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Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz.Instituto Oswaldo Cruz. Rio de janeiro, RJ, Brasil / A lesão neural é uma das principais consequências da hanseníase e responsável pela
instal ação de deformidades e incapacidades físicas, al ém de contribuir para o esti gma da
doença. O dano ao nervo é exacerbado com o desenvolvimento de episódi os reaci onais (Ti po
I e Ti po II) e está correlaci onado à resposta imunol ógi ca desenvolvida pel o indivíduo, contra
o Mycobacterium leprae – agente eti ol ógico da hanseníase que apresenta especi al tropismo
por macrófagos e células de Schwann (CS) nos nervos periféri cos. Os fatores de crescimento
semelhante à Insulina (IGFs) são hormôni os pept ídi cos implicados no metabolismo, indução
de proliferação, inibição de apoptose e diferenciação de diferentes ti pos cel ulares. Evi dências
da li teratura apontam também propri edades imunomoduladoras e anti -inflamatóri as do IGF-I.
O objetivo do presente estudo vi sa a invest i gação da parti cipação do si stema IGF na infecção
pel o M. leprae. Ini cialmente, verificamos o efei to anti -apoptóti co da bactéri a sobre CS
humanas primárias e da linhagem ST88-14 cul t ivadas em condições livres de soro pel a
inibição da at ivação de caspase-3. Demonstramos, ainda, através de ensai os de
imunoci toquímica, que o bacil o é capaz de induzir a proliferação da CS, tal efei to
provavelmente mediado pel a indução de IGF-I, confi rmado pel a técnica de RT-PCR
quant i tativo e pel a detecção da proteína em sobrenadantes de cul tura através de ensai o
imunoenzimát i co. Na segunda etapa do trabalho, avaliamos a part i cipação do IGF-I ci rculante
na evol ução natural da hanseníase. Utilizando ELISA quimi oluminescente, quantificamos os
níveis de IGF-I, da principal proteína ligadora de IGF (IGFBP-3) e TNF-a no soro de
indivíduos sadi os e pacientes que desenvolveram ou não quadros reacionais ao l ongo do tratamento. No caso dos pacientes reaci onais, a dosagem de IGF-I, IGFBP-3 e TNF-a fo i
realizada em duas etapas: i ) no momento do diagnóstico e ii ) durante o aparecimento da
reação, antes do tratamento específico. Ini cialmente, numa comparação entre paci entes que
não desenvolveram reação, verificamos que 81% e 72% dos paci entes lepromatosos (LL)
apresentaram níveis de IGF-I e IGFBP-3, respectivamente, abaixo do normal por i dade,
diferentemente dos paci entes com outras formas clínicas. Dentre os pacientes reaci onais, 93%
e 86% do grupo BL também apresentou níveis de IGF-I e IGFBP-3, respectivamente, abaixo
do normal por i dade, diferentemente do grupo BL não-reaci onal , que apresentou níveis de
IGFs similares aos indivíduos sadi os. Durante o desenvolvimento dos epi sódi os reaci onais,
houve uma queda dos níveis de IGF-I, IGFBP-3 e da rel ação IGF/TNF-a no grupo LL com
reação ti po II. Já no grupo de paci entes BL, observamos um aumento dos níveis de IGF-I e
IGFBP-3, como uma tentativa de alcançar os níveis normais. Nossos dados sugerem a
xv
parti cipação destes fatores de crescimento endócrinos na ínt ima relação entre bacil o e a CS,
como uma estratégi a de obtenção e manutenção de um nicho favorável de mul t iplicação e,
ainda, os revelam como potenci ais candidatos a bi omarcadores dos episódi os reaci onais na hanseníase. / Neural injury is a maj or consequence of l eprosy and responsible for the disabili t ies
installat i on, beyond to contribute to the st i gma of the disease. The nerve damage is
exacerbated by the devel opment or l eprosy react i ons (Type I and Type II) and is correl ated to
the immune response against Mycobacterium leprae – et i ol ogi c agent of leprosy that has
especial tropism for macrophages and Schwann cells (SC) in peri pheral nerves. Insulin-like
growth factors (IGFs) are pept i de hormones involved in metabolism, proliferati on induct i on,
apoptosis inhibi t i on and cell different i at i on. Evidence from the li t erature also indicate
immunomodulatory and ant i -inflammatory properti es of IGF-I. The aim of this study is to
investi gate the involvement of IGF system in the M. leprae infect i on. Ini t ially, we verified the
ant i -apoptoti c effect of the bacteria on human primary CS and ST88-14 lineage growing in
serum-f ree condi t i ons by inhibi t ing caspase-3 activat i on. It was also demonstrated by
immunocytochemistry, that the bacill us is able to induce the SC proliferat i on, this effect i s
probably mediated by induct i on of IGF-I, as verified by quant i tative RT-PCR and confirmed
by protein detecti on supernatants using immunoenzimat i c assay (ELISA). On the second
phase we evaluate the parti cipat i on of ci rculating IGFs in the natural course of leprosy.
Through chemi ol uminescent ELISA, we quantified the IGF-I, the main IGF binding protein
(IGFBP-3) and TNF-a serum levels in heal t hy individuals and pat i ents who devel oped or not
reacti onal states during the treatment. In the case of react i onal pat i ents, the IGF-I, IGFBP-3
and TNF-a was performed in two steps: i ) at the diagnosis of leprosy and ii) during react i onal
episode, pri or to specific treatment. Ini t i ally, a comparison of nonreact i onal pat i ents, we
found that 81% and 72% of lepromatous l eprosy (LL) showed IGF-I and IGFBP-3 levels,
respectively, bel ow normal for age, unlike pat i ents wi th other clinical forms. Among the
reacti onal pat i ents, 93% and 86% of BL group also showed IGF-I and IGFBP-3 levels,
respectively, bel ow normal for age, unlike the nonreact i onal BL group, wi ch showed similar
levels of IGFs to heal thy individuals. During the devel opment of reacti onal episodes, there
was a decrease in the levels of IGF-I, IGFBP-3 and the IGF/TNF-a rat i o in the LL group wi t h
type II reacti on. In the BL group undergoing type II reacti on, the IGF-I and IGFBP-e levels
increased, as an attempt to reach normal levels. Our data suggest the involvement of these
growth factors in the relat i onship between bacilli and CS as a strategy for obtaining and
maintaining a favorable niche for mul t iplicat i on, and also reveal the IGFs as potencial candidates for bi omarkers of react i onal episodes in leprosy.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/6068 |
| Date | January 2010 |
| Creators | Rodrigues, Luciana Silva |
| Contributors | Sarno, Euzenir Nunes, Antunes, Sérgio, Goto, Hiro, Moura, Carmem Cabanelas Pazos, Illarramendi, Ximena, Monteiro, Clarissa M. Maya, Pessolani, Maria Cristina Vidal |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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