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Estudo do papel do sistema de fatores de crescimento semelhantes à Insulina (IGFs) na fisiopatogenia da hanseníase

Rodrigues, Luciana Silva January 2010 (has links)
Submitted by Tatiana Silva (tsilva@icict.fiocruz.br) on 2012-12-27T17:57:17Z No. of bitstreams: 1 luciana_s_rodrigues_ioc_bcm_0026_2010.pdf: 8319063 bytes, checksum: 23ce271789168f4d9723b9a7df6ffe11 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-12-27T17:57:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 luciana_s_rodrigues_ioc_bcm_0026_2010.pdf: 8319063 bytes, checksum: 23ce271789168f4d9723b9a7df6ffe11 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz.Instituto Oswaldo Cruz. Rio de janeiro, RJ, Brasil / A lesão neural é uma das principais consequências da hanseníase e responsável pela instal ação de deformidades e incapacidades físicas, al ém de contribuir para o esti gma da doença. O dano ao nervo é exacerbado com o desenvolvimento de episódi os reaci onais (Ti po I e Ti po II) e está correlaci onado à resposta imunol ógi ca desenvolvida pel o indivíduo, contra o Mycobacterium leprae – agente eti ol ógico da hanseníase que apresenta especi al tropismo por macrófagos e células de Schwann (CS) nos nervos periféri cos. Os fatores de crescimento semelhante à Insulina (IGFs) são hormôni os pept ídi cos implicados no metabolismo, indução de proliferação, inibição de apoptose e diferenciação de diferentes ti pos cel ulares. Evi dências da li teratura apontam também propri edades imunomoduladoras e anti -inflamatóri as do IGF-I. O objetivo do presente estudo vi sa a invest i gação da parti cipação do si stema IGF na infecção pel o M. leprae. Ini cialmente, verificamos o efei to anti -apoptóti co da bactéri a sobre CS humanas primárias e da linhagem ST88-14 cul t ivadas em condições livres de soro pel a inibição da at ivação de caspase-3. Demonstramos, ainda, através de ensai os de imunoci toquímica, que o bacil o é capaz de induzir a proliferação da CS, tal efei to provavelmente mediado pel a indução de IGF-I, confi rmado pel a técnica de RT-PCR quant i tativo e pel a detecção da proteína em sobrenadantes de cul tura através de ensai o imunoenzimát i co. Na segunda etapa do trabalho, avaliamos a part i cipação do IGF-I ci rculante na evol ução natural da hanseníase. Utilizando ELISA quimi oluminescente, quantificamos os níveis de IGF-I, da principal proteína ligadora de IGF (IGFBP-3) e TNF-a no soro de indivíduos sadi os e pacientes que desenvolveram ou não quadros reacionais ao l ongo do tratamento. No caso dos pacientes reaci onais, a dosagem de IGF-I, IGFBP-3 e TNF-a fo i realizada em duas etapas: i ) no momento do diagnóstico e ii ) durante o aparecimento da reação, antes do tratamento específico. Ini cialmente, numa comparação entre paci entes que não desenvolveram reação, verificamos que 81% e 72% dos paci entes lepromatosos (LL) apresentaram níveis de IGF-I e IGFBP-3, respectivamente, abaixo do normal por i dade, diferentemente dos paci entes com outras formas clínicas. Dentre os pacientes reaci onais, 93% e 86% do grupo BL também apresentou níveis de IGF-I e IGFBP-3, respectivamente, abaixo do normal por i dade, diferentemente do grupo BL não-reaci onal , que apresentou níveis de IGFs similares aos indivíduos sadi os. Durante o desenvolvimento dos epi sódi os reaci onais, houve uma queda dos níveis de IGF-I, IGFBP-3 e da rel ação IGF/TNF-a no grupo LL com reação ti po II. Já no grupo de paci entes BL, observamos um aumento dos níveis de IGF-I e IGFBP-3, como uma tentativa de alcançar os níveis normais. Nossos dados sugerem a xv parti cipação destes fatores de crescimento endócrinos na ínt ima relação entre bacil o e a CS, como uma estratégi a de obtenção e manutenção de um nicho favorável de mul t iplicação e, ainda, os revelam como potenci ais candidatos a bi omarcadores dos episódi os reaci onais na hanseníase. / Neural injury is a maj or consequence of l eprosy and responsible for the disabili t ies installat i on, beyond to contribute to the st i gma of the disease. The nerve damage is exacerbated by the devel opment or l eprosy react i ons (Type I and Type II) and is correl ated to the immune response against Mycobacterium leprae – et i ol ogi c agent of leprosy that has especial tropism for macrophages and Schwann cells (SC) in peri pheral nerves. Insulin-like growth factors (IGFs) are pept i de hormones involved in metabolism, proliferati on induct i on, apoptosis inhibi t i on and cell different i at i on. Evidence from the li t erature also indicate immunomodulatory and ant