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Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Curitiba, PR, Brasil / Trypanosoma cruzi, o agente etiológico da doença de Chagas, é um organismoamplamente estudado devido a sua importância médica e também por possuircaracterísticas peculiares que o tornam um bom modelo de estudo para questõesbiológicas básicas. A repressão de RNAs mensageiros em grânulos citoplasmáticoscompostos de complexos mRNA-proteína (mRNPs) é uma importante via de regulaçãopós transcricional em eucariotos e, recentemente, foi demonstrado que grânulos deRNA estão presentes em T. cruzi. Alguns ortólogos de proteínas humanas envolvidasem mecanismos de regulação foram encontrados nestas estruturas e caracterizados,mas a função e composição de grânulos de mRNA neste modelo experimentalpermanecem desconhecidas. Em humanos e outros eucariotos, condições de estressecomo calor, radiação UV, presença de agentes citotóxicos ou deficiência de glucosepodem induzir a formação de grânulos de estresse, um tipo de estrutura citoplasmáticaenvolvida em repressão, separação e armazenamento de mRNA durante condiçõesadversas. Foram encontradas, em banco de dados de T. cruzi, três sequências deproteínas que possuem certa similaridade estrutural com as proteínas humanas TIA1 eTIAR. Os genes correspondentes foram clonados utilizando-se a tecnologia Gateway®,para a obtenção de proteínas recombinantes. As proteínas purificadas foram utilizadaspara produzir anticorpos policlonais em camundongos, os quais puderam elucidar alocalização celular e padrões de expressão destas proteínas durante o ciclo de vida doparasita. A caracterização destas proteínas pode ajudar a elucidar melhor osmecanismos de regulação pós transcricional em T. cruzi. / Trypanosoma cruzi, the etiological agent of Chagas’ disease, is an organism widely
studied due to its medical importance and particular features that make it an alternative
model for basic biological studies. Repression of messenger RNAs in cytoplasmic
granules composed of mRNA-protein (mRNP) complexes is an important pathway of
posttranscriptional regulation in eukaryotes, and recently was shown that mRNA
granules are present in T. cruzi. A few orthologs of human proteins involved in mRNA
metabolism were found and characterized on these structures, but the function and
composition of mRNA granules in this organism remain unknown. In humans and other
eukaryotes, stress conditions such as heat, UV radiation, presence of cytotoxic agents
or glucose starvation can induce the formation of stress granules, cytoplasmic structures
involved in mRNA repression, sorting and storage during adverse conditions. Three
protein sequences that have a certain structural similarity with the human TIA1/TIAR
proteins were found in the T. cruzi data bank. The genes encoding these three proteins
were cloned using the Gateway® technology and the recombinant proteins were
obtained. The purified proteins were used to produce polyclonal antibodies in mice and
the cellular localization and expression patterns of these proteins during the parasite’s
life cycle were performed. The characterization of these proteins can help to elucidate
the mechanisms of posttranscriptional regulation in T. cruzi.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/8969 |
| Date | January 2012 |
| Creators | Martins, Sharon de Toledo |
| Contributors | Alves, Lysangela Ronalte, Faoro, Helisson, Domingues, Alejandro Corrêa, Zanchin, Nilson Ivo Tonin, Goldenberg, Samuel |
| Publisher | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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