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Ebenézer de Mello Cruz Inibição da arginase de Leishmania 2009.pdf: 2063950 bytes, checksum: 15d7234f96fe97bc8cfe6618e9985787 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-16T21:03:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Ebenézer de Mello Cruz Inibição da arginase de Leishmania 2009.pdf: 2063950 bytes, checksum: 15d7234f96fe97bc8cfe6618e9985787 (MD5)
Previous issue date: 2009 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / A leishmaniose atinge cerca de 12 milhões de pessoas no mundo com aproximadamente 60
mil mortes por ano. Os fármacos utilizados são ineficazes e apresentam graves efeitos
colaterais, tornado necessária a busca por novos fármacos. A busca por princípios bioativos
torna-se mais eficaz quando direcionada pelo fracionamento guiado por bioensaios
específicos. Um alvo promissor para busca por novos fármacos é a enzima arginase, pois a
Leishmania deficiente em arginase é incapaz de produzir poliaminas, que são essenciais para
a proliferação, diferenciação e síntese de macromoléculas, sendo assim o alvo selecionado
para direcionar o fracionamento do extrato etanólico de Cecropia pachystachya, visto que já
foi relatada a inibição da arginase de Leishmania (L.) amazonensis por extratos desta espécie
vegetal. Neste trabalho foi demonstrado que o extrato acetato de etila apresentou uma forte
inibição da arginase de L. (L.) amazonensis, uma leve inibição da arginase de Rattus
norvegicus e não apresentou toxicidade em esplenócitos. Com a análise ultraestrutural foi
possível inferir que a inibição da arginase poderia estar provocando estresse oxidativo, visível
com a formação de concreção eletrondensa na matriz mitocondrial e desorganização do k-
DNA, possivelmente devido à inibição da arginase e conseqüente diminuição da biossíntese
de poliaminas e tripanotiona. Em análise computacional, as prováveis substâncias presentes
no extrato acetato de etila (catequina, ácido clorogênico, epicatequina, isoorientina,
isoquercetrina, isovitexina, orientina e procianidina B2) interagem com os aminoácidos ao
redor do sítio ativo da arginase de L. (L.) amazonensis impedindo a entrada do substrato ou a
saída dos produtos resultantes da reação o que acarretaria diminuição na velocidade máxima
da reação. As frações da CLC03 parecem interferir em um outro mecanismo que promova a
morte do parasito além da inibição da arginase. Após os fracionamentos realizados, as
amostras analisadas ainda se mostravam como misturas quando analisadas por CLAE e RMN
de 1H. A diminuição do crescimento das formas promastigotas de L. (L.) amazonensis pode
também promover a diminuição da infecção em macrófagos, mediado pela produção de NO. / Leishmaniasis affects approximately 12 million people worldwide with approximately 60,000 deaths per year.
The drugs used are ineffective and have severe side effects, creating to need of the search for new drugs. The
search for bioactive principles becomes more effective when directed by fractionation guided by specific
bioassays. A promising target to search for new drugs is the enzyme arginase, because a arginase deficient
Leishmania is unable to produce polyamines, which are essential for the proliferation, differentiation and
synthesis of macromolecules, thus becoming the target used to direct fractionation of the extract of Cecropia
pachyatachya, as it has been reported on the inhibition of arginase L. (L.) amazonensis. The ethyl acetate extract
showed a strong inhibition of arginase L. (L.) amazonensis, a low inhibition of arginase Rattus novergicus and
didn’t show toxicity to splenocytes. By ultrastructural analysis was possible to infer that the inhibition of
arginase could be causing an oxidative stress, visible with the formation of electrondense deposits in the
mitochondrial matrix and disorganization of k-DNA, possibly due to inhibition of arginase and consequent
decrease of polyamines and trypanothione biosynthesis. In computer analysis, the possible compounds present in
the ethyl acetate extract (catechin, chlorogenic acid, epicatechin, isoorientin, isoquercetrin, isovitexin, orientin
and procyanidin B2) interact with the amino acids surrounding the active site of L. (L.) amazonensis arginase
preventing the entry of the substrate or the release of the reaction products which would result in a decrease in of
velocity reaction. The fractions of CLC03 seem to interfere with another mechanism that promotes the death of
the parasite besides the arginase inhibition. After the fractionations performed, the samples were still mixtures
when as determined by HPLC and 1H NMR. The reduced growth of promastigotes of L. (L.) amazonensis
may be associated to the reduction of infection in macrophages, mediated by NO production.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/4169 |
| Date | January 2009 |
| Creators | Cruz, Ebenézer de Mello |
| Contributors | Santos, Marcos André Vannier dos |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | Ebenézer de Mello Cruz, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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