i -inflammatory properti es of IGF-I. The aim of this study is to investi gate the involvement of IGF system in the M. leprae infect i on. Ini t ially, we verified the ant i -apoptoti c effect of the bacteria on human primary CS and ST88-14 lineage growing in serum-f ree condi t i ons by inhibi t ing caspase-3 activat i on. It was also demonstrated by immunocytochemistry, that the bacill us is able to induce the SC proliferat i on, this effect i s probably mediated by induct i on of IGF-I, as verified by quant i tative RT-PCR and confirmed by protein detecti on supernatants using immunoenzimat i c assay (ELISA). On the second phase we evaluate the parti cipat i on of ci rculating IGFs in the natural course of leprosy. Through chemi ol uminescent ELISA, we quantified the IGF-I, the main IGF binding protein (IGFBP-3) and TNF-a serum levels in heal t hy individuals and pat i ents who devel oped or not reacti onal states during the treatment. In the case of react i onal pat i ents, the IGF-I, IGFBP-3 and TNF-a was performed in two steps: i ) at the diagnosis of leprosy and ii) during react i onal episode, pri or to specific treatment. Ini t i ally, a comparison of nonreact i onal pat i ents, we found that 81% and 72% of lepromatous l eprosy (LL) showed IGF-I and IGFBP-3 levels, respectively, bel ow normal for age, unlike pat i ents wi th other clinical forms. Among the reacti onal pat i ents, 93% and 86% of BL group also showed IGF-I and IGFBP-3 levels, respectively, bel ow normal for age, unlike the nonreact i onal BL group, wi ch showed similar levels of IGFs to heal thy individuals. During the devel opment of reacti onal episodes, there was a decrease in the levels of IGF-I, IGFBP-3 and the IGF/TNF-a rat i o in the LL group wi t h type II reacti on. In the BL group undergoing type II reacti on, the IGF-I and IGFBP-e levels increased, as an attempt to reach normal levels. Our data suggest the involvement of these growth factors in the relat i onship between bacilli and CS as a strategy for obtaining and maintaining a favorable niche for mul t iplicat i on, and also reveal the IGFs as potencial candidates for bi omarkers of react i onal episodes in leprosy.
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Relação entre a irregularidade do tratamento poliquimioterápico e a ocorrência de episódios reacionais em pacientes com Hanseníase

Silva, Mariana França da Cunha e January 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2015-11-18T13:16:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 mariana_silva_ioc_mest_2014.pdf: 7745842 bytes, checksum: 90856acef322cddd7842fb24e41f0eb8 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015-10-29 / A hanseníase é uma doença infecciosa crônica que se caracteriza por um espectro de manifestações clínicas dermatoneurológicas associadas com diferentes padrões de resposta imune. A baixa aderência é responsável pela manutenção de fontes potenciais de infecção, complicações irreversíveis, cura incompleta e, adicionalmente, pode conduzir a resistência a múltiplas drogas. Muitos fatores são responsáveis pela irregularidade do tratamento ou abandono: fatores socioeconômicos, escolaridade, conhecimento sobre a doença, a falta de eficiência dos serviços de saúde, demografia, efeitos colaterais das drogas, alcoolismo, episódios reacionais , entre outros. O estudo realizado foi retrospectivo, de coorte, a partir do levantamento de dados dos pacientes diagnosticados com hanseníase no Ambulatório Souza Araújo /Fiocruz,Rio de Janeiro, que receberam tratamento padrão com poliquimioterapia entre os anos de 1997 e 2007.O presente estudo analisou as características epidemiológicas, clínicas e laboratoriais do grupo em abandono do tratamento com a poliquimioterapia (PQT) e as características do grupo alta por cura. A proporção de abandono foi baixa, provavelmente em razão do local do estudo ser um centro de referência para tratamento e pesquisa Houve um predomínio do sexo masculino nos dois grupos,a idade média em ambos os grupos foi em torno de 40 anos que corresponde a faixa etária economicamente ativa da população, o nível de escolaridade no grupo em abandono e dos que obtiveram alta por cura foi baixo, ocorreu predomínio de paucibacilares nos dois grupos, porém a maioria apresentou Mitsuda negativo.O grau de incapacidade zero e o índice baciloscópico zero predominaram nos dois grupos .Observou-se maior proporção de casos de abandono nos primeiros meses de tratamento. Avaliou-se também a relação entre o uso irregular da medicação poliquimioterápica e a ocorrência de reações hansênicas, bem