SOUSA, L. M. Desenvolvimento de um modelo experimental de artrite reumatoide na articulação temporomandibular : uma análise das alterações morfológicas. 2017. 72 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Morfofuncionais) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Programa de Pós Graduação em Ciências Morfofuncionais (pcmf.ufc@gmail.com) on 2017-07-07T13:16:58Z
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Previous issue date: 2017 / Rheumatoid arthritis (RA) in temporomandibular joint (TMJ) is an autoimmune
synovitis characterized by synovial hyperplasia and erosion of cartilage and
subchondral bone. Nociceptive, histopathological and immunological alterations of RA
in TMJ are poorly reported in experimental models. Therefore, an experimental model
of chronic RA in TMJ was developed using male Wistar rats (180-220 g). These
received subcutaneous injections on the back of 200 μl of emulsion containing 500 μg
of methylated bovine serum albumin (mBSA) diluted in 100 μl phosphate buffered
saline (PBS) and 100 μl of Freund's Complete Adjuvant (CFA) on day 0. On days 7
and 14, the animals received 200 μl of emulsion containing 500 μg of mBSA diluted in
100 μl PBS and 100 μl of IFA on the back. Intra-articular injections in the left TMJ
(challenges) with solution of mBSA and PBS (10 μg / joint) were performed on days
21, 28 and 35. Hypernociception analysis was performed throughout the induction
period of RA through the Von Frey electronic. The animals were euthanized 7 days
after the first challenge, and 24 hours and 7 days after the second and third challenges.
TMJs and their peri-articular tissues were removed for histopathological and
immunohistochemical for TNFα, IL-1β and IL-6 analysis. Synovial fluid was extracted
for the total cell count and for quantification of TNF-α and IL-1β. Nociceptive threshold
reduction was observed during the entire experimental groups receiving mBSA at TMJ
(p <0.05). The groups euthanized 24 hours after 2 and 3 challenges presented an
intense inflammatory infiltrate predominantly mononuclear in the synovial membrane
and in the periarticular tissue (p <0.05), increase of joint disc thickness and pannus
formation. In the immunohistochemical analysis, these same groups had increased IL-
1β immunostaining in synoviocytes and articular cartilage, IL-6 only in the articular
cartilage and TNF-α in synoviocytes, cartilage and synovial membrane (p <0.05).
There was a significant increase in IL-1β quantification and total cell count only in the
group with 3 challenges and 24-hour euthanasia, and TNF-α quantification in the
groups euthanized 24 hours after 2 and 3 challenges (p <0.05). Therefore, the results
suggest that this model reproduces morphological alterations evidenced in the TMJ of
patients with RA. / A Artrite Reumatoide (AR) na Articulação Temporomandibular (ATM) é uma
sinovite autoimune caracterizada por hiperplasia sinovial e erosão da cartilagem e do
osso subcondral. As alterações nociceptivas, histopatológicas e imunológicas da AR
na ATM são pouco relatadas em modelos experimentais. Dessa forma, foi
desenvolvido um modelo experimental de AR crônica na ATM utilizando ratos Wistar
machos (180-220 g). Estes receberam injeções subcutâneas no dorso de 200 μl de
emulsão contento 500 μg de albumina de soro bovino metilado (mBSA) diluído em
100 μl solução salina tamponada com fosfato (PBS) e 100 μl de Adjuvante Completo
de Freund (CFA) no dia 0. Nos dias 7 e 14, os animais receberam 200 μl de emulsão,
contendo 500 μg de mBSA diluído em 100 μl PBS e 100 μl de IFA, em diferentes locais
do dorso. Injeções intra-articulares na ATM esquerda (desafios) com solução de
mBSA e PBS (10 μg/articulação) foram realizadas nos dias 21, 28 e 35. A análise da
hipernocicepção foi realizada durante todo o período de indução da AR através do
aparelho de Von Frey eletrônico. Os animais foram eutanasiados 7 dias após o
primeiro desafio, 24 horas e 7 dias após o segundo e terceiro desafios. As ATMs e
seus tecidos periarticulares foram removidos para análise histopatológica e
imunoistoquimica para TNFα, IL-1β e IL-6. O líquido sinovial foi extraído para
contagem total de células e para quantificação de TNFα. Foi observada uma redução
no limiar nociceptivo em todos os grupos experimentais que receberam mBSA na ATM
(p <0.05). Os grupos eutanasiados 24 horas após 2 e 3 desafios apresentaram um
intenso infiltrado inflamatório predominantemente mononuclear na membrana sinovial
e no tecido periarticular (p <0.05), aumento da espessura do disco articular e formação
de pannus. Na análise imunoistoquimica, esses mesmos grupos tiveram aumentada
imunomarcação de IL-1β nos sinoviócitos e na cartilagem articular, IL-6 somente na
cartilagem articular e TNF-α nos sinoviócitos, na cartilagem e na membrana sinovial
(p <0.05). Houve aumento significante na dosagem de IL-1β e contagem total de
células somente no grupo com 3 desafios e eutanasiados com 24h, e dosagem de
TNF-α nos grupos eutanasiados 24 horas após 2 e 3 desafios (p <0.05). Logo, os
resultados sugerem que esse modelo reproduz alterações morfológicas evidenciadas
na ATM de pacientes com AR.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.repositorio.ufc.br:riufc/23903 |
| Date | January 2017 |
| Creators | Sousa, Luane Macêdo |
| Contributors | Gondim, Delane Viana |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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