaram amplificação pela PCR. A análise estatística entre o padrão de metilação encontrado nas amostras dos diferentes grupos foi realizada pelo teste de c2 ao nível de 5%. A expressão relativa da MMP-3 foi analisada em aparelho real time PCR e a análise estatística foi realizada pelo teste de Kruskal-Wallis ao nível de 5%. Não foi observado diferença no padrão de metilação encontrado nas células analisadas dos diferentes grupos. A freqüência de padrão de não-metilação encontrada nas células epiteliais de mucosa bucal foi 18,3% no grupo controle, 12,5% em periodontite fumante e 9,7% em periodontite não fumante, já a taxa de nãometilação nas células do tecido gengival foi maior em todos os grupos 28% no grupo controle, 38% no grupo periodontite fumantes e 27% no grupo periodontite não-fumantes.Também não foi observada diferença na expressão genética da MMP-3 entre estes grupos. Concluímos que não há associação entre o padrão de metilação encontrado na posição -686 e a periodontite crônica em fumantes ou
não-fumantes / Abstract: The objective in this study was to investigate the methylation status of CpG site at position -686 of MMP-3 gene promoter in epithelial cells from oral mucosa and gingival tissue cells. Subjects were divided into three groups: nonsmokers healthy subjects and non-smokers and smokers subjects with chronic periodontitis. Another objective was also to examine the levels of mRNA expression of MMP-3 in these individuals. For this, DNA was purified from buccal epithelial cells, that were obtained after oral rinse with 3% dextrose and DNA and RNA were purified from gingival cells that were obtained from biopsies of gingival tissue. The methylation status at position -686 of MMP-3 gene promoter was investigated using the restriction enzyme sensitive to methylation HpaII, subsequently the PCR and electrophoresis was performed. Methylated samples showed positive bands after PCR and non-methylated samples showed no bands after PCR. The statistical analysis between the methylation status found in this samples in each groups was performed by c 2 test at 5% level. The relative expression of MMP-3 was examined by real time PCR and statistical analysis was performed by Kruskal-Wallis test at 5 % level. There was not difference in the methylation status found in the cells from each different group. The frequency of the unmethylated status found in the epithelial oral cells was 18,3% in healthy subjects non-smokers, 12,5 % subjects with chronic periodontitis smokers and 9,7% non-smokers. And the unmethylated status of gingival tissue cells was higher in all groups: 28% in healthy subjects non-smokers, 38% in smokers subjects with chronic periodontitis and 27% in non-smokers subjects with chronic periodontitis. Also, there was not difference in genetic expression of MMP-3 among these groups. We conclude that there is not association between the methylation status observed at position -686 of MMP3 gene promoter and chronic periodontitis in smokers and non-smokers. in all groups: 28% in healthy subjects non-smokers, 38% in smokers subjects with chronic periodontitis and 27% in non-smokers subjects with chronic periodontitis. Also, there was not difference in genetic expression of MMP-3 among these groups. We conclude that there is not association between the methylation status observed at position -686 of MMP3 gene promoter and chronic periodontitis in smokers and non-smokers / Mestrado / Histologia e Embriologia / Mestre em Biologia Buco-Dental
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unicamp.br:REPOSIP/288556 |
| Date | 13 August 2018 |
| Creators | Damm, Gilcy Raymundo |
| Contributors | UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS, de Souza, Ana Paula, 1975-, Santos, Maria Cristina Leme Godoy dos, Line, Sergio Roberto Peres |
| Publisher | [s.n.], Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Odontologia de Piracicaba, Programa de Pós-Graduação em Biologia Buco-Dental |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | 55 f. : il., application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da Unicamp, instname:Universidade Estadual de Campinas, instacron:UNICAMP |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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