como características epidemiológicas, clínicas e laboratoriais dos diferentes grupos de tratamento com PQT. Foram considerados três grupos distintos: grupo 1 - pacientes com término do tratamento com a poliquimioterapia, em até seis para pacientes paucibacilares e 12 meses para os multibacilares, tratamento considerado como regular e ideal pela OMS e Ministério da Saúde; grupo 2 - pacientes com término de tratamento entre 6 e 9 meses para paucibacilares e entre 12 e 18 meses para multibacilares, grupo ainda considerado como regular pela OMS / Ministério da Saúde e grupo 3 - pacientes tratados com mais de 9 meses e mais de 18 meses para paucibacilares e multibacilares respectivamente, grupo considerado irregular pela OMS e Ministério da Saúde O grupo irregular representou apenas 3,3% do total de pacientes observados, não houve diferença entre os grupos em relação ao sexo e idade, foi possível verificar a influência da baciloscopia > 3 tanto no início do tratamento quanto ao final como um importante fator de desenvolvimento das reações após o tratamento e o teste Mitsuda positivo apresentou fator protetor no desenvolvimento das reações. Não houve significância estatística no desenvolvimento das reações no grupo de tratamento irregular, provavelmente pelo predomínio de formas paucibacilares encontradas nesse grupo, o que foi uma limitação do estudo dificultando a análise do desfecho / Leprosy is a chronic infectious disease that is cha racterized by a spectrum of dermatoneurological cli nical manifestations associated with different patterns o f immune response . The low adhesion is responsible for the remaining potential sources of infection, irreversi ble complications, incomplete cure and, additionall y, may lead to resistance to multiple drugs. Many factors are resp onsible for the irregular or dropout treatment: soc ioeconomic factors, education level, knowledge about the disea se, lack of efficiency of health services, demograp hics, side effects of drugs, alcoholism, leprosy reactions, am ong others. This study is a retrospective cohort study based on a survey of data from patients diagnosed with lepro sy at the Ambulatório Souza Araújo / FIOCRUZ , Rio de Janeiro , who received standard treatment with mult idrug therapy between 1997 and 2007.The present wor k examines the epidemiological, clinical and laborato ry characteristics of the group in abandonment of t reatment with multidrug therapy ( MDT ) and the characterist ics of the group adherent to treatment. The proport ion of dropout was low, probably because the study site is a referral center for treatment and research. Ther e was a predominance of males in both groups, the mean age in both groups was around 40 years which correspond s to the economically active age group of the population , the level of education in the group was leaving a nd stick down, there was a predominance of paucibacillary in both groups, but the majority showed Mitsuda negat ivo. Zero degree of disability and the bacterial index z ero predominated in both groups. A higher proportion of cases of abandonment in the first months of treatment. Stu dy evaluated the relationship between noncompliance MDT and the occurrence of leprosy reactions , as well a s epidemiological, clinical and laboratory characte ristics of the different groups of treatment with MDT. Three group s were considered , Group 1 - Patients with end of treatment with multidrug therapy , within six to 12 months fo r paucibacillary and multibacillary respectively , treatment Lawful and ideal by WHO and Ministry of Health Group 2 - Patients with end of treatment between 6 and 9 months for paucibacillary and between 12 and 18 mon ths for multibacillary group also considered regula r by WHO / Ministry of Health and Group 3 - Patients treated with more than 9 months and over 18 months for paucibacillary and multibacillary respectively , ir regular group considered by WHO and Ministry of Hea lth. The irregular group represented only 3.3% of patients o bserved, there was no difference between groups in relation to sex and age, we observed the influence of smear> 3 both at the beginning as at the end of treatment as an important factor development of reactions after tre atment and positive Mitsuda test showed a protectiv e factor in the development of reactions. There was no stati stical significance in the development of reactions in the group of irregular treatment, probably due to the predomi nance of paucibacillary forms found in this group, which was a limitation of study making it difficult to analyse the outcome.
