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Previous issue date: 2007 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / Um acordo internacional de transferência de tecnologia, firmado em 2003, entre a
FIOCRUZ e a GlaxoSmithKline permitiu o acesso de Bio-Manguinhos a um moderno
processo produtivo da vacina tríplice viral (TVV) contra o sarampo, a caxumba e a
rubéola. A produção dessa vacina é parte do compromisso de Bio-Manguinhos com o
programa nacional de auto-suficiência em imunobiológicos, tido como uma meta
prioritária da política de saúde pública do governobrasileiro. A tecnologia aplicada para a produção da TVV envolve o uso de células MRC-5 como substrato celular para a
produção de vírus vacinais da rubéola, particularmente da cepa Wistar RA27/3. A
estirpe MRC-5 é reconhecida como um dos mais importantes substratos celulares para
a produção de vacinas virais, e também tem sido adotada como modelo de estudo para
senescência celular in vitro. A senescência celular é um estágio fisiológico complexo pelo qual, invariavelmente, qualquer população de células somáticas normais passa após atingir um determinado número de mitoses. Esseestágio fisiológico é
caracterizado nas células diplóides pela contenção da capacidade de se multiplicar e
pelo desenvolvimento de alterações morfológicas peculiares, especialmente quando cultivadas in vitro. Com o objetivo de aprimorar omonitoramento de estirpes de células diplóides humanas (HDCS – do inglês Human Diplóide Cells Strains) e contribuir para o estabelecimento da base de conhecimento necessário para a futura aplicação no processo de produção de TVV em Bio-Manguinhos, nós avaliamos culturas de células MRC-5 condicionadas com carnosina, em três diferentes aspectos: cinética de
crescimento, propagação da cepa vacinal, Wistar RA27/3, do vírus da rubéola e a
expressão do marcador biológico de senescência, a enzima β-galactosidase AS (β-gal AS). A avaliação do potencial antioxidante e antisenescente atribuído a carnosina, um dipeptídeo ubíquo à fisiologia de todos os animais superiores, sobre as células MRC-5 pode contribuir para aprimorar os procedimentos de qualificação e controle de células diplóides associados à produção de vacinas, e aindaservir para o desenvolvimento de novos produtos e a pesquisa científica. Aspectos dacinética de crescimento da cultura de células condicionadas com carnosina, observados neste estudo, são discutidos sob
o ponto de vista da teoria do compromisso celular com a senescência. Todas as
culturas de células MRC-5 avaliadas demonstraram a expressão da β-gal AS através do uso de X-Gal ou ONPG como substrato. Não encontramos variações no perfil de
propagação de cepas vacinais do vírus da rubéola que possam ser associadas ao
condicionamento das células MRC-5 com carnosina, nas condições testadas. / An international technology transfer agreement established between FIOCRUZ
and GlaxoSmithKline in 2003, will provide Bio-Manguinhos with access to a modern
manufacturing process for the production of the triple viral vaccine against measles,
mumps and rubella (TVV). The production of TVV forms part of the Bio-Manguinhos
commitment to the self-sufficiency national programin immunobiologicals, within the
Brazilian government public health prioritized policies. The TVV technology employs diploid cells derived from normal human lung tissue(MRC-5) as the substrate for production of the attenuated rubella vaccine virus,Wistar RA27/3. The MRC-5 strain is one of the most important cellular substrates for viral vaccine manufacturing and in addition is widely used as a model for in vitrostudies of cell senescence. Cellular senescence is a physiological stage which normal somatic cells beyond certain
duplication level go through, invariably. Such physiological stage is characterized by
growth arrest and specific morphological changes, commonly, observed in diploid cells
under in vitroculture environment.
Aiming to contribute with the human diploid cells strains (HDCS) monitoring study
and line up with the establishment of the necessaryknowledge base for the conduction
of the TVV production process in Bio-Manguinhos, weevaluated MRC-5 cell cultures conditioned with carnosine under three different aspects: growth kinetics, propagation of the attenuated strain of rubella virus Wistar RA27/3 and the expression of the senescence bio-marker, SA β-Galactosidase. An evaluation of the antioxidant and antisenescence features attributed to carnosine, a dipeptide, ubiquitous to the physiology of all superior animals, over MRC-5 may contribute to the improvement of the qualification and control procedures in production of vaccines, product development and scientific research. Aspects of the growth kineticsof MRC-5 cells conditioned with carnosine observed in this study are discussed in relation to the cellular commitment theory. All MRC-5 tested demonstrated SA β-Galactosidase activity, as verified by enzyme processing of X-Gal or ONPG used as substrate. Additionally, no variations in the propagation profile of the attenuated rubella virus by treating cells with carnosine could be characterized in this study.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/5812 |
| Date | January 2007 |
| Creators | Cunha, Luiz Antônio da |
| Contributors | Moraes e Souza, Márcia Teresinha Baroni, Cabral, Maulori Curié, Pereira, Geraldo Moura Batista, Armoa, Doutor Geraldo Rodrigues Garcia |
| Publisher | Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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