CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Os hidrobenzofuranÃides obtidos da Tapirira guianensis sÃo derivados alquilados da ciclohexanona, que parecem ser possÃveis precursores dos lipÃdios fenÃlicos. O presente trabalho avaliou, inicialmente, a atividade dos nove hidribenzofuranÃides em linhagens de cÃlulas, onde a amostra SJC-8 mostrou a citotoxicidade mais elevada. Posteriormente, foram avaliados os possÃveis mecanismos pelo qual esta amostra desenvolve seu efeito citotÃxico. No teste de MTT em painel de linhagens adicionais a SJC-8 apresentou valores de CI50 variando de 0.3 a 6.2Âg/mL. No teste de toxicidade aguda em nÃuplios de artÃmia e de atividade hemolÃtica em eritrÃcitos de camundongos, a SJC-8 nÃo desenvolveu toxicidade e hemÃlise, respectivamente. O mecanismo de aÃÃo da SJC-8 foi, entÃo, estudado. A viabilidade das cÃlulas HL-60 foi afetada pela SJC-8 apÃs um perÃodo de exposiÃÃo de 24h, quando analisada por exclusÃo por azul de tripan. Nas menores concentraÃÃes nÃo houve aumento do nÃmero de cÃlulas nÃo-viÃveis, mas apenas uma reduÃÃo da proliferaÃÃo celular (aÃÃo citostÃtica), enquanto que nas duas maiores concentraÃÃes, houve reduÃÃo do nÃmero de cÃlulas viÃveis e aumento do nÃmero de cÃlulas nÃo-viÃveis (efeito citotÃxico), o que corrobora com os achados da analise morfolÃgica, onde observou-se um aumento do nÃmero de cÃlulas mortas. A atividade citotÃxica da SJC-8 està relacionada com a inibiÃÃo da sÃntese de DNA, como revelado pela incorporaÃÃo do BrdU, alÃm de poder estar envolvida com a inibiÃÃo da Topoisomerase 1. Submetida ao estudo de toxicogenÃtica pelo teste do cometa em HL-60, a SJC-8 elevou os Ãndices e freqÃÃncias de dano de maneira concentraÃÃo-dependente, sendo observados tipos de danos maiores nas concentraÃÃes mais elevadas. A administraÃÃo de SJC-8 (25 ou 50mg/kg/dia) inibiu o desenvolvimento de tumor sÃlido em camundongos transplantados com Sarcoma 180 em 12,3 e 59,8% respectivamente. A atividade antitumoral da SJC-8 està relacionada com a inibiÃÃo da proliferaÃÃo do tumor. A anÃlise histopatolÃgica mostrou de forma reversÃvel, que o fÃgado à o alvo de toxicidade da droga. De fato, a atividade antitumoral da SJC-8 esta relacionada com um efeito antiproliferativo direto nas cÃlulas tumorais, sendo possÃvel assim que esta amostra possa atuar como possÃvel protÃtipo de novos agentes antitumorais. / The hydrobenzofuranoids obtained from Tapirira guianensis are alkylated derivates of cyclo-hexanone, which appear to be precursors of phenolic lipids. The present study initially examined the activity of nine hydrobenzofuranoids in cell lines, where the compound SJC-8 showed the highest cytotoxicity. In later studies, the cytotoxicity of this sample was investigated with regard to the possible mechanism of action. In the MTT assay, SJC-8 showed IC50 values of 0.3 to 6.2Âg/mL in a panel of cell lines. In acute toxicity assays in artemia nauplii and hemolytic activity in mouse erythrocytes, SJC-8 did not demonstrate any toxicity or hemolysis, respectively. The mechanism of action of SJC-8 was then studied. SJC-8 affected cell viability in HL-60 after an exposure period of 24h, when determined by trypan blue exclusion. At lower concentrations, there was no increase in the number of non-viable cells but only a reduction in cell proliferation (cytostatic effect). However, at the two highest concentrations, there was a decrease in the number of viable cells and increase in number of non-viable cells (cytotoxic effect), which corroborate the findings of morphologic analysis showing an increase in the number of dead cells. The cytotoxicity of SJC-8 involves the inhibition of DNA synthesis, as revealed by inhibition of BrdU incorporation into DNA and of topoisomerase 1 activity. SJC-8 was tested for genotoxicity using the comet assay in HL-60 cells, and was found to cause an increase in the frequency of DNA damage in a concentration-dependent manner, where more severe damage was seen at higher concentrations of SJC-8. The administration of SJC-8 (25 or 50 mg/kg/day) inhibited solid tumor growth in mice transplanted with sarcoma 180, by 12.3 and 59.8%, respectively. The antitumor activity of SJC-8 is attributed to inhibition of tumor cell proliferation. Histopathologic analysis showed in a reversible manner that the liver is the target of drug toxicity. In conclusion, SJC-8 has antitumor activity where it has a direct antiproliferative effect on tumor cells, and may therefore serve as a prototype for new antitumor agents.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:488 |
| Date | 12 December 2006 |
| Creators | PatrÃcia MarÃal da Costa |
| Contributors | ClÃudia do à Pessoa, Manoel Odorico de Moraes Filho, Francisca ClÃa FlorenÃo de Sousa |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Farmacologia, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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