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O comportamento clínico e neurofisiológico da neuropatia durante os episódios reacionais da hanseníase / Clinical and neurophysiological behave in leprosy reactions episodes in leprosy

Paula Saraiva Manhães 25 August 2011 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A hanseníase, uma doença conhecida por suas lesões de pele anestésicas, é a principal causa de neuropatia periférica nos países endêmicos. Os episódios reacionais são classicamente conhecidos por promover piora da função nervosa através das chamadas neurites que variam de quadros exuberantes a assintomáticos. Estas características da neuropatia tornam o diagnóstico precoce excepcionalmente desafiador assim como a necessidade de se intervir para se prevenir lesões permanentes nos nervos. Este estudo clínico, prospectivo, foi realizado selecionando-se pacientes com hanseníase, independente da forma clínica, no Ambulatório Souza Araujo, Fiocruz, Rio de Janeiro, que apresentavam episódios reacionais. O objetivo foi estudar o perfil neurológico clínico, eletroneurofisiológico e por imagem do nervo antes e após o tratamento das reações. Foram avaliados vinte e cinco pacientes levando-se em conta: exame neurológico, avaliação fisioterápica, estudo de condução nervosa, avaliação de espessura e ecogenicidade nervosa pelo método ultrassonográfico, fluxometria por laser Doppler e teste quantitativo da sensibilidade durante e um ano após o tratamento da reação. Estes pacientes foram divididos em três grupos: oito pacientes com neurite aguda, nove pacientes com neurite silenciosa e oito pacientes com reação cutânea sem neurite. Nos pacientes com episódios reacionais, observou-se predomínio do sexo masculino (60%), do grupo multibacilar (80%) e da forma clínica borderline-lepromatosa (36%). A neurite isolada foi o tipo de reação mais frequente, seguida de neurite associada à reação do tipo1, seguida da neurite associada à reação do tipo 2. O nervo motor mais acometido por neurite foi o fibular seguido pelo ulnar, enquanto o nervo sensitivo mais acometido foi o sural. O padrão eletroneuromiográfico característico dos episódios reacionais foi a mononeurite múltipla. A ultrassonografia, a fluxometria por laser Doppler e o teste quantitativo de sensibilidade, associados à clínica e ao estudo da condução nervosa, foram tidos como exames úteis para avaliação inicial e para acompanhar o tratamento dos episódios reacionais. Após o tratamento, foi constatada melhora nos parâmetros referentes à função motora, mas o mesmo não ocorreu para sensibilidade. Com esse estudo, observa-se a necessidade de acompanhamento multidiciplinar com exames especializados para os pacientes com hanseníase a fim de diagnóstico de reação e tratamento precoce evitando sequelas neurológicas. / Leprosy, a disease known for its characteristic insensitive skin patches, is the main cause of peripheral neuropathy in endemic countries. Leprosy reactions are well-known for promoting nerve function impairment by neuritis which range from asymptomatic to exuberant clinical pictures. These neuropathy characteristics make early diagnosis exceptionally challenging as the need to intervene in order to prevent permanent nerve damage. This prospective clinical study was done selecting leprosy patients regardless their clinical form, who had presented leprosy reaction at the Souza Araújo Out-patient clinic, FIOCRUZ, Rio de Janeiro. The objective was to study the neurologic, the neurophysiological, and the nerve image pattern before and after the treatment of leprosy reactions.Twenty five patients at the time of leprosy reactions and one year after the reaction treatment had been evaluated by means of neurologic examination, physiotherapyc examination, nerve conduction study, evaluation of thickness and echogenicity of the committed nerves through the use of ultrasound, Laser Doppler fluxometry, and also by the quantitative sensory test. The patients were divided in three groups: eight patients had acute neuritis, nine had silent neuritis, and eight had skin reaction without neuritis.This study was approved by the ethics committee of the Oswaldo Cruz Foundation.In the evaluated patients presenting reactional episodes there had been a male predominance (60%), a multibacillary group predominance (80%) and a borderline-lepromatosus (36%) clinic form predominance. The isolated neuritis was the most frequent leprosy reaction, followed by neuritis associated with type 1 reaction, and by neuritis associated with type 2 reaction. The most common motor nerve affected by neuritis was peroneal, followed by ulnar nerve whereas most common sensory nerve affected was sural.The characteristic electroneuromyography pattern of leprosy reactions was multiplex mononeuropathy. The ultrasound, Laser Doppler fluxometry, and the quantitative sensory test together with the clinical examination and with the nerve conduction study were helpful exams for initial evaluation and follow-up treatment of leprosy reaction. A motor function improvement had been observed after the treatment but the same didnt occur regarding the sensory function.Throughout these studies it had been observed a need of a multidiscipline follow up for leprosy patients with specialized exams in order to have reaction diagnoses and early treatment avoiding neurological sequelae
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O comportamento clínico e neurofisiológico da neuropatia durante os episódios reacionais da hanseníase / Clinical and neurophysiological behave in leprosy reactions episodes in leprosy

Paula Saraiva Manhães 25 August 2011 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A hanseníase, uma doença conhecida por suas lesões de pele anestésicas, é a principal causa de neuropatia periférica nos países endêmicos. Os episódios reacionais são classicamente conhecidos por promover piora da função nervosa através das chamadas neurites que variam de quadros exuberantes a assintomáticos. Estas características da neuropatia tornam o diagnóstico precoce excepcionalmente desafiador assim como a necessidade de se intervir para se prevenir lesões permanentes nos nervos. Este estudo clínico, prospectivo, foi realizado selecionando-se pacientes com hanseníase, independente da forma clínica, no Ambulatório Souza Araujo, Fiocruz, Rio de Janeiro, que apresentavam episódios reacionais. O objetivo foi estudar o perfil neurológico clínico, eletroneurofisiológico e por imagem do nervo antes e após o tratamento das reações. Foram avaliados vinte e cinco pacientes levando-se em conta: exame neurológico, avaliação fisioterápica, estudo de condução nervosa, avaliação de espessura e ecogenicidade nervosa pelo método ultrassonográfico, fluxometria por laser Doppler e teste quantitativo da sensibilidade durante e um ano após o tratamento da reação. Estes pacientes foram divididos em três grupos: oito pacientes com neurite aguda, nove pacientes com neurite silenciosa e oito pacientes com reação cutânea sem neurite. Nos pacientes com episódios reacionais, observou-se predomínio do sexo masculino (60%), do grupo multibacilar (80%) e da forma clínica borderline-lepromatosa (36%). A neurite isolada foi o tipo de reação mais frequente, seguida de neurite associada à reação do tipo1, seguida da neurite associada à reação do tipo 2. O nervo motor mais acometido por neurite foi o fibular seguido pelo ulnar, enquanto o nervo sensitivo mais acometido foi o sural. O padrão eletroneuromiográfico característico dos episódios reacionais foi a mononeurite múltipla. A ultrassonografia, a fluxometria por laser Doppler e o teste quantitativo de sensibilidade, associados à clínica e ao estudo da condução nervosa, foram tidos como exames úteis para avaliação inicial e para acompanhar o tratamento dos episódios reacionais. Após o tratamento, foi constatada melhora nos parâmetros referentes à função motora, mas o mesmo não ocorreu para sensibilidade. Com esse estudo, observa-se a necessidade de acompanhamento multidiciplinar com exames especializados para os pacientes com hanseníase a fim de diagnóstico de reação e tratamento precoce evitando sequelas neurológicas. / Leprosy, a disease known for its characteristic insensitive skin patches, is the main cause of peripheral neuropathy in endemic countries. Leprosy reactions are well-known for promoting nerve function impairment by neuritis which range from asymptomatic to exuberant clinical pictures. These neuropathy characteristics make early diagnosis exceptionally challenging as the need to intervene in order to prevent permanent nerve damage. This prospective clinical study was done selecting leprosy patients regardless their clinical form, who had presented leprosy reaction at the Souza Araújo Out-patient clinic, FIOCRUZ, Rio de Janeiro. The objective was to study the neurologic, the neurophysiological, and the nerve image pattern before and after the treatment of leprosy reactions.Twenty five patients at the time of leprosy reactions and one year after the reaction treatment had been evaluated by means of neurologic examination, physiotherapyc examination, nerve conduction study, evaluation of thickness and echogenicity of the committed nerves through the use of ultrasound, Laser Doppler fluxometry, and also by the quantitative sensory test. The patients were divided in three groups: eight patients had acute neuritis, nine had silent neuritis, and eight had skin reaction without neuritis.This study was approved by the ethics committee of the Oswaldo Cruz Foundation.In the evaluated patients presenting reactional episodes there had been a male predominance (60%), a multibacillary group predominance (80%) and a borderline-lepromatosus (36%) clinic form predominance. The isolated neuritis was the most frequent leprosy reaction, followed by neuritis associated with type 1 reaction, and by neuritis associated with type 2 reaction. The most common motor nerve affected by neuritis was peroneal, followed by ulnar nerve whereas most common sensory nerve affected was sural.The characteristic electroneuromyography pattern of leprosy reactions was multiplex mononeuropathy. The ultrasound, Laser Doppler fluxometry, and the quantitative sensory test together with the clinical examination and with the nerve conduction study were helpful exams for initial evaluation and follow-up treatment of leprosy reaction. A motor function improvement had been observed after the treatment but the same didnt occur regarding the sensory function.Throughout these studies it had been observed a need of a multidiscipline follow up for leprosy patients with specialized exams in order to have reaction diagnoses and early treatment avoiding neurological sequelae

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