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Antígenos candidatos à vacina contra as formassanguíneas de Plasmodium vivax: avaliação da memória imunológica de longa duração

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Previous issue date: 2016 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil / A invasão dos eritrócitos pelos parasitos da malária
garante o sucesso da infecção
humana e, consequentemente, o desenvolvimento da doe
nça clínica. Desse modo,
existe grande interesse no desenvolvimento de vacina
s que possam induzir
anticorpos que bloqueiem o ciclo sanguíneo do parasito
. No caso de
Plasmodium
vivax
, o principal antígeno candidato à vacina é a
Duffy binding protein II
(DBPII),
único ligante conhecido para a invasão dos eritrócit
os humanos. Embora anticorpos
naturalmente adquiridos contra a DBPII induzam proteçã
o, faz-se necessário avaliar
se esta resposta gera memória imunológica de longa dur
ação. O trabalho aqui
desenvolvido teve como objetivo principal avaliar s
e a DBPII e outros antígenos
candidatos à vacina contra
P. vivax
induzem resposta imune humoral (anticorpos e
células B de memória, MBCs) de longa-duração. A popul
ação de estudo foi
constituída de indivíduos com história de exposição
única a
P. vivax
, ocorrida em
2003, durante um surto de transmissão autóctone na
região metropolitana de Belo
Horizonte, Minas Gerais. Para tal, foram selecionado
s indivíduos que se infectaram
(casos, n=13) ou não (não-casos, n=12) durante o pe
ríodo de transmissão. Como
controle negativo, foram incluídos indivíduos nunca
expostos à malária (BH, n=9). A
resposta de anticorpos foi avaliada pela sorologia c
onvencional (ELISA) utilizando
como antígenos diferentes variantes da DBPII (Acre1 e Sa
l1) bem como outros
antígenos candidatos à vacina (MSP1
19
e EBP2). A resposta de células B de
memória para os mesmos antígenos foi avaliada pelo e
nsaio imunoenzimático que
detecta MBCs diferenciadas em células secretoras de
anticorpos IgG (ELISpot).
Após padronizar o ensaio de ELISpot com sucesso, os n
ossos resultados
demonstram que: (1) MBCs antígeno-específicas de vida-
longa (12 anos após
exposição) foram detectadas em todos os indivíduos
do grupo caso e em parte dos
indivíduos não-casos (58%), o que sugere que infecções
assintomáticas podem ter
ocorrido na época do surto; (2) a resposta celular
de DBPII foi variante-específica,
sendo a variante Acre1 (frequente na Amazônia brasile
ira) a mais imunogênica.
Neste contexto, a cepa de referência Sal1 ou um antí
geno sintético desta cepa
(DEKnull) apresentaram pouca ou nenhuma imunogenicidad
e; (3) a MSP1
19
,
presente na superfície do parasito, foi o antígeno m
ais imunogênico, seguido da
EBP2, proteína recém-descrita em
P. vivax
; (4) em relação a sorologia convencional,
anticorpos IgG para os diferente antígenos testados n
ão perduraram após 12 anos
de exposição única a
P. vivax
.
Em conjunto, os resultados aqui apresentados
permitiram concluir que uma única e breve exposição
a
P. vivax
é capaz de induzir
MBCs antígeno-específicas de vida longa, reforçando a
importância de se estudar
estas células na avaliação da memória imunológica da
malária, particularmente,
aquela induzida por antígenos candidatos à vacina. / Erythrocyte invasion by malaria parasites is a key e
vent in ensuring human infeccion
and clinical development of the disease. Therefore,
there is great interest in
generating blocking antibodies through a blood-stage vac
cine, preventing erythocyte
invasion.
Plasmodium vivax
Duffy binding protein region II (DBPII) is the only kn
own
ligand for human reticulocyte invasion, hence being a
n attractive vaccine candidate
against asexual blood-stage
P. vivax
. Although there is evidence that naturally
acquired anti-DBPII antibodies induce protection, it i
s necessary to access if this
response produces sustained long-lasting immunologica
l memory. Thereafter, the
present work aimed to evaluate whether DBPII and other
P. vivax
vaccine candidates
induce long-lasting humoral immune response (antibod
ies and memory B cells,
MBCs). For this purpose, we studied a population with a
single
P. vivax
exposure in
2003, during an autochthonous outbreak in Minas Gera
is state, a non-endemic area
of Brazil. We selected 25 individuals exposed to the
outbreak being 13 with
confirmed
P. vivax
infection (cases) and 12 who had not being diagnosed
with
malaria (non-cases). As negative control, were includ
ed 9 individuals never exposed
to malaria (residents in Belo Horizonte). Antibody re
sponses to
P. vivax
blood
antigens were evaluated by conventional serology (ELISA),
focusing on two DBPII
variants (Acre1 e Sal1) and other vaccine candidates
(MSP1
19
e EBP2). B cell
memory responses to the same antigens were evaluated
through Enzyme-Linked
ImmunoSpot (ELISpot) targeting IgG secreting cells. After
stablishment of the
ELISpot assay, our results showed that: (1) long-last
ing antigen-specific MBCs were
detected 12 years after exposure in all of the case
s and in part of the non-cases
(58%), wich suggests the occurrence of asymptomatic i
nfections during the outbreak;
(2) cellular response to DBPII was variant-specific, wi
th greater immunogenicity of
variant Acre1 (most frequent in the Amazon region). Re
garding cellular response, the
reference strain Sal1 and the synthetic construct (
DEKnull) showed low or absence
of immunogenicity; (3) MSP1
19
, presente in the parasite’s surfasse, was highly
immunogenic, followed by EBP2,
P. vivax
’s new predicted protein; (4) regarding
conventional serology, IgG antibody responses to the
different antigens here tested
did not last after 12 years of exposure to
P. vivax
. Altogether our results showed that
a single brief exposure to
P. vivax
is able to induce antigen-specific long-lasting
MBCs, reinforcing the importance of this cells in acc
essing immunological memory in
malaria, particularly, that induced by vaccine cand
idates.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/15743
Date January 2016
CreatorsMelo, Ana Luiza de Oliveira
ContributorsKano, Flora Satiko, Carvalho, Luzia Helena, Fiuza, Jacqueline Araújo, Bueno, Lílian Lacerda, Silva, Marcilene Rezende, Carvalho, Luzia Helena
Publishers.n.
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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