Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / As imunoglobulinas sÃo proteÃnas do soro humano que despertam maior interesse em sua utilizaÃÃo devido Ãs inÃmeras funÃÃes diagnÃsticas e terapÃuticas. Pesquisas nessa Ãrea contemplam assuntos de Ãmbito tÃcnico cientÃfico, beneficiando setores carentes no nosso paÃs no quesito da saÃde humana. Nesse contexto, o presente trabalho teve por finalidade avaliar o potencial da matriz quitosana/alginato epoxilado (QAE) com corantes reativos imobilizados, na purificaÃÃo de IgG humana utilizando a tÃcnica por cromatografia de afinidade. Os corantes Cibacron Blue F3GA, Reativo Verde 5 (Procion HE-4G) e o Reativo Azul 4 (Procion Blue MX-R) foram imobilizados nas partÃculas de quitosana/alginato epoxilada e nÃo foi observado desprendimentos desses corantes nos ensaios cromatogrÃficos. A matriz de QAE com e sem corantes imobilizados foram caracterizados por Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR) visando verificar os grupos especÃficos dos corantes na superfÃcie da matriz. Foi investigado a influÃncia do tipo de tampÃo e pH na adsorÃÃo de IgG de alta pureza. Os materiais apresentaram elevada capacidade de adsorÃÃo para diferentes sistemas tamponantes: MOPS (Ãcido morfolinopropanosulfÃnico), HEPES (Ãcido N-2-hidroxietilpiperazino-Nâ-2-etanosulfÃnico), MES (4 â Ãcido morfolinoetanosulfÃnico) e FS (Fosfato de SÃdio). As isotermas de adsorÃÃo foram obtidas em sistemas em batelada e os dados experimentais foram bem correlacionados pelos modelos de Langmuir e Langmuir-Freundlich. O adsorvente quitosana/alginato epoxilado com corante Reativo Azul 4 imobilizado apresentou quantidade mÃxima de adsorÃÃo de IgG superior a 180 mg/g, superando os outros materiais. Os trÃs adsorventes apresentaram constantes de dissociaÃÃo (KD e KDLF) entre 10-5 e 10-6 mol/L. Os ensaios cromatogrÃficos foram realizados com IgG de alta pureza e soro humano diluÃdo 10 vezes e realizaram-se balanÃos de massas, anÃlises de eletroforeses e quantificaÃÃo de proteÃnas totais pelo mÃtodo de Bradford. Nos ensaios em leito fixo com soro humano necessitou-se de 15,0 mL de soro diluÃdo para a saturaÃÃo do leito e as amostras coletadas das fraÃÃes cromatogrÃficas indicaram a purificaÃÃo de IgG do soro humano atravÃs da eletroforese. Entre os trÃs ligantes pseudobiespecÃficos (corantes) estudados no presente trabalho, o corante Cibacron Blue F3GA apresentou maior potencial para purificar IgG do soro humano em todos os trÃs tampÃes analisados, devido a maior seletividade deste por IgG comparado aos demais corantes imobilizados.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:6171 |
| Date | 27 July 2012 |
| Creators | Diego RomÃo Gondim |
| Contributors | Ivanildo Josà da Silva Junior |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Engenharia QuÃmica